浙貝母種質(zhì)資源評(píng)價(jià)與利用研究進(jìn)展【文獻(xiàn)綜述】

1、<p><b>　　畢業(yè)論文文獻(xiàn)綜述</b></p><p><b>　　生物工程</b></p><p>　　浙貝母種質(zhì)資源評(píng)價(jià)與利用研究進(jìn)展</p><p>　　摘要：浙貝母為百合科植物浙貝母的干燥地下鱗莖，因產(chǎn)于浙江而得名。浙貝母是“浙八味”中最主要的中藥之一，其味苦、性寒，是常用的一種中藥，又叫土貝母、浙

2、貝、象貝、象貝母、大貝母，是國(guó)內(nèi)外緊缺的藥物。浙貝母的栽培歷史較長(zhǎng)，在漫長(zhǎng)的過(guò)程中，形成了很多地方品種和農(nóng)家品種，這些品種與目前普遍種植的狹葉種、寬葉種和多籽種有較大的差異。因此開(kāi)展來(lái)自不同產(chǎn)地浙貝母品種的資源收集和評(píng)價(jià)研究對(duì)于發(fā)展浙貝母產(chǎn)業(yè)是非常重要的，也是極其必要的。本試驗(yàn)收集了我國(guó)浙貝母主產(chǎn)地-金華磐安、寧波章水及江蘇南通的主要浙貝母品種（系），進(jìn)行了集中種植和資源評(píng)價(jià)研究，研究結(jié)果可為下一步的資源應(yīng)用和育種親本的選擇提供重要資源

3、和基本數(shù)據(jù)。</p><p>　　關(guān)鍵詞：浙貝母；種植；組織培養(yǎng)；倍性育種；品種選育</p><p>　　1 浙貝母的生物學(xué)特性</p><p><b>　　1.1 生長(zhǎng)特性</b></p><p>　　浙貝母一般9~10月下種，7~10天后開(kāi)始生根，根一直生長(zhǎng)到翌年4月下旬，5月上中旬漸失去吸收水肥的能力而枯萎[1]。

4、</p><p>　　“立春”前后，新芽陸續(xù)出土，莖葉開(kāi)始生長(zhǎng)。初始葉包著莖稈后漸展開(kāi)增大。3月中下旬，莖葉生長(zhǎng)旺盛，到4月上中旬結(jié)束。二稈也在2月下旬至3月上旬出土，出土后10~15天是其生長(zhǎng)最迅速的時(shí)期買(mǎi)月上中旬結(jié)束生長(zhǎng)。整個(gè)生長(zhǎng)持續(xù)時(shí)間約30天左右[1]。</p><p>　　浙貝母新鱗莖有兩個(gè)生長(zhǎng)增大階段。第一階段在貝芽出土前11~12月上旬，可看到基部鱗片有些肥厚，此時(shí)，主要由貝

5、母鱗莖供應(yīng)養(yǎng)分，實(shí)際是內(nèi)部養(yǎng)分轉(zhuǎn)移而已。第二階段在2月下旬至5月中下旬，這是新鱗莖生長(zhǎng)膨大的主要階段，幾乎鱗莖的95%是此時(shí)形成的。尤其是3月底至4月底生長(zhǎng)膨大最為迅速。直至地上開(kāi)始枯萎，鱗莖仍在膨大生長(zhǎng)。藥農(nóng)有“早出10天不如遲1天”之說(shuō)。鱗莖中的心芽，地上部分枯萎后就開(kāi)始分化，到當(dāng)年11月中旬就已形成，一個(gè)心芽下一年能產(chǎn)生一個(gè)新鱗莖[1]。</p><p>　　浙貝母的主要的化學(xué)成分是具有生物活性的生物堿包括

6、浙貝素、貝母乙素、貝母辛、貝母芬、貝母定、浙貝母甙等[2]。</p><p>　　1.2 對(duì)環(huán)境條件的要求</p><p>　　浙貝母喜濕和涼爽的氣候條件。出苗的適宜地溫為6℃～7℃，植株生長(zhǎng)最適氣溫為10℃～22℃，低于4℃或高于30℃停止生長(zhǎng)。磷莖在地下5厘米處，日平均地溫10℃～25℃時(shí)能正常膨大，高于25℃時(shí)休眠，低于－6℃時(shí)磷莖受凍。開(kāi)花適宜氣溫為22℃左右，喜充足陽(yáng)光這。浙貝母

7、對(duì)土壤的要求比較嚴(yán)格，要求生長(zhǎng)在土層深厚、疏松肥沃、濕潤(rùn)而又透水的輕粘壤、砂壤、沖積土上，pH值5~7的微酸性至中性土壤。藥農(nóng)的經(jīng)驗(yàn)是土壤要“挖起可以成團(tuán)，丟下去能散開(kāi)”[3]。</p><p><b>　　2 浙貝母的種植</b></p><p>　　貝母是中藥的常用品種，需求量一直很大，但是野生資源日趨減少，長(zhǎng)期以來(lái)一直供不應(yīng)求，人工栽培大有可為。了解川、浙貝母的

8、歷史沿革、原植物來(lái)源及資源分析概況和有關(guān)栽培條件、栽培技術(shù)以及組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)于浙貝母的栽培中有重大意義。</p><p>　　針對(duì)植物生長(zhǎng)特性，可將其種植過(guò)程分為以下4個(gè)步驟。</p><p><b>　　2.1 整地</b></p><p>　　應(yīng)選擇排灌方便、土壤深厚、富含腐殖質(zhì)、疏松肥沃的沙壤土種植，過(guò)粘或過(guò)沙的土壤均不宜栽植。選好地后，

9、每畝施腐熟廄肥或堆肥3~5噸作基肥，翻20~30厘米厚土層，耕細(xì)整平，做成高畦，畦寬1~2米，畦溝寬33厘米，深13~16厘米[4]。</p><p><b>　　2.2 繁殖方法</b></p><p>　　浙貝母的生產(chǎn)地一般可分為種子地和商品地兩種。種子地主要培育種用鱗莖[5]。種子地待地上部枯萎后在原地過(guò)夏，9~10月間將鱗莖挖起，按鱗莖直徑大小，進(jìn)行挑選后分別

10、栽植于種子地和商品地。栽培期為9月前后為宜。</p><p><b>　　2.3 田間管理</b></p><p>　　中耕除草要盡早進(jìn)行，在浙貝未出土前和植株生長(zhǎng)前期較宜。一般栽植半月后淺鋤一次，以后每隔半月鋤一次，做到田間無(wú)雜草，直至施冬肥為止。翌年2月中下旬待苗出齊后，適當(dāng)深鋤一次，以傷莖為宜。抽莖以后，見(jiàn)草就拔。 </p><p>&l

11、t;b>　　2.4 采收</b></p><p>　　5~6月采挖，洗凈泥土，大小分開(kāi)，大者摘去心芽，分作2片，呈元寶狀，稱“元寶貝”，小者稱“珠貝”。分別放置于擦籠內(nèi)，擦去外皮，加石灰拌勻，經(jīng)過(guò)一夜，使石灰滲入，曬干或烘干。</p><p>　　元寶貝為鱗莖外層的單瓣鱗片。一面凸出，一面凹入，呈元寶狀，瓣長(zhǎng)約1.7~4厘米，厚7~17毫米。表面白色，或帶淡黃色，被有白色

12、粉末，質(zhì)硬而脆，易折斷，斷面不齊，白色或淡黃色，富粉性。氣微劈，味苦。珠貝為完整的鱗莖，呈扁圓球形，高1~1.7厘米，直徑2~3.5厘米。表面白色，外層兩枚鱗葉肥厚，略似腎臟形，中央為2~3枚皺縮的小鱗葉及殘莖，內(nèi)表面墾淡黃白色。質(zhì)地、氣味同元寶貝[6]。</p><p>　　3 浙貝母的組織培養(yǎng)技術(shù)</p><p>　　浙貝母作為一種常用中藥在我國(guó)已有悠久的使用歷史，其主要功效為清熱潤(rùn)肺

13、，化痰止咳。浙貝母歷來(lái)是用鱗莖進(jìn)行無(wú)性繁殖，繁殖系數(shù)較低，如此不僅造成了浙貝母長(zhǎng)期低產(chǎn)，而且還限制了種植面積的擴(kuò)大，使浙貝母的供應(yīng)不能滿足要求。因此，提高浙貝母的繁殖系數(shù)，十分有意義[7]。</p><p>　　浙貝母以鱗莖和種子繁殖，生產(chǎn)上以鱗莖繁殖為主。用種子進(jìn)行有性繁殖，雖然提高浙貝母的繁殖率，但是種子繁殖成苗率低，不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)工又占用土地。用組織培養(yǎng)的方法用于浙貝母的無(wú)性繁殖，證明浙貝母的不同器官，在一定條

14、件下可以形成愈傷組織、鱗莖和完整植株。所以采用組織培養(yǎng)的方法，加速浙貝母的繁殖，提供了可能性[7]。</p><p>　　3.1 愈傷組織的誘導(dǎo)與培養(yǎng)</p><p>　　于早春浙貝母開(kāi)花前，將花梗及花蕾由植株上取下，在70%酒精中浸數(shù)秒鐘，然后換入飽和漂白粉溶液中消毒15分鐘，經(jīng)無(wú)菌水沖洗3次后，在無(wú)菌條件下將幼葉、花梗、花被片及子房取下，分別接種于預(yù)先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基上?；九囵B(yǎng)基可采用

15、MS培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中的蔗糖含量為4%，瓊脂為0.8%。為了不同目的，在MS培養(yǎng)基中分別加入不同種類和濃度的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)，如NAA、IAA、2,4-D、KT、6-BA以及CM。培養(yǎng)基的pH調(diào)到5.6，熱壓滅菌15分鐘。接種后材料在10到18℃下進(jìn)行光照培養(yǎng)[7]。一般接種兩周后，就陸續(xù)會(huì)有愈傷組織出現(xiàn)。</p><p>　　3.2 小鱗莖的形成再生</p><p>　　為了誘導(dǎo)愈傷組織形成鱗

16、莖和植株，可將愈傷組織轉(zhuǎn)移至含有IAA和6-BA的分化培養(yǎng)基上。當(dāng)IAA的濃度為為2mg/L，6-BA濃度為2mg/L以下時(shí)，愈傷組織形成小鱗莖和根。如果IAA的濃度保持不變，6-BA的濃度提高到4~8mg/L，則可分化出白色的小鱗莖，并有根的發(fā)生。有愈傷組織分?jǐn)?shù)出的小鱗莖和栽培得到的小鱗莖在形態(tài)上并無(wú)區(qū)別[7]。</p><p>　　3.3 再生小鱗莖的藥效成分研究</p><p>　　

17、組織培養(yǎng)再生的浙貝母小鱗莖的化學(xué)成分經(jīng)分析表明，所含生物堿與大田種植的浙貝母一致。組織培養(yǎng)出的植株移入土壤后可以繼續(xù)生長(zhǎng)[8]。采用組織培養(yǎng)方法增加浙貝母的繁殖系數(shù)，縮短生長(zhǎng)周期提高了可能性，也為再生小鱗莖直接要用展示了光明的前景。</p><p>　　4 浙貝母的品種選育</p><p>　　系統(tǒng)選育良種是藥用植物栽培中的一項(xiàng)重要措施，多年來(lái)人們?cè)陂L(zhǎng)期的生產(chǎn)實(shí)踐中培育出很多優(yōu)良品種。浙貝

18、母有寬葉型、鐵桿型，杭州藥物試驗(yàn)場(chǎng)選育出的浙貝母新品種“新嶺1號(hào)”比傳統(tǒng)品種增產(chǎn)11%左右；浙江鄞縣浙貝母研究所選育出鄞貝l號(hào)、2號(hào)及系統(tǒng)三種，鄞貝1號(hào)具有抗逆性強(qiáng)，出苗快，發(fā)病率輕，產(chǎn)量高等特征，其產(chǎn)量比鄞貝2號(hào)增加11.1%，比系統(tǒng)增加20.17%；杭州藥物試驗(yàn)場(chǎng)從延胡索栽培品種中選出56個(gè)優(yōu)良株型，其中大葉品系比普通品種增產(chǎn)22.12%，比小葉品系增產(chǎn)25.28% [9]。</p><p>　　5 浙貝母的

19、倍性育種</p><p>　　多倍體育種近年來(lái)正日益受到重視，在農(nóng)作物中已取得可喜成果，有的甚至成倍增加[10-12]。浙貝母是二倍體植物,用不同濃度的秋水仙堿處理(野生浙貝×細(xì)葉種)F1種子, 結(jié)果表明：用0.20%的秋水仙堿處理濕種子和干種子的加倍成功率最高, 分別為33.62%和10.17%；變異株具有典型的多倍體特性, 植株生長(zhǎng)旺盛, 葉片明顯增厚, 葉色深綠, 葉片表皮氣孔增大, 根系肥大，

20、細(xì)胞學(xué)觀察結(jié)果表明：變異株的染色體數(shù)已加倍成[13]。</p><p><b>　　5.1 種子處理</b></p><p>　　不同濃度秋水仙堿水溶液處理種子，不論是干種子直接用秋水仙堿水溶液處理還是濕種子處理，均能誘發(fā)多倍體。但從變異率來(lái)看，干種子的處理效果明顯較差。在干種子處理中，以0.20%秋水仙堿水溶液處理的變異率最高，達(dá)10.17%。濕種子處理中也以0.2

21、0%秋水仙堿處理的變異率最高，達(dá)33.62%。不論是干種子還是濕種子處理，當(dāng)秋水仙堿濃度高于0.20%時(shí)，死亡率明顯增高，雖然能成苗的植株基本上是變異株，但總的變異率下降變異株的形態(tài)和細(xì)胞學(xué)[13]。</p><p>　　5.2 變異株的形態(tài)和細(xì)胞學(xué)特征</p><p>　　種子經(jīng)秋水仙堿處理后10~15 天, 可看到種子內(nèi)胚變粗現(xiàn)象, 當(dāng)胚突破種皮時(shí)更為明顯>。出苗后變異株葉色深綠

22、, 表面粗糙, 有時(shí)呈扭曲狀, 根系肥大。雖然經(jīng)秋水仙堿處理的種胚在前期由于受藥液的影響生長(zhǎng)速度略慢, 但隨后生長(zhǎng)速度接近或超過(guò)對(duì)照, 生長(zhǎng)明顯較對(duì)照旺盛[13]。</p><p>　　雖然浙貝母為無(wú)性繁殖, 但其繁殖率較低, 一般只有2~3倍, 并且在自然條件下一年只能生長(zhǎng)一季, 這有礙于優(yōu)良群體的迅速擴(kuò)大.所以可采用兩條途徑來(lái)解決這一問(wèn)題!一是利用組織培養(yǎng)技術(shù)來(lái)擴(kuò)大群體，研究表明貝母屬植物鱗莖切塊在MS培養(yǎng)基

23、上較易形成愈傷組織和小鱗莖, 并能成功地形成綠苗, 培養(yǎng)2個(gè)月的增殖率可達(dá)12.3倍[13]。二是增加接受秋水仙堿處理的種子數(shù)來(lái)擴(kuò)大多倍體的初始群體，雖然秋水仙堿對(duì)浙貝母種子有很大的毒性, 可造成種子胚死亡及幼苗生長(zhǎng)不良, 形成矮小的畸形株, 但用適當(dāng)濃度和處理時(shí)間可獲得較好的加倍效果[13]。因此, 以增加處瑰種子數(shù)的方法來(lái)擴(kuò)大多倍體的初始群體是可行的。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)</

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