甘草酸單胺鹽制備工藝研究[畢業(yè)設(shè)計(jì)]

1、<p>　　本科畢業(yè)設(shè)計(jì)(論文)</p><p><b>　　（二零 屆）</b></p><p>　　甘草酸單胺鹽制備工藝研究</p><p>　　所在學(xué)院 </p><p>　　專業(yè)班級(jí) 生物工程 </p&

2、gt;<p>　　學(xué)生姓名 學(xué)號(hào) </p><p>　　指導(dǎo)教師 職稱 </p><p>　　完成日期 年 月 </p><p>　　摘要:本文用甘草酸粗品為原料合成甘草酸單胺鹽，通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)其最佳工藝條件

3、進(jìn)行研究。運(yùn)用液相色譜法對(duì)甘草酸（單胺鹽）進(jìn)行定性和定量測(cè)定。</p><p>　　甘草酸單胺鹽合成前，選擇了95％乙醇:丙酮=2:1(V/v)做為溶解甘草酸的溶劑，超聲溶解2次，每次的料液比為l:10，即可使甘草酸全部溶出。在甘草酸單胺鹽的合成上，確定甘草酸三胺鹽和甘草酸單胺鹽合成的pH值分別為7.5和4.5。</p><p>　　關(guān)鍵詞: 甘草酸單胺鹽 合成 正交試驗(yàn) </p&g

4、t;<p>　　Ammonium Glycyrrhetate synthesis and Technology</p><p>　　Abstract: This paper uses glycyrrhizic acid crude products as raw materials synthesis glycyrrhizic acid single ammonium salt,and to stu

5、dy the optimum extraction process of polysaccharide by a single factor experiment and orthognal experiment in different experimental groups.Using liquid chromatographic method for glycyrrhizic acid (single ammonium salt)

6、 for qualitative and quantitative determination.</p><p>　　Before the synthesis of MAG，95％ ethanol and acetone(v：v=2：1)were made as the extraction solvent of the GA.GA was extracted twice under ultrasonic tre

7、atment(each time the ratio of solid to liquid was l：10).The pH of synthesis of triammonium glycyrrkizinate(TAG) and MAG were 7.5 and 4.5.</p><p>　　Keywords: monoammonium glycyrrhizinate(MAG); synthesis;ort

8、hognal experiment</p><p><b>　　目 錄</b></p><p><b>　　摘要I</b></p><p>　　AbstractII</p><p><b>　　1 緒論1</b></p><p>　　1.1

9、 選題的背景和意義1</p><p>　　1.2 甘草酸純化的研究進(jìn)展1</p><p>　　1.2.1 泡沫分離法1</p><p>　　1.2.2 反復(fù)結(jié)晶法1</p><p>　　1.2.3 溶劑萃取法2</p><p>　　1.2.4 樹(shù)脂法2</p><p>　　1.2.

10、5 混合法2</p><p>　　1.2.6 超過(guò)濾法2</p><p>　　1.2.7 雙相萃取法3</p><p>　　1.3 甘草酸的藥理作用3</p><p>　　1.3.1 抗炎3</p><p>　　1.3.2 抗?jié)?</p><p>　　1.3.3 抗病毒3<

11、;/p><p>　　1.3.4 抗癌3</p><p>　　1.3.5 抑菌3</p><p>　　1.3.6 免疫調(diào)節(jié)作用3</p><p><b>　　2 實(shí)驗(yàn)部分5</b></p><p>　　2.1 材料和試劑5</p><p>　　2.1.1 原材料5

12、</p><p>　　2.1.2 試劑5</p><p>　　2.1.3 儀器5</p><p>　　2.2 實(shí)驗(yàn)方法5</p><p>　　2.2.1 實(shí)驗(yàn)流程5</p><p>　　2.2.2 甘草酸（單胺鹽）的定量測(cè)定 HPLC法6</p><p>　　2.2.3 甘草酸的提取

13、6</p><p>　　2.2.4 正交試驗(yàn)7</p><p>　　2.2.5 合成甘草酸三胺鹽的pH值的確定8</p><p>　　2.2.6 合成甘草酸單胺鹽的pH值的確定8</p><p>　　3 結(jié)果與分析9</p><p>　　3.1 甘草酸的溶解9</p><p>　

14、　3.1.1 溶解溶劑的選擇結(jié)果9</p><p>　　3.1.2 料液比的選擇結(jié)果9</p><p>　　3.1.3 超聲時(shí)間的選擇結(jié)果10</p><p>　　3.1.4 溶解次數(shù)的選擇結(jié)果10</p><p>　　3.2 超聲波法提取甘草酸的正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果12</p><p>　　3.3 合成甘草酸三

15、胺鹽的pH值的確定13</p><p>　　3.4 合成甘草酸單胺鹽的pH值的確定14</p><p>　　3.5 小結(jié)14</p><p><b>　　4 結(jié)論15</b></p><p><b>　　參考文獻(xiàn)16</b></p><p>　　致謝錯(cuò)誤!未

16、定義書(shū)簽。</p><p><b>　　1 緒論</b></p><p>　　1.1 選題的背景和意義</p><p>　　甘草作為一種集藥用、飼用、防風(fēng)固沙為一體的草原植物，其身價(jià)越來(lái)越高。目前世界上能出口甘草的國(guó)家只有伊朗、伊拉克、俄羅斯、阿富汗、±耳其和中國(guó)。兩伊戰(zhàn)爭(zhēng)以來(lái)，我國(guó)甘草更是倍受關(guān)注。目前，我國(guó)甘草出口30多個(gè)國(guó)家

17、和地區(qū)，每年出口量達(dá)幾十萬(wàn)噸，仍然不能滿足國(guó)際市場(chǎng)的需求，僅日本年需求就達(dá)幾萬(wàn)噸之多，韓國(guó)年需求量也達(dá)到萬(wàn)噸以上，我國(guó)自己年需求甘草浸膏也有幾萬(wàn)噸。我國(guó)藥用甘草及其制品主要用于出口創(chuàng)匯，以原材料和附加值低的粗加工產(chǎn)品為主，基本沒(méi)有高附加值的精加工產(chǎn)品的出口。日本以低價(jià)購(gòu)買我國(guó)的甘草及粗加工產(chǎn)品，將其加工成精品后再以高價(jià)出口歐美及東南亞等國(guó)，所以很有必要對(duì)甘草進(jìn)行深加工，開(kāi)發(fā)具有多種藥用功能的衍生物，提高資源的利用率和附加值。而且甘草產(chǎn)區(qū)

18、廣泛分布于我國(guó)西北、華北、東北地區(qū)，甘草的深度開(kāi)發(fā)不但對(duì)改變食用甜素的結(jié)構(gòu)、增強(qiáng)人民健康有好處，還能為“三北”廣大貧困地區(qū)開(kāi)發(fā)鄉(xiāng)鎮(zhèn)工業(yè)，具有重要的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)意義。</p><p>　　甘草酸的許多金屬鹽人體均可適當(dāng)吸收，不易造成元素的積蓄中毒，常被用來(lái)配制成健脾開(kāi)胃、止咳化痰、順氣止喘、治療慢性肝炎、降低血脂的良藥[1]。且能與多種生物堿、抗生素、氨基酸等生成復(fù)鹽或復(fù)方制劑，具有協(xié)同、增溶，增加藥物穩(wěn)定性、提高生

19、物利用率及降低毒副作用的功效[2]。</p><p>　　有關(guān)甘草酸單胺鹽精制方法的報(bào)道很多，但由于甘草中除甘草酸外，還含有大量的物理化學(xué)性質(zhì)相近的有色物質(zhì)，苦澀味物質(zhì)及其它成分。如甘草查耳酮、甘草素、甘草異黃酮及阿魏酸等，在提取純化過(guò)程中較難簡(jiǎn)單的除凈。經(jīng)典的方法有重結(jié)晶法，但此方法產(chǎn)品純度不高，收率偏低。因此本文想進(jìn)一步研究甘草酸單胺鹽，提高其純度和收率，創(chuàng)造其更大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。</p><

20、p>　　1.2 甘草酸純化的研究進(jìn)展</p><p>　　1.2.1 泡沫分離法[3]</p><p>　　泡沫分離是基于表面活性的分離技術(shù)口 。它已被成功的用于礦物浮選、廢水處理以及蛋白質(zhì)和表面活性劑的濃縮。泡沫分離的設(shè)備簡(jiǎn)單，造價(jià)低廉，即使在工業(yè)規(guī)模上，完成一次泡沫分離的時(shí)間也比典型的色譜分離少的多。某些草藥中的三萜皂苷[4]比如甘草酸、人參皂苷具有表面活性，因此它們可以用泡

21、沫分離法來(lái)純化富集。</p><p>　　1.2.2 反復(fù)結(jié)晶法[5]</p><p>　　甘草的水浸提液濃縮后滴入硫酸酸析，加丙酮和氫氧化鉀乙醇溶液溶解提取得甘草酸三鉀鹽，然后將甘草酸三鉀鹽溶于95％以上的冰醋酸中，析出甘草酸單鉀鹽，提取率可達(dá)95％以上。但此方法步驟較多。</p><p>　　1.2.3 溶劑萃取法[5]</p><p&g

22、t;　　甘草酸浸提液用鹽酸調(diào)節(jié)pH至1.5，磷酸三丁酯、異辛醇、正己醇、異戊醇等萃取，靜置后，采用pH12.0的水反萃，活性炭脫色，酸化沉淀后得到精制甘草酸。王世潤(rùn)等將甘草的提取液濃縮，95％的乙醇沉淀除去植物蛋白、多糖后，用濃硫酸調(diào)pH值，使甘草酸沉淀析出，用60～70℃的稀乙醇重結(jié)晶，得到含量大于65％的甘草酸。</p><p>　　1.2.4 樹(shù)脂法[5]</p><p>　　由于

23、甘草酸分子中含有3個(gè)羧基而呈弱酸性，所以可以吸附在陰離子交換樹(shù)脂上，再用弱堿性物質(zhì)洗脫。日本專利以弱堿樹(shù)臘DuoliteA 374純化甘草酸，2％氨水洗脫即得產(chǎn)品。但離子交換樹(shù)脂法處理量小，提取率低。大孔樹(shù)脂法是一種較為經(jīng)濟(jì)實(shí)用的方法，它具有吸附性能好、效率高、再生容易等優(yōu)點(diǎn)。其關(guān)鍵是樹(shù)脂對(duì)甘草酸及雜質(zhì)的吸附能力差別。雜質(zhì)如黃酮甙等可被吸附且吸附容量大，而甘草酸分子中由于有兩個(gè)葡萄糖醛酸，所以親水性較強(qiáng)而僅呈弱吸附，脫附時(shí)首先洗脫下來(lái)，

24、從而得以與雜質(zhì)分開(kāi)。傅冬和等用DMl30大孔吸附樹(shù)脂吸附，10％的乙醇溶液洗脫，得到純度高達(dá)94.68％的甘草酸，得率為35.31％。崔杏雨等先用酸沉淀法制得純度為40％的粗制甘草酸，然后通過(guò)AB一8大孔樹(shù)脂，依次用水、10％乙醇洗脫，洗脫液加適量的活性炭于冰醋酸中脫色重結(jié)晶，得純度90％以上的無(wú)色產(chǎn)品，收率達(dá)70％--80％。姚德佳等將用DA-201型大孔樹(shù)脂吸附，再以水或低級(jí)醇洗脫，得純度為91％的甘草酸，得率為45.7％；若再過(guò)一

25、次DA20I樹(shù)脂，可得純度為98.3％的精制甘草酸。日本專利報(bào)道，將粗甘草酸過(guò)XAD4(或XAD8、XADll)樹(shù)脂</p><p>　　20％甲醇水溶液洗脫可得純度為82.3％的甘草酸。雖然大孔樹(shù)脂的分離效果較好，產(chǎn)品的品質(zhì)很高，但在操作過(guò)程中使用大量的乙醇作為洗脫劑和再生劑，且低濃度的乙醇回收成本高，造成一定的浪費(fèi)[6]。</p><p>　　1.2.5 混合法[5]</p&g

26、t;<p>　　潘福生等將酸析、聚酰胺吸附和國(guó)產(chǎn)732強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂結(jié)合制得高純度的可用于靜脈注射原料的甘草酸結(jié)晶(99.5％-100％)。</p><p>　　1.2.6 超過(guò)濾法</p><p>　　日本專利[7]將36.6％粗甘草酸用pH9.8的氨水溶解，通過(guò)NTU一2000在2kg／cm壓力下進(jìn)行超濾，除去分子量100000的雜質(zhì)，得到52.3％的甘草酸。馬明

27、等采用超濾與大孔樹(shù)脂吸附聯(lián)合工藝路線提取甘草酸和甘草黃酮類化合物。但超濾法處理量有限，不易進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)，定期更換膜增加了操作費(fèi)用。</p><p>　　1.2.7 雙相萃取法</p><p>　　雙水相萃取技術(shù)是指親水性聚合物溶液在一定條件下可以形成雙水相，當(dāng)被提取物進(jìn)入雙水相體系后，由于其表面性質(zhì)、電荷作用和各種力(如疏水鍵、氫鍵和離子鍵等)的存在以及環(huán)境因素等的影響，使其在上下相中

28、的濃度不同而達(dá)到分離目的?；羟錥8]等采用環(huán)氧乙烷一環(huán)氧丙烷共聚物(Eoeo)／磷酸鉀(KHP)體系對(duì)甘草酸單胺鹽進(jìn)行提取純化，最大得率為68.4％。雙水相萃取技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是有機(jī)溶劑用量少，操作簡(jiǎn)單。帶來(lái)的問(wèn)題是使用磷酸鹽對(duì)環(huán)境造成了一定的污染。</p><p>　　反復(fù)結(jié)晶法、溶劑萃取法、樹(shù)脂法、聚酰胺法、超濾法等這些方法可以制各得到純度較高的甘草酸， 但是工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)成本很高，人工耗時(shí)多，而且要使用大量的有機(jī)溶

29、劑，對(duì)環(huán)境造成污染。以更快速更廉價(jià)的方法比如泡沫分離作為柱色譜的前富集方法或柱色譜后的后純化則是一個(gè)有效的途徑。</p><p>　　1.3 甘草酸的藥理作用 [9-11] </p><p><b>　　1.3.1 抗炎</b></p><p>　　Abe等用甘草酸治療感染了球蛋白誘導(dǎo)的肝炎的小鼠發(fā)現(xiàn)，與空白對(duì)照組相比，甘草酸可以促進(jìn)抗原肝

30、樹(shù)枝狀細(xì)胞產(chǎn)生interleukin(IL)-10，從而減輕炎癥。含甘草酸的甘草提取物可以有效治療過(guò)敏性皮炎如濕疹、瘙癢癥和皮膚囊腫。</p><p>　　1.3.2 抗?jié)?lt;/p><p>　　甘草酸及其衍生物可以抗由布洛芬引起的大鼠胃潰瘍。</p><p>　　1.3.3 抗病毒</p><p>　　甘草酸在臨床上已被用于治療慢性肝炎

31、。甘草酸在體外可明顯抑制HIV陽(yáng)性病人血單核細(xì)胞中HIV復(fù)制。甘草酸還可以減少感染了致死劑量流感病毒的小鼠的發(fā)病率和死亡率。Cinatl等比較了三唑核苷、6-azauridine、菌酚酸、吡唑呋哺菌素和甘草酸對(duì)兩種SARS冠狀病毒FFM一1和FFM-2的抑制，發(fā)現(xiàn)甘草酸對(duì)病毒復(fù)制的抑制最強(qiáng)。</p><p><b>　　1.3.4 抗癌</b></p><p>　　

32、甘草酸可以通過(guò)調(diào)節(jié)Th2細(xì)胞達(dá)到抑制B16黑素瘤向肺部轉(zhuǎn)移的效果。Shiota等發(fā)現(xiàn)甘草酸可顯著抑制二乙基亞硝胺(NDEA)介導(dǎo)的肝細(xì)胞癌。</p><p><b>　　1.3.5 抑菌</b></p><p>　　當(dāng)甘草甜素的濃度為O.51％時(shí)，可以完全抑制牙菌斑的形成。</p><p>　　1.3.6 免疫調(diào)節(jié)作用</p>

33、<p>　　甘草酸類具有非特異性免疫調(diào)節(jié)作用，主要是增強(qiáng)吞噬功能，還可選擇性地增強(qiáng)輔助性T淋巴細(xì)胞的增殖能力和活性。</p><p><b>　　2 實(shí)驗(yàn)部分</b></p><p>　　2.1 材料和試劑</p><p>　　2.1.1 原材料</p><p>　　表2-1 原材料規(guī)格</p&g

34、t;<p><b>　　2.1.2 試劑</b></p><p>　　表2-2 試劑種類及規(guī)格</p><p><b>　　2.1.3 儀器</b></p><p>　　表2-3 儀器種類及規(guī)格</p><p><b>　　2.2 實(shí)驗(yàn)方法</b></

35、p><p>　　2.2.1 實(shí)驗(yàn)流程</p><p>　　甘草經(jīng)室溫干燥后磨成粉末，以適量水浸泡20h，過(guò)濾，濾渣再用適量水浸泡20h，過(guò)濾。合并濾液。在攪拌下緩緩滴加3 mol/L硫酸至溶液的pH為1.9.放置冰箱6h以上（可用離心），傾去上清液[12]。沉淀以適量溶劑提取數(shù)次（超聲波萃取[13]），合并提取液，滴加氨水至pH7.5--8，減壓蒸干，得糖漿狀物。趁熱加入適量冰醋酸使之溶解，

36、室溫靜置，投入甘草酸單胺鹽粗品，翌日吸濾，沉淀用少量冰醋酸洗滌1-2次，得到淺黃色或近白色甘草酸單胺鹽濕粗品。后用75%乙醇進(jìn)行活性炭脫色重結(jié)晶，得白色針狀結(jié)晶，稱量。[14]</p><p>　　2.2.2 甘草酸（單胺鹽）的定量測(cè)定 HPLC法[15-16]</p><p>　　HPLC的分析條件：色譜柱：Supelcosil C柱(5um，25cm4.6mm)</p>

37、<p>　　流動(dòng)相：甲醇-冰醋酸(75：25)</p><p>　　柱溫：30℃；流速：1.0mL／min</p><p>　　檢測(cè)波長(zhǎng)：250nm</p><p>　　2.2.3 甘草酸的提取</p><p>　　2.2.3.1 提取溶劑的選擇[17]</p><p>　　準(zhǔn)確稱取100mg甘草酸粉末

38、6份，分別加入2mL以下混合溶液：</p><p>　　表2-4 不同試劑配比</p><p>　　超聲提取1 h后，離心取上清液，按2.2.2 測(cè)定超聲溶解液的甘草酸的含量，得甘草酸的峰面積。</p><p>　　2.2.3.2 料液比的選擇</p><p>　　準(zhǔn)確稱取500mg甘草酸粉末5份，按以下量加入溶劑溶解：</p>

39、<p>　　表2-5 溶劑體積選取</p><p>　　超聲提取1 h后，離心取上清液，按2.2.2 測(cè)定超聲溶解液的甘草酸的含量，得甘草酸的峰面積。</p><p>　　2.2.3.3超聲時(shí)間</p><p>　　準(zhǔn)確稱取500mg甘草酸粉末5份，分別加入上步確定的等體積溶劑，如下表格要求的超聲時(shí)間提?。?lt;/p><p>　　

40、表2-6 超聲時(shí)間選取</p><p>　　離心取上清液，按2.2.2 測(cè)定超聲溶解液的甘草酸的含量，得甘草酸的峰面積。</p><p>　　2.2.3.4 提取次數(shù)選擇</p><p>　　準(zhǔn)確稱取500mg甘草酸粉末5份，分別加入上步確定的等體積溶劑，按上步確定的超聲時(shí)間超生提取，溶解次數(shù)分別按如下表格：</p><p>　　表2-7 溶

41、解次數(shù)選取</p><p>　　離心取每次的上清液，合并按2.2.2 測(cè)定超聲溶解液的甘草酸的含量，得甘草酸的峰面積.</p><p>　　2.2.4 正交試驗(yàn)</p><p>　　根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，分別選取時(shí)間、料液比、溫度、提取次數(shù)作為正交試驗(yàn)的考察因素（見(jiàn)表2-8），做L9(33)正交實(shí)驗(yàn)（見(jiàn)表2-9）。</p><p>　　表2-

42、8 因素水平表</p><p>　　表2-9 超聲波法提取甘草多糖的正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) </p><p>　　2.2.5 合成甘草酸三胺鹽的pH值的確定</p><p>　　準(zhǔn)確吸取5份20ml的按上述純化制得的甘草酸的溶解液，通過(guò)磁力攪拌器充分?jǐn)嚢?，攪拌過(guò)程中滴加氨水，分別滴加到pH為6.5、7、7.5、8、8.5，攪拌15 min后，離心，傾倒上清液后，于沉淀(即

43、：甘草酸三胺鹽)中馬上滴加冰醋酸至4.5后，離心，沉淀(即：甘草酸單胺鹽)加入10 mL </p><p>　　50％乙醇溶解，過(guò)濾，得甘草酸單胺鹽的醇溶液，按2.2.2色譜分析條件測(cè)定甘草酸單胺鹽的吸收峰面積，確定合成甘草酸三胺鹽的最佳ph值。</p><p>　　2.2.6 合成甘草酸單胺鹽的pH值的確定</p><p>　　準(zhǔn)確吸取5份20 mL的按上述純化制

44、得的甘草酸的溶解液，通過(guò)磁力攪拌器充分?jǐn)嚢?，攪拌過(guò)程中滴加氨水，滴加pH至上步所確定的pH值，攪拌15min后，離心，傾倒上清液后，于沉淀(即：甘草酸三胺鹽)中馬上滴加冰醋酸至pH分別為3.5，4，4.5，5，5.5后，離心，沉淀(即：甘草酸單胺鹽)加入10 mL 50％乙醇溶解，過(guò)濾，得甘草酸單胺鹽的醇溶液，按2.2.2色譜分析條件測(cè)定甘草酸單胺鹽的吸收峰面積，確定合成甘草酸單胺鹽的最佳pH值。</p><p>

45、;<b>　　3 結(jié)果與分析</b></p><p>　　3.1 甘草酸的溶解</p><p>　　3.1.1 溶解溶劑的選擇結(jié)果</p><p>　　表3-1 不同溶劑萃取甘草酸的液相峰面積</p><p>　　圖1 溶劑對(duì)甘草酸溶解的影響</p><p>　　從表3和圖1上看出，當(dāng)乙醇：丙

46、酮=2：1時(shí)，甘草酸的溶解量最多。因此，選擇此溶劑比例的乙醇丙酮混合溶液作為甘草酸的溶解溶劑。</p><p>　　3.1.2料液比的選擇結(jié)果 </p><p>　　表3-2 不同料液比萃取甘草酸的液相峰面積</p><p>　　圖2 料液比對(duì)甘草酸溶解的影響</p><p>　　從表4和圖2看出不同的料液比對(duì)甘草酸的溶解有一定的影響。當(dāng)料液

47、比為1：10時(shí)，甘草酸的溶解量最大，故此采用此料液比來(lái)溶解甘草酸。</p><p>　　3.1.3 超聲時(shí)間的選擇結(jié)果</p><p>　　表3-3 超聲時(shí)間對(duì)甘草酸溶解的影響</p><p>　　圖3 超聲時(shí)間對(duì)甘草酸溶解的影響</p><p>　　從表5和圖3看出，隨著超聲時(shí)間的增長(zhǎng)，甘草酸的溶解量增大，在超聲時(shí)間為60min時(shí)，達(dá)到最大

48、，隨后隨著超聲時(shí)間的增長(zhǎng)，對(duì)甘草酸溶解的量影響不大，故采用60min的超聲時(shí)間來(lái)溶解甘草酸。</p><p>　　3.1.4 溶解次數(shù)的選擇結(jié)果</p><p>　　表3-4溶解次數(shù)對(duì)甘草酸溶解的影響</p><p>　　圖4溶解次數(shù)對(duì)甘草酸溶解的影響</p><p>　　從表6和圖4看出，溶解次數(shù)為兩次以上時(shí)，甘草酸的溶解量改變不大，故采用

49、溶解次數(shù)為2次來(lái)溶解甘草酸。</p><p>　　甘草酸單胺鹽標(biāo)準(zhǔn)品液相譜圖如下：</p><p>　　圖5 甘草酸單胺鹽的標(biāo)準(zhǔn)液相譜圖</p><p>　　圖6 合成的甘草酸單胺鹽液相譜圖</p><p>　　3.2 超聲波法提取甘草酸的正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果</p><p>　　表3-5 超聲波法提取甘草酸正交試驗(yàn)結(jié)果分析&

50、lt;/p><p>　　通過(guò)表7的結(jié)果直觀分析可以看出：各因素的主次順序?yàn)榱弦罕龋ˋ）>超聲時(shí)間（C）>溶解次數(shù)(B)，最佳提取條件是：A2B2C2。</p><p>　　3.3 合成甘草酸三胺鹽的pH值的確定</p><p>　　表3-6 pH值對(duì)甘草酸三胺鹽合成的影響</p><p>　　圖7 pH值對(duì)甘草酸三胺鹽合成的影響<

51、;/p><p>　　由于合成的甘草酸三胺鹽易水解而使成分變復(fù)雜，因此不能干燥或久置，要趁濕盡快用冰醋酸處理成甘草酸單胺鹽，根據(jù)最終的甘草酸單胺鹽的含量來(lái)確定合成甘草酸三胺鹽的最佳pH值。從圖5可以看出，pH在6.5～7.5時(shí)，甘草酸單胺鹽的含量逐漸增大，pH在7.5～8.5時(shí)，甘草酸單胺鹽的含量逐漸減小，這與合成的甘草酸三胺鹽水解了有關(guān)，因此，選用pH=7.5為合成甘草酸三胺鹽的最佳pH值。</p>&

52、lt;p>　　3.4 合成甘草酸單胺鹽的pH值的確定</p><p>　　表3-7 pH值對(duì)甘草酸三胺鹽合成的影響</p><p>　　圖8 pH值對(duì)甘草酸三胺鹽合成的影響</p><p>　　從圖6可以看出，當(dāng)往合成的甘草酸三胺鹽溶液(pH=7.5)中滴加冰醋酸時(shí)，隨著pH值逐漸變小，甘草酸單胺鹽的含量逐漸增大，當(dāng)pH=4.5時(shí)，合成的甘草酸單胺鹽含量最大，

53、pH在3.5～4.5范圍內(nèi)，隨著pH值逐漸變小，甘草酸單胺鹽含量減小，表明最后一個(gè)胺根也被氫置換生成了其他物質(zhì)，因此，選擇pH=4.5為合成甘草酸單胺鹽的最佳pH值。</p><p><b>　　3.5 小結(jié)</b></p><p>　　在甘草酸單胺鹽的合成上，首先選擇了乙醇：丙酮=2：1(V／V)做為溶解甘草酸的溶劑，超聲溶解2次，每次的料液比為1：10，超聲時(shí)間為

54、60min即可使甘草酸溶出量達(dá)到最大。在甘草酸單胺鹽合成的pH選擇上，根據(jù)pH值的摸索，在甘草酸三胺鹽的合成上pH選擇為7.5，甘草酸單胺鹽的合成上pH選擇為4.5。</p><p><b>　　4 結(jié)論</b></p><p>　　在甘草酸單胺鹽合成前，先要對(duì)甘草酸粉末進(jìn)行溶解溶劑的選擇，應(yīng)滿足能去除更多的雜質(zhì)，不影響下一步的合成，通過(guò)甘草酸的溶解率，選擇的溶劑為

55、乙醇：丙酮(V：V)=2：l，進(jìn)行超聲波輔助溶解提取，料液比為l：10，溶解提取兩次即可。在甘草酸單胺鹽合成條件的摸索上，通過(guò)甘草酸單胺鹽的最終得率，確定甘草酸三胺鹽和甘草酸單胺鹽合成的pH值分別為7.5和4.5。</p><p>　　本論文完成了甘草酸單胺鹽的合成工作，由于研究水平、時(shí)間、實(shí)驗(yàn)條件等的限制，還有許多工作需要進(jìn)一步完善和解決。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)

56、</b></p><p>　　[1] 朱秀萍.甘草及其衍生物的臨床應(yīng)用.航空航天醫(yī)藥[J],2010,21(4):580-583</p><p>　　[2] 賀小賢,陳合.甘草酸提取工藝研究帆.陜西科技大學(xué)學(xué)報(bào),2004,22(6)I:26-29</p><p>　　[3] 付博強(qiáng),李歡,劉劼,等.泡沫分離對(duì)甘草酸的純化和富集[J].現(xiàn)代中

57、藥研究與實(shí)</p><p>　　踐,2004,18(z1)：57-61</p><p>　　[4] 劉育辰,王文全,郭洪祝.甘草中三萜類化合物的生物轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展.中藥[J],2010,33(3):477-482</p><p>　　[5] 付博強(qiáng).甘草中有效成分的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定、生物活性測(cè)定及活性指紋圖譜研究，2005.</p><p

58、>　　[6] Kim DH,Hong SW,Kim BT,et al1 Biotransformation of glycyrrhizin by human intestinal bacteria and its relation to biological activites[J],Arch Pharm Res1,2000, 23( 2) :1722-1771</p><p>　　[7] 日本公開(kāi)

59、特許公報(bào)，81-128795.</p><p>　　[8] 霍清,林強(qiáng).利用雙水相體系的溫度誘導(dǎo)效應(yīng)萃取甘草酸[J].化學(xué)通報(bào),2002,5:349-352</p><p>　　[9] 胡金鋒,沈鳳嘉.甘草在醫(yī)藥等方面的深度開(kāi)發(fā)及綜合利用[J].中草藥,1995,26(1):39-44</p><p>　　[10] 劉虹冰.甘草的有效成分及其藥理作用研究進(jìn)

60、展[J].中華實(shí)用醫(yī)學(xué),2003,5(11):l0l-l02 </p><p>　　[11] 木合布力·阿布力孜,毛新民,熱娜·卡斯木,等.新疆光果甘草黃酮類成分的抗氧化活性,中</p><p>　　國(guó)藥學(xué)雜志,2008,43(21):1618-1620</p><p>　　[12] 張小江,劉永錄,馬新蕾,馬慶春,張國(guó)祖.甘草中甘草酸的提取

61、工藝研究.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜質(zhì)[J],2010,4:31-33</p><p>　　[13] 趙茜,李秉滔,劉欣,李雁.超聲強(qiáng)化甘草酸提取的研究叨.食品科技,2000,(5):38-39</p><p>　　[14] 佟連生,田云.從甘草酸粗品制取甘草酸單胺鹽.China Academic Journal Electronic Pubishing </p><p&g

62、t;　　House. 2004,6(28):51</p><p>　　[15] 呂欣,付玉杰,王微,等.紫外分光光度法測(cè)定甘草黃酮含量.植物研究,2003,23(2):192-194</p><p>　　[16] 付玉杰,趙文灝,侯春蓮,劉曉娜,施曉光,祖元?jiǎng)?超聲提取-高效液相色譜法測(cè)定甘草中甘草</p><p>　　酸含量.植物研究[J].2005(4):2

63、20-212</p><p>　　[17] P Valachoviě,A Pechová,T J Mason.Towards the industrial production of medicinal tincture by</p><p>　　ultrasound assisted extraction[J].Ultrason.Sonochem,2001(8):111-11