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1、雞敗血支原體(Mycoplasma gallisepticum,MG)是一種廣泛存在而危害嚴重的雞呼吸道傳染病,感染后可影響雞的產(chǎn)肉和產(chǎn)蛋率下降,并能并發(fā)和繼發(fā)其他疫病。它給養(yǎng)雞業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失。非典型新城疫(Newcastle disease,ND)和MG混合感染的情況占了很大比重。同時,NDV和MG的活苗在使用時常出現(xiàn)干擾。我國雞群呼吸道中普遍存在MG感染,而造成如:NDV弱毒疫苗的免疫效率低下以及加重了經(jīng)呼吸道途徑免疫的各種
2、疫苗的副作用。 基于我國臨床實際遇到的問題,我國目前迫切需要使用聯(lián)苗進行雞群呼吸道綜合征的綜合防治。本研究著重研制能夠?qū)崿F(xiàn)同時控制ND和MG感染的新型二聯(lián)油乳劑滅活疫苗。這將對ND和MG的有效控制具有重要的實踐意義。 本研究引進的La Sota株,經(jīng)復壯后能在雞胚良好繁殖,在雞胚中連傳5代,雞胚液中HA滴度均達1:512以上,EIDso達109.5以上,說明毒株穩(wěn)定。從對該毒株系統(tǒng)鑒定的結(jié)果看,其腦內(nèi)接種致病指數(shù)(ICP
3、I)、對雞胚平均死亡時間(MDT)、對雞胚毒力、紅細胞凝集價、病毒含量、安全性、免疫原性、特異性等都符合ND低毒力活疫苗株的要求。通過透射電鏡觀察滅活前后的NDV病毒粒子,滅活前后病毒粒子基本形態(tài)無明顯差異。 本研究引進的MG中等強毒株S6經(jīng)無細胞培養(yǎng)基傳代后,CFU達5×109以上。經(jīng)固體培養(yǎng)、凝集試驗、血凝試驗、免疫熒光試驗、Westem-blot和透射電鏡檢測、致病性試驗、免疫原性鑒定,結(jié)果表明:S6毒株符合中等強毒株特征
4、,適合用于MG疫苗株。上述各代次種子液經(jīng)純凈性檢驗,均無其他微生物污染,可用于疫苗種毒使用。 用經(jīng)鑒定的La Sota毒種接種SPF雞胚,收獲尿囊液,0.1%甲醛滅活后制得La Sota毒株抗原;用S6毒株在增菌培養(yǎng)基中培養(yǎng)72h,計數(shù)后,用0.2%甲醛進行滅活。按一定的生產(chǎn)工藝方法乳化,制成ND-MG二聯(lián)油乳劑滅活疫苗。 在SPF雞群中使用該二聯(lián)苗后2個月內(nèi),試驗雞群均處于健康狀態(tài),且試驗組體重明顯比攻毒組高,抗體滴度
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