增強(qiáng)UV-B輻射與He-Ne激光輻照小麥細(xì)胞凋亡影響的研究.pdf

1、近年來，植物細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)途徑和信號(hào)調(diào)控機(jī)理已經(jīng)成為人們研究的熱點(diǎn)問題。本研究以小麥(臨優(yōu)2018)為材料，采用10.08 kJ·m-2·d-1 UV-B輻射與5mW·mm-2 He-Ne激光輻照及二者組合對(duì)其幼苗進(jìn)行處理，篩選出了適合流式細(xì)胞儀分析的小麥幼苗根細(xì)胞核提取的方法，并對(duì)各處理組小麥幼苗根在不同處理天數(shù)下細(xì)胞凋亡的變化，以及相關(guān)信號(hào)通路和抗氧化系統(tǒng)的變化情況進(jìn)行研究。結(jié)果顯示：
　　 (1)在直接剪切法所用的三種細(xì)胞

2、核提取緩沖液中，MgSO4緩沖液的提取效果最好，細(xì)胞核形態(tài)及內(nèi)部結(jié)構(gòu)完整，且得到的細(xì)胞核量多；OttoⅠ對(duì)細(xì)胞核的提取效果顯著，但是在加入OttoⅡ后細(xì)胞核破裂明顯；Tris·MgCl2緩沖液提取的細(xì)胞核數(shù)量較少；酶解法制備的細(xì)胞核懸浮液中雜質(zhì)較多，且需時(shí)較長(zhǎng)。結(jié)果表明采用MgSO4提取緩沖液的直接剪切法適合于流式細(xì)胞儀對(duì)小麥幼苗DNA含量的分析。
　　 (2)增強(qiáng)UV-B輻射能誘導(dǎo)小麥幼苗根尖細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞核向中心聚集，并形成凋

3、亡小體等細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。用流式細(xì)胞儀對(duì)不同處理組細(xì)胞凋亡情況進(jìn)行定量分析，結(jié)果同樣證明了增強(qiáng)UV-B處理能增加凋亡的細(xì)胞數(shù)目，并且在處理第5d時(shí)變化最為明顯。而經(jīng)UV-B輻射和He-Ne激光復(fù)合處理后，細(xì)胞凋亡數(shù)目比單獨(dú)UV-B處理組明顯減少，差異極顯著。因此認(rèn)為He-Ne激光在一定程度上緩解了增強(qiáng)UV-B輻射對(duì)小麥幼苗根細(xì)胞的凋亡。
　　 (3)增強(qiáng)UV-B輻射使小麥幼苗根O2-和H2O2等活性氧積累，而且線粒體膜通透性會(huì)隨著增

4、強(qiáng)UV-B輻射處理天數(shù)增加而增大，同時(shí)造成線粒體細(xì)胞色素c的釋放，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的產(chǎn)生。He-Ne激光則能夠在一定程度上減少活性氧的形成并且使細(xì)胞色素c釋放量減少，有一定的修復(fù)作用。
　　 (4)增強(qiáng)UV-B輻射會(huì)造成小麥幼苗根抗氧化酶(POD、CAT、SOD)活性和非酶類抗氧化物(GSH、AsA)含量下降，還會(huì)造成POD、CAT和SOD同工酶的表達(dá)抑制，酶帶有不同程度的減弱或消失，而He-Ne激光則對(duì)此損傷有部分的修復(fù)作用，提高