馬尾松幼苗莖段和春梢莖段組織培養(yǎng).pdf

1、馬尾松(Pinus massoniana Lamb.)是我國南方亞熱帶地區(qū)重要的鄉(xiāng)土速生針葉樹種,是重要的工業(yè)原料林和采脂林樹種,具有很高的綜合利用價(jià)值。馬尾松良種種子園種子產(chǎn)量較低、其扦插繁殖具有顯著的年齡效應(yīng),馬尾松良種種苗供不應(yīng)求己成為馬尾松產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸,因此,采用組織培養(yǎng)技術(shù)研究馬尾松快繁技術(shù)具有重要的理論和實(shí)踐意義。
　　 本實(shí)驗(yàn)分別以湖南省桂陽縣馬尾松種子園提供的種子萌發(fā)出的幼苗莖段和湖南省天際嶺林場10年生以下馬

2、尾松春梢莖段為起始外植體,通過實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),探討馬尾松愈傷組織的誘導(dǎo)、增殖和不定芽再生的條件,結(jié)果表明:
　　 (1)幼苗莖段愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為改良GD+4 mg/L2,4-D+2mg/L6-BA+500 mg/L CH+450 mg/L Gln+30 g/L蔗糖,萌發(fā)出的愈傷組織直徑最大為8.5 mm；春梢莖段愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為DCR+0.5 mg/L NAA+2mg/L2,4-D+1.5 mg/L6-BA+0.2

3、 g/L Vc+500 mg/L CH+450 mg/L Gln+30 g/L蔗糖,愈傷組織晶瑩剔透,呈淡黃色或白色,略微帶點(diǎn)粘性。
　　 (2)在愈傷組織培養(yǎng)時(shí),外植體應(yīng)進(jìn)行暗培養(yǎng),光照培養(yǎng)下愈傷組織的褐化嚴(yán)重。在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上添加濃度為3 g/L肌醇,可以解決愈傷組織在繼代培養(yǎng)過程中遇到的褐化問題,保持愈傷組織原有形態(tài)結(jié)構(gòu)不變5代以上。繼代培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞生長素和細(xì)胞分裂素的比值保持在1-3時(shí)對愈傷組織的增殖有利,且在這一激素濃度

4、范圍內(nèi)各處理間并無明顯差別,在幼苗莖段愈傷組織的繼代過程中,2,4-D的濃度在4 mg/L,6-BA濃度為2 mg/L時(shí),效果最好；在春梢莖段愈傷組織的繼代過程中,添加0.5 mg/L NAA、2 mg/L2,4-D、1.5 mg/L6-BA,效果最好。
　　 (3)以馬尾松春梢莖段培育出的愈傷組織為外植體,培養(yǎng)基方案為DCR+1mg/L KT+0.5 mg/L TDZ+500 mg/L CH+3 g/L肌醇+30 g/L蔗糖,

5、在經(jīng)過繼代3次以后,在愈傷組織上成功誘導(dǎo)分化出了2個(gè)馬尾松不定芽,本試驗(yàn)表明以馬尾松春梢莖段為外植體,可以通過愈傷組織間接器官發(fā)生再生出不定芽。
　　 (4)以帶子葉頂芽的幼苗莖段為外植體,培養(yǎng)基為GD+0.5 mg/L IBA+0.05mg/L6-BA+30 g/L蔗糖,4次繼代培養(yǎng)后生根誘導(dǎo)率為21.4％；在不同濃度的NAA繼代試驗(yàn)中,培養(yǎng)基方案為改良GD+0.5 mg/L NAA+20 g/L蔗糖時(shí),4次繼代培養(yǎng)后根的誘導(dǎo)