雞傳染性喉氣管炎病毒的分離鑒定與PCR檢測(cè)方法的建立.pdf

1、雞傳染性喉氣管炎（Infctiouslaryngotracheitis）是由雞傳染性喉氣管炎病毒（ILTV）引起的雞的一種急性接觸性呼吸道傳染病。該病毒屬于α-皰疹病毒亞科、禽皰疹病毒Ⅰ型。病雞表現(xiàn)呼吸困難，咳出血性滲出物變主要發(fā)生在喉頭和氣管部分，氣管黏膜腫脹、出血和糜爛，表面附著滲出物或黃色干酪樣假膜。該病各種年齡的雞均可發(fā)生，主要見于大雞（40——90日齡），中小雞也易感，孔雀、雉雞、火雞和鵪鶉等也有發(fā)生。雞的感染率可達(dá)90％——

2、100％。死亡率為5％——20％，若控制不及時(shí)可達(dá)70％，視毒株毒力而異。雞傳染性喉氣管炎傳播快，死亡率高，是危害養(yǎng)雞業(yè)的主要疾病之一。為了進(jìn)一步了解其在河南流行情況以及建立快速檢測(cè)方法，本文開展了下列內(nèi)容的研究并取得預(yù)期結(jié)果： 本實(shí)驗(yàn)針對(duì)漯河、許昌、平頂山等幾家雞場(chǎng)發(fā)生ILT進(jìn)行病毒的分離鑒定，結(jié)果分離出3株雞傳染性喉氣管炎病毒株。同時(shí)根據(jù)GenBank注冊(cè)發(fā)表的傳染性喉氣管炎病毒（ILTV）的TK基因序列，設(shè)計(jì)并篩選出1對(duì)引

3、物擴(kuò)增ILTVTK基因片段長(zhǎng)為400bp。以ILTV疫苗株的DNA為模板，進(jìn)行特異性和靈敏性試驗(yàn)，結(jié)果該對(duì)引物檢測(cè)ILTVDNA的最小檢測(cè)量為1.20ng，與NDV、H9亞型AIV、IBV滅活抗原、大腸桿菌以及沙門氏菌等抗原無交叉反應(yīng)。用所建立的方法對(duì)發(fā)病禽場(chǎng)分離的病毒株進(jìn)行臨床檢測(cè)，結(jié)果與病毒分離和動(dòng)物回歸試驗(yàn)結(jié)果相一致。結(jié)果表明本研究建立了快速有效的傳染性喉氣管炎PCR檢測(cè)方法，并可應(yīng)用于臨床檢測(cè)和診斷，該方法的建立為快速診斷與控制