納米al2o3對斑馬魚肝基因表達的影響【開題報告】

1、<p><b>　　畢業(yè)論文開題報告</b></p><p><b>　　生物技術</b></p><p>　　納米Al2O3對斑馬魚肝基因表達的影響</p><p>　　一、選題的背景與意義</p><p>　　納米材料的生物安全性問題之所以受到科學家們的關注，是因為納米材料特殊的物理化

2、學性質可能會導致它們在生物體內的生理行為與常規(guī)物質不同，在環(huán)境中的行為也可能與常規(guī)物質不一樣。目前納米材料的生物效應、環(huán)境效應以及毒性和安全性的研究才剛剛起步，科學家們只對納米TiO2、SiO2、碳納米管、富勒烯和納米鐵粉等少數幾種納米材料的生物效應進行了初步研究。結果均表明這幾種納米材料對生命體有一定的毒性作用。如用吸入法和注入法將納米TiO2導入小鼠、大鼠和豚鼠體內，發(fā)現TiO2能誘發(fā)肺部炎癥，并在肺部嚴重沉積，難以清除；在紫外光的

3、作用下，納米TiO2 能加強Gfsk-S1魚細胞中的DNA的損傷等。但是，納米材料的毒性及其作用機理還遠遠未被充分揭示，金屬納米顆粒是其中的一種類型，工業(yè)上大量生產的金屬納米粒子對生物及環(huán)境的效應還是未知數，目前國內外對金屬納米顆粒的生物學效應研究較少，有報道表明納米A12O3粉可小鼠使血清LDH活性明顯增高；而納米ZnO對雌性小鼠的肝、腎和心肌有輕度毒性；Fe2O3納米粒子在一定范圍內可抑制HepG2細胞增值，高劑量導致細胞線粒體膜電

4、位下降，且細胞凋亡率顯著增高。在對小鼠的研究</p><p>　　斑馬魚是一種小型熱帶淡水魚，生存能力強，遺傳背景清楚，物種穩(wěn)定，繁殖力強，胚胎透明，易于觀察，基于自身的這些優(yōu)點最早是作為胚胎發(fā)育生物學和遺傳學的實驗動物模型。自20世紀70年代末期，國外開始運用斑馬魚進行化學物的急性毒性研究， 現在斑馬魚(Brachydanio rerio)是國際標準化組織（ISO）推薦使用的標準化魚類毒性試驗動物。</p

5、><p>　　本課題正是基于這一點，選取斑馬魚作為實驗動物，研究納米Al2O3對斑馬魚生理代謝的影響及其相關基因表達的研究,為該領域的研究提供參考，積累數據，更為深入了解納米Al2O3的毒性及其機制提供基礎依據。</p><p>　　二、研究的基本內容與擬解決的主要問題：</p><p><b>　　基本內容</b></p><

6、p>　　1. 從轉錄水平研究納米Al2O3對魚的生物學效應，包括RNA含量的測定；</p><p>　　2. 從分子水平研究納米Al2O3對魚的生物學效應，如hsp70等基因的表達。</p><p><b>　　擬解決的主要問題</b></p><p>　　1. 斑馬魚魚肝RNA的提取及含量的測定；</p><p>

7、;　　2. 檢測熱應激蛋白70（hsp70），金屬調節(jié)轉錄因子（mtf1），多藥耐藥基因（mdr)、 Na+-K+-ATP(nka)等基因的表達。</p><p>　　三、研究的方法與技術路線：</p><p><b>　　研究方法：</b></p><p>　　運用RT-PCR技術，檢測熱應激蛋白70（hsp70），金屬調節(jié)轉錄因子（mtf1

8、），多藥耐藥基因（mdr)、Na+-K+-ATP(nka)等基因在納米A12O3脅迫下的表達；</p><p><b>　　研究技術路線：</b></p><p>　　四、研究的總體安排與進度：</p><p>　　2009年10、11月 ： 納米A12O3 處理斑馬魚；</p><p>　　斑馬魚肝臟RNA提??；<

9、;/p><p>　　2010年3月至今： RT-PCR 檢測hsp70、mtf1、actin等基因的表達水平；</p><p>　　分析實驗結果（目前該部分工作已經接近尾聲）。 </p><p><b>　　五、主要參考文獻：</b></p><p>　　[1] 湯宏波. 納米材料在生態(tài)環(huán)境方面的應用及潛在危害[J].

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