外源酶制劑應(yīng)用于鮮煙葉及粉碎培養(yǎng)效應(yīng)的研究.pdf

1、本文研究了外源酶制劑對(duì)烤煙鮮煙葉生理特性和打碎培養(yǎng)后的影響，分為田間試驗(yàn)和室內(nèi)試驗(yàn)兩部分。田間試驗(yàn)于2007-2008年在河南許昌和洛陽(yáng)兩地進(jìn)行，研究了大田期噴施外源酶制劑對(duì)鮮煙葉生理特性的影響；室內(nèi)試驗(yàn)主要采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，研究了鮮煙葉打碎培養(yǎng)的最佳工藝條件、以及微波處理對(duì)打碎培養(yǎng)的影響。結(jié)果如下： 1、田間試驗(yàn)方面： ①?lài)娛┩庠疵钢苿┨幚淼臒熑~，色素代謝變化總體趨勢(shì)為成熟前期葉綠素、類(lèi)胡蘿卜素類(lèi)色素含量整體上升，然后

2、隨成熟時(shí)期的推進(jìn)而下降。所有噴施酶制劑處理均于噴施后7天達(dá)到最大值，噴施后21天含量最低，且其色素含量均低于對(duì)照。單噴一種酶時(shí)，無(wú)論是煙葉中葉綠素還是類(lèi)胡蘿卜含量均以噴施B處理的較低，特別是噴施高濃度B最低；噴施混合酶的各處理以A283最低。田間噴施酶制劑的煙葉比未噴施的煙葉成熟落黃提前。②噴施21d后，單因素噴施處理的淀粉酶活性高低順序?yàn)椋篈3>A2>A1>CK>B1>B2>B3；噴施的混合酶處理煙葉中的淀粉酶活性均顯著高于對(duì)照，與對(duì)

3、照相比，增幅最大的分別是A283（65．4％）、A3B1（60．0％）、A382（51．55％）。噴施的各處理煙葉中蛋白酶的活性在測(cè)定時(shí)期整體呈上升趨勢(shì)，噴施淀粉酶的三個(gè)處理與對(duì)照差異不大，無(wú)明顯規(guī)律，說(shuō)明噴施淀粉酶后對(duì)煙葉中蛋白酶的活性影響不大，而噴施蛋白酶的三個(gè)處理和混合酶制劑處理中煙葉中的蛋白酶活性均高于對(duì)照，說(shuō)明噴施蛋白酶后可以提高煙葉中蛋白酶活性，有利于煙葉中蛋白質(zhì)的降解。 ③在檢測(cè)時(shí)期內(nèi)，隨著生育期的推進(jìn)，烤煙下部煙

4、葉中淀粉含量逐漸升高，至噴施后14d達(dá)到最大值，隨后開(kāi)始降解；而總糖含量變化趨勢(shì)為：隨煙葉的成熟而一直升高，到噴施后21d達(dá)到最大值。噴施A處理可以促進(jìn)煙葉中淀粉降解，以高濃度的效果表現(xiàn)較好，例如噴施的A2處理，煙葉淀粉含量比對(duì)照降低6．82％，總糖含量增加10．5％。而噴施B處理反而抑制了煙葉中淀粉的降解；噴施的混合酶處理整體上優(yōu)于單因素處理，以A382、A3B1效果較好；田間噴施中性蛋白酶，可有效降解煙葉中的蛋白質(zhì)，以高濃度的效果表

5、現(xiàn)較好；例如噴施的B3處理，煙葉蛋白質(zhì)含量比對(duì)照降低31．5％，游離氨基酸含量增加29．2％。噴施的混合酶處理整體上與單噴B因素處理差異不大，以A382、A282效果較好。 2、室內(nèi)試驗(yàn)方面： ④結(jié)果表明：EDTA、植酸、檸檬酸及抗壞血酸的用量均能抑制煙葉褐變，影響因素主次順序?yàn)椋篊>D>B>A；A283C3D3為最佳抗氧化劑工藝條件，此外通過(guò)放大試驗(yàn)初步驗(yàn)證了抑制劑工藝條件的可行性。⑤加酶量（A）是影響評(píng)吸質(zhì)量的最主要

6、因素，A3為最佳加酶量，溫度以B3為最好，C2為最佳培養(yǎng)時(shí)間。⑥結(jié)果表明：隨著培養(yǎng)時(shí)間的推進(jìn)，煙葉中一些大分子物質(zhì)如淀粉、蛋白質(zhì)、細(xì)胞壁物質(zhì)含量呈下降趨勢(shì)，且前期（0-18×）下降速度較快，降幅較大；后期（18-36×）下降稍遲緩，且降幅也較小，總糖、還原糖、游離氨基酸含量逐漸增多。總氮、煙堿隨培養(yǎng)進(jìn)程的推移遞減，但降幅都不是很明顯。不同添加物質(zhì)處理對(duì)鮮煙葉培養(yǎng)后主要化學(xué)成分的影響明顯不同，總體上分析抗氧化劑和外源酶協(xié)同作用使T3的效果