我國(guó)梨樹(shù)腐爛病病原菌的初步鑒定及兩種培養(yǎng)表型菌株的致病性分析.pdf

1、梨樹(shù)腐爛病是梨樹(shù)上最重要的枝干病害之一，它的發(fā)生和危害遍及全國(guó)各梨產(chǎn)區(qū)，其中以西北、東北和華北地區(qū)發(fā)生較重。該病主要危害梨樹(shù)的主枝和側(cè)枝，導(dǎo)致樹(shù)皮腐爛和枝干枯死，嚴(yán)重時(shí)可造成死樹(shù)甚至毀園。但長(zhǎng)期以來(lái)我國(guó)對(duì)蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的研究較多而對(duì)梨樹(shù)腐爛病的研究甚少，其病原菌種類(lèi)及致病性尚缺乏系統(tǒng)性研究。本研究對(duì)本實(shí)驗(yàn)室保存的從我國(guó)不同省份采集的梨樹(shù)腐爛病菌進(jìn)行種類(lèi)鑒定，并選取不同培養(yǎng)表型及rDNA-ITS序列差異菌株進(jìn)行致病性分析，為進(jìn)一步研究梨樹(shù)腐

2、爛病發(fā)生規(guī)律及有效防治措施提供參考依據(jù)。取得的研究結(jié)果如下:
　　 1.從本實(shí)驗(yàn)室保存的我國(guó)梨樹(shù)腐爛病菌分離株中選取不同省份的部分菌株進(jìn)行單孢純化獲得79份純化菌株;觀察其在PDA平板、25℃、黑暗條件下的菌落及分生孢子器形態(tài)，用菌絲塊通過(guò)傷口接種測(cè)定其對(duì)‘翠冠’梨離體枝條的致病性，克隆部分菌株的rDNA-ITS序列并進(jìn)行分析。結(jié)果表明:梨樹(shù)腐爛病菌菌株有Ⅰ型和Ⅱ型兩種菌落類(lèi)型，在PDA平板上可產(chǎn)生多種類(lèi)型的分生孢子器，對(duì)離體梨

3、樹(shù)枝條的致病性存在差異，rDNA-ITS的核苷酸序列相似率為99.98％～100％。所以我國(guó)梨樹(shù)腐爛病病原菌雖然存在不同的菌落類(lèi)型，但其rDNA-ITS的核苷酸序列分析顯示均為V.mali var.pyri，與蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌分別聚在同一亞組的兩個(gè)分支。
　　 2.選取菌落和rDNA-ITS序列差異明顯的3個(gè)梨樹(shù)腐爛病菌菌株(F-SD-8、F-BJ-2c-2和F-HN-2a-1)和1個(gè)蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌菌株(F-SX-A6)，對(duì)其生物

4、學(xué)特性進(jìn)行比較，用菌絲塊通過(guò)傷口接種對(duì)其在梨樹(shù)、蘋(píng)果樹(shù)等木本植物離體枝條和梨樹(shù)活體枝條上的致病性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，4個(gè)菌株的培養(yǎng)溫度無(wú)明顯差異，10～35℃均可生長(zhǎng)，35℃及以上和4℃及以下生長(zhǎng)較差;在Czapek培養(yǎng)基及脲素除外的碳、氮源上均可生長(zhǎng)，其中甘露醇、麥芽糖、淀粉和酵母膏較佳;光照對(duì)4個(gè)菌株的影響有異，光照促進(jìn)F-SD-8和F-BJ-2c-2生長(zhǎng)，而對(duì)F-HN-2a-1和F-SX-A6無(wú)影響;F-SD-8、F-BJ-2c-

5、2和F-HN-2a-1菌株生長(zhǎng)的最適pH值為4～6，而F-SX-A6為4。致病性測(cè)定結(jié)果顯示， F-SD-8和F-BJ-2c-2菌株雖然培養(yǎng)表型不同，但是它們?cè)诶鏄?shù)枝條上的致病力均較強(qiáng)，而蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌菌株F-SX-A6則對(duì)蘋(píng)果樹(shù)枝條的致病力較強(qiáng)，F(xiàn)-HN-2a-1菌株雖然培養(yǎng)表型與F-SD-8相似，但它在10個(gè)不同梨品種以及7種不同木本植物枝條上的致病力均很弱且癥狀有異。田間接種后的癥狀觀察，F(xiàn)-SD-8和F-BJ-2c-2均可以觀察

6、到分生孢子器和分生孢子，而F-HN-2a-1和F-SX-A6則沒(méi)有。所以梨樹(shù)腐爛病菌存在致病性分化，且V.mali的兩個(gè)變種侵染時(shí)具有寄主偏愛(ài)性，此外它們除可侵染梨和蘋(píng)果外，還可侵染桃、杏和海棠樹(shù)枝條。
　　 3.以供試菌株在梨離體枝條上接種4d時(shí)產(chǎn)生的病斑以及在梨樹(shù)皮液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)10 d時(shí)的培養(yǎng)液為材料，對(duì)產(chǎn)生的酶及其活性和pH值的變化進(jìn)行分析。結(jié)果表明，梨和蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌在梨枝條寄主體內(nèi)外均可分泌PG、PMG、Cx和xy