貴州白山羊控制繁殖率性狀的主效基因研究.pdf

1、生長(zhǎng)分化因子9（growth differentiation factor9, GDF9）和骨形態(tài)發(fā)生蛋白15（bone morphogenetic protein15, BMP15）基因是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)分化因子β（transformi-ng growth factorβ, TGFβ）超家族的成員，對(duì)早期卵泡的生長(zhǎng)和分化起到重要的調(diào)節(jié)作用。對(duì)貴州白山羊 GDF9和BMP15基因成熟肽序列的分析表明，GDF9基因外顯子2編碼區(qū)1007位、790

2、位和BMP15基因外顯子2編碼區(qū)的571位、673位和796位出現(xiàn)了堿基替換，并導(dǎo)致編碼的氨基酸發(fā)生了改變，為了進(jìn)一步探索這5個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)與貴州白山羊繁殖力之間的關(guān)系，采用等位基因特異 PCR(AS-PCR)的方法對(duì)5個(gè)位點(diǎn)氨基酸密碼子所在的區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增，克隆、測(cè)序和基因型分析，獲得的主要結(jié)果如下：
　　1、GDF9基因外顯子2編碼區(qū)1007位(C→T)和790位（C→A）分別使成熟肽第18位氨基酸由丙氨酸替換為纈氨酸，成熟肽第7

3、8位氨基酸由脯氨酸轉(zhuǎn)變谷氨酰胺，在貴州白山羊高產(chǎn)和低產(chǎn)羊群中進(jìn)行多態(tài)性檢測(cè)，結(jié)果表明：1007位點(diǎn)在高產(chǎn)羊群中90％為雜合型，低產(chǎn)羊群中全部為雜合型，沒(méi)有檢測(cè)到突變型，基因型頻率在兩種羊群之間的差異不顯著（P>0.05），而C1007T氨基酸之間的替換為非極性氨基酸之間的替換，且該位點(diǎn)不處于GDF9蛋白的關(guān)鍵位置，所以堿基多態(tài)性變化對(duì)蛋白功能影響不大，因此1007位點(diǎn)的多態(tài)性與貴州白山羊的繁殖力沒(méi)有直接的相關(guān)性。第790位點(diǎn)中共檢測(cè)到

4、AA和AB兩種基因型，頻率分別為：高產(chǎn)羊群0.1和0.9；低產(chǎn)羊群0.17和0.83，A等位基因的頻率高于B等位基因的頻率，其產(chǎn)羔數(shù)為AB＞AA基因型，兩種基因型之間的差異性顯著（0.01

5、07位的多態(tài)性與790位點(diǎn)的多態(tài)性不存在相關(guān)性（R=0.1256，P>0.05）。
　　2、BMP15基因外顯子2編碼區(qū)571位（A→G）、673位（A→C）和796位（G→A）分別使編碼的成熟肽32位氨基酸由絲氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)楦拾彼幔怀墒祀?6位由天冬酰胺/組氨酸；成熟肽107位由甘氨酸/精氨酸。多態(tài)性檢測(cè)結(jié)果表明：673位點(diǎn)在所檢測(cè)的貴州白山羊中只檢測(cè)到野生的AA基因型，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)多態(tài)性，該位點(diǎn)位于BMP15結(jié)構(gòu)的手掌內(nèi)側(cè)，其變化不足

6、以影響結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，因此與貴州白山羊的繁殖力無(wú)關(guān)。571位點(diǎn)在高產(chǎn)羊群中檢測(cè)到AA、AB和BB基因型，低產(chǎn)羊群中只檢測(cè)到AA和AB基因型，796位點(diǎn)在高產(chǎn)羊群和低產(chǎn)羊中都檢測(cè)到AA、AB和BB三種基因型，對(duì)其進(jìn)行的各種基因型與產(chǎn)羔數(shù)的差異性分析發(fā)現(xiàn)，571位點(diǎn)和796位點(diǎn)的產(chǎn)羔數(shù)依次為AA