硒通過線粒體途徑對鎘誘導(dǎo)的雞脾臟淋巴細(xì)胞凋亡影響的研究.pdf

1、鎘是一種存在于土壤、水和食物中的重要環(huán)境污染物。由于其在環(huán)境中的污染問題越來越嚴(yán)重，甚至可能威脅環(huán)境生態(tài)系統(tǒng)，而且它對禽類造成的危害也越來越顯著，因此鎘對自然界以及人們的生產(chǎn)生活所造成的影響應(yīng)該引起人們的高度重視。硒，一種重要的營養(yǎng)微量元素，在甲狀腺素代謝方面、氧化還原反應(yīng)、生殖、以及免疫功能等方面都具有一定作用。它能夠拮抗某些金屬元素的毒性，其中也包括重金屬鎘，硒能夠降低因外界刺激所導(dǎo)致的ROS的過量產(chǎn)生，對自由基的損傷也具有一定的保

2、護(hù)作用，最終起到維持細(xì)胞的正常功能的作用。本課題主要集中在調(diào)查硒頡頏鎘對體外鳥類免疫細(xì)胞的毒性影響，在雞脾臟淋巴細(xì)胞中分別加入終濃度為10-6mol/L的氯化鎘溶液進(jìn)行染鎘處理，終濃度為10-7mol/L的亞硒酸鈉溶液以及同時(shí)加入10-6mol/L的氯化鎘和10-7mol/L的亞硒酸鈉的混合溶液進(jìn)行體外培養(yǎng)試驗(yàn)。通過對雞脾臟淋巴細(xì)胞凋亡形態(tài)變化、抗氧化功能、線粒體膜電位及細(xì)胞內(nèi)Bak、p53、Caspase-3、Caspase-9、Cy

3、tc、bcl-2和bcl-xl的mRNA表達(dá)水平的檢測，最終明確了從線粒體途徑硒頡頏鎘致雞脾臟淋巴細(xì)胞凋亡影響的機(jī)制。研究結(jié)果表明:
　　1.通過熒光定量PCR技術(shù)檢測雞脾臟淋巴細(xì)胞凋亡相關(guān)基因，結(jié)果揭示了鎘能夠干擾禽類免疫細(xì)胞內(nèi)Bak、p53、Caspase-3、Caspase-9、Cyt c、bcl-2等凋亡相關(guān)基因的mRNA表達(dá)，進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。鎘引起雞脾臟淋巴細(xì)胞中凋亡相關(guān)基因mRNA表達(dá)量在硒的作用下發(fā)生改變，硒減輕了

4、鎘誘導(dǎo)的脾臟細(xì)胞的凋亡。
　　2.通過對雞脾臟淋巴細(xì)胞內(nèi)NO、MDA含量及GSH-Px、iNOS、SOD與CAT活性的檢測，在鎘的作用下引發(fā)雞脾臟淋巴細(xì)胞發(fā)生氧化脅迫，加硒后可減輕鎘暴露后免疫細(xì)胞的氧化應(yīng)激作用，表明鎘對禽類免疫細(xì)胞抗氧化方面的損傷能夠被硒所頡頏，發(fā)揮了硒元素在抗氧化方面的保護(hù)作用，減少鎘對雞脾臟淋巴細(xì)胞的毒性作用。
　　3.通過采用流式細(xì)胞術(shù)與熒光染色的方法分別檢測了雞脾臟淋巴細(xì)胞經(jīng)鎘處理后凋亡發(fā)生的情況，

5、從生化改變和形態(tài)學(xué)角度均體現(xiàn)了鎘誘導(dǎo)雞脾臟淋巴細(xì)胞的凋亡。加硒后表明在很多方面，硒能減少鎘對雞脾臟淋巴細(xì)胞的毒性損傷作用。
　　總結(jié)，與鎘單獨(dú)處理組相比較而言，硒顯著提高抗氧化酶的活性，降低MDA、ROS水平，此外，硒補(bǔ)充恢復(fù)了線粒體膜電位和鈣離子水平，因?yàn)樵谖淖饔孟戮€粒體功能的恢復(fù)并且硒能夠改變凋亡相關(guān)基因（Bak、p53、Caspase-3、Caspase-9和Cyt c）的表達(dá)?？傮w說來，硒處理降低了鎘誘導(dǎo)的形態(tài)學(xué)改變、氧