桃線粒體DNA多態(tài)性及其與抗寒性的關(guān)系.pdf

1、通過建立桃葉線粒體DNA提取方法、利用PCR擴(kuò)增和生物信息學(xué)分析等手段，對(duì)具有不同抗寒能力的桃品種間線粒體DNA多態(tài)性是否與抗寒性相關(guān)進(jìn)行了探討。尋找細(xì)胞質(zhì)（線粒體）中與樹體抗寒力緊密連鎖的分子標(biāo)記，對(duì)桃樹抗寒的輔助選擇育種及進(jìn)一步提高對(duì)抗寒性進(jìn)行早期鑒定及提高親本選配的準(zhǔn)確性具有重要意義。主要試驗(yàn)過程與結(jié)論如下:
　　1.通過差速離心、蔗糖襯墊及線粒體超活染色的方法對(duì)桃葉片線粒體進(jìn)行了分離，成功的從線粒體中得到了完整、可滿足后續(xù)

2、試驗(yàn)要求的線粒體DNA。該提取體系的建立填補(bǔ)了桃葉線粒體DNA提取技術(shù)的空白，為從核外遺傳角度進(jìn)行分子生物學(xué)研究工作奠定了基礎(chǔ)。
　　2.以經(jīng)過2009年冬天自然篩選的有明確抗寒分級(jí)的21個(gè)品種（琿春桃、貴州毛桃、GF677、曲枝山桃、瑞光27號(hào)、早霞露、奉化玉露、中華壽桃、陽泉肉桃、吉林8701、吉林8801、Mafim、壽紅、紅港、Vallegrande、Desert Red、五月火、中寧3號(hào)毛桃、深州白蜜、黃金蟠桃、青絲）的

3、桃葉片為試材，用PCR擴(kuò)增與直接測(cè)序法對(duì)線粒體DNA上的atp9、atp4（orf25）、coxⅠ、coxⅢ、18s-5srRNA、ssu、nad4 exon1/2部分基因序列進(jìn)行擴(kuò)增與測(cè)序分析，尋找特異基因片段的多態(tài)性與品種抗寒性的關(guān)系。結(jié)果表明:在首次得到的桃線粒體DNA atp9、atp4(orf25)、coxⅠ、coxⅢ、18s-5srrna、nad4 exon1/2部分基因序列與氨基酸序列基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)除ATP9基因片段外，其余