水稻突變體庫的構(gòu)建和旁鄰序列分析.pdf

1、四川農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文水稻突變體庫的構(gòu)建和旁鄰序列分析姓名：丁建申請學位級別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導教師：李平;孫宗修20030501A b s t r a c tR i c e i so n e o f t h em o s t i m p o r t a n t f o o d c r o p sw o r l d w i d e ．B y u s i n gt m n s g e n i ca p p r o a c h e

2、 s ，i ti sp o s s i b l et oi n c r e a s er e s i s t a n c ea g a i n s tp e s t sa n dp a t h o g e n s ，a n dt oi m p r o v et h et o l e r a n c eo fr i c e p l a n t s t o d r o u g h t a n d s a l i n i t y ． N e

3、w g e n e s ，i n c l u d i n g r e g u l a t o r y g e n e s i n t h es i g n a l —t r a n s d u c t i o n p a t h w a y s ，n e e d t o b e d i s c o v e r e d t o w a r d s t h e s e o b j e c t i v e s ．W i t h t h ec

4、o m p l e t e ds e q u e n c i n go fr i c eg e n o m e ，ag r e a td e a lo fs e q u e n c ed a t ah a sb e e na c c u m u l a t e di ng e n eb a n k ，a n dt h e f u n c t i o n s o fl o t s o fg e n e s n e e dt o b ed

5、e t e r m i n e d ．T h er e s e a r c h o ft h ef u n c t i o n a l g e n o m i c s i s m o r ea n d m o r eu r g e n t ．T r a n s l a t i n g A ，T , C ，G i n t o i n d i v i d u a l g e n e s ，i s o l a t i n gg e n ew

6、i t ho u r s e l v e sk n o w l e d g ep r o p e r t yf i g h tb e c o m e t h ef o c u so fc o m p e t i t i o ni na l lt h ew o r l d ．W i t ht h ed e v e l o p i n go fs e q u e n c i n gt e c h n o l o g ya n di n c

7、r e a s i n go fi s o l a t i n ge f f i c i e n c yo f t h ef l a n k i n gs e q u e n c e ，c o n s t r u c t i o no fr i c ei n s e r t i o n - m u t a n tl i b r a r yi s a ne f f i c i e n tm e t h o d t os t u d y g

8、 e n e f u n c t i o n 。T h i s r e s e a r c h ，w e h a v e s e l e c t e d O r y z a s a t i v a L s u b s u p J a p o n i c an 卻o n b a r e ，t h ev a r i e t y b e s e q u e n c e db yI n t e r n a t i o n a l R i c e

9、 G e n o m eP r o j e c t ，a s a c c e p t o rm a t e r i a l ．T h et r a n s p o s o nA C ／D So f m a i z e h a d b e e nt r a n s f e r r e di n t or i c eg e n o m e r e s p e c t i v e l yb yA g r o b a c t e r i u m

10、t u m e f a c i e n sm e d i a t e dt r a n s f o r m a t i o n ，a n dc o n s t r u c t e dt h et r a n s p o s o ni n s e r t i o nm u t a n t l i b r a r yo f f i c eb yu s i n g t r a n s p o s a b l et w o e l e m e

11、n t ss y s t e m ．T h e m a i n r e s u l t so f m o l e c u l a ra n a l y s i s o ft h et r a n s f o r m a n t s ，c l o n i n g a n da n a l y s i s o ft h es e q u e n c ef l a n k i n g t h e t r a n s p o s o ni n

12、s e r t i o na n dt h eg e n e t i ca n a l y s i sa n db i o i n f o r m a t i c sr e s e a r c ho f t h em u t a n t sa r es u m m a r i z e d a sb e l o w ：1 ．T h e t r a n s p o s o n A C ／D S o f m a i z e h a d b e

13、 e n t r a n s f e r r e d i n t o g e n o m e o f n i p p o n b a r er e s p e c t i v e l yb y A g r o b a c t e r i u mt u m e f a c i e n s m e d i a t e dt r a n s f o r m a t i o n ．1 8 0 0D S t r a n s f o r m a n

14、 t sa n d5 0 t r a n s f o r m a n t sw e r e g e n e r a t e d ．2 ．T h e m o l e c u l a r a n a l y s i ss h o w e d t h a tt h ep o s i t i v e r a t eo fD S t r a n s f o r m a n t s i s9 5 ％，T h e r e s u l to fP C

15、R a n db a s t aa n a l y s i sa r ei d e n t i c a l ，b u tp o s i t i v er a t eo ft r a n s f o r m a n t sw i t hA C i s o n l y4 0 ％．3 ．S e v e n k i n d o f m u t a n t t y p e s ，1 ) ．c o l o r o f l e a v e a n d

16、 p h o t o s y n t h e s i s ：e t i o l a t i o n i ns e e d l i n g ；p e ag r e e n ，b o t t l e g r e e n ；s t r i p e l e a v e ；t h ec o n t e n to f c h l o r o p h y l l ．2 1 ．h e i g h to f p l a n t ：s p e c i a