辣根過氧化物酶在石英砂上的固定化以及在有機污染控制上的應(yīng)用.pdf

1、酶固定化技術(shù)是指通過物理或化學(xué)方法將酶固定于合適的載體上，便于其與反應(yīng)物分離，并重復(fù)使用的一種技術(shù)。本文采用石英砂為載體，研究通過共價鍵結(jié)合法在其表面固定辣根過氧化物酶（HRP），對固定化酶的理化性質(zhì)、穩(wěn)定性等進行表征，并將所得固定化酶應(yīng)用于雙酚A的去除和染料脫色。本論文主要進行了以下方面的研究。
　　 探索了用殼聚糖對石英砂載體進行預(yù)處理的方法。石英砂先用2％的殼聚糖浸泡，然后用2％的戊二醛溶液交聯(lián)，可在表面覆蓋一層穩(wěn)定殼聚糖

2、膜，上面帶有胺基，為共價鍵交聯(lián)酶蛋白創(chuàng)造條件。
　　 殼聚糖預(yù)處理載體負載HRP的最佳條件為:HRP濃度0.1 mg/mL，交聯(lián)劑戊二醛濃度0.1％,溫度4℃，pH4.5反應(yīng)時間3小時。該條件得固定化酶的活性回收率達到6.23％，平均每克載體載酶量為1.18U。
　　 對固定化酶的最適pH、熱穩(wěn)定性、貯存穩(wěn)定性、循環(huán)使用性等方面進行了研究。結(jié)果表明固定化酶的最適pH較游離酶有所降低，從5.0降為4.5，固定化酶在酸性條件

3、下的活性要明顯高于游離酶;固定化酶比游離酶表現(xiàn)出更寬的溫度適應(yīng)范圍，固定化酶在60℃能保持50％以上的酶活性，而游離酶在60℃酶活性僅為原來30％;固定化酶貯存10天后相對酶活力仍保持在90％，而游離酶僅保持83％;固定化酶循環(huán)使用5次后，酶活性降為原來20％左右。
　　 對固定化酶進行了BPA污水處理的研究。結(jié)果表明相同酶活性單位的固定化酶降解效果比游離酶要好，在3h內(nèi)，固定化酶對BPA的降解率為55％，游離酶為25％。對固定