山東省獸醫(yī)微生物菌毒種平臺的初步建立.pdf

1、本研究根據(jù)2006～2007年山東省畜禽疾病爆發(fā)報道和山東省畜禽養(yǎng)殖分布，在山東省范圍內(nèi)進行大腸桿菌、豬鏈球菌、金黃色葡萄球菌、雞傷寒沙門氏菌和新城疫病毒的病料采集，采集地點分布在濟南、濰坊、煙臺、臨沂、青島等9個地區(qū)17個規(guī)模牧場及獸醫(yī)院。
　　 研究對細菌庫采用“病料收集—分離培養(yǎng)—生物學特性試驗—細菌純化真空凍干”的技術路線，分別以動物臨床癥狀、鏡檢觀察、分離培養(yǎng)特性、細菌生化鑒定來判定和描述細菌特性;對病毒庫采用“病料收

2、集—病毒分離培養(yǎng)—生物學特性試驗——分子生物學鑒定—病毒純化真空凍干”的技術路線，分別以HA-HI試驗、動物臨床癥狀、MDT和ICPI測定初步判定和描述NDV的特性，以RT-PCR分子生物學試驗進行最終鑒定，來獲得菌種資源信息。
　　 本研究共分離鑒定了大腸桿菌80株，平臺資源號為1511C0006SL000061～140;金黃色葡萄球菌30株，平臺資源號為1511C0006SL000141～170;豬鏈球菌50株，平臺資源號為

3、1511C0006SL000171～190和1511C0006SL000271～300;雞傷寒沙門氏菌103株，平臺資源號為1511C0006SL000318～420;特殊菌株17株，平臺資源號為1511C0006SL000301～317。對分離到細菌資源進行生化試驗，均符合各自的生化特性。
　　 本研究共分離到60株NDV，6.6％的新城疫分離株為新城瘦弱毒型，35％為中等毒力型，58.3％為強毒型，都可以特異性擴增出F基因片

4、段。山東省NDV病毒庫的強毒株與國內(nèi)外NDV序列的HN基因同源性在80％～97％之間，中毒株的同源性在82％～98％之間，弱毒株的同源性在82％～98％之間;山東省NDV病毒庫21株毒株之間核苷酸同源性在92％～99.9％之間，氨基酸同源性在95％～100％之間。同源關系進化樹表明強毒株與標準株LaSota距離較近，強、中弱毒株在進化樹上明顯分為不同類別。菌種資源收集合理并具有代表性，資源平臺能夠充分刻畫山東省NDV特性。