半胱胺對山羊瘺管安裝手術(shù)后急性期細胞免疫的影響.pdf

1、為了研究半胱胺對手術(shù)后急性期外周血淋巴細胞數(shù)量、轉(zhuǎn)化的影響及相關(guān)機制，同時初步探索半胱胺對手術(shù)后炎癥反應的影響，本文進行了如下試驗：
　　 系列一口服半胱胺對山羊手術(shù)后急性期外周血細胞免疫和幾種炎癥反應指標影響的初探
　　 試驗一：半胱胺對山羊手術(shù)后急性期外周血T淋巴細胞增殖的影響
　　 8只本地山羊分為試驗組和對照組，分圈飼養(yǎng)，每只羊分別先后施行瘤胃、十二指腸瘺管安裝手術(shù)。術(shù)前每只山羊每天飼喂精料300g，自由

2、采食花生稈，瘤胃瘺管安裝手術(shù)前3天試驗組在精料中添加半胱胺鹽酸鹽微膠囊45mg/kg·BW·d（CT2000，含30％半胱胺鹽酸鹽），并持續(xù)添加直至試驗結(jié)束；瘤胃手術(shù)后恢復14天，安裝十二指腸瘺管，恢復期與手術(shù)后飼喂方案同瘤胃手術(shù)。分別于瘤胃手術(shù)前4天、術(shù)后1、2、3、4、8天，十二指腸手術(shù)前1天、術(shù)后1、3、8天頸靜脈采血，檢測外周血T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率。結(jié)果顯示，對照組瘤胃手術(shù)后1天T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率下降39.7％(p＜0.05)，此后逐

3、漸恢復，但術(shù)后8天仍低于術(shù)前水平；十二指腸手術(shù)后1天T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率也顯著下降(31.15％,p＜0.05)，于第8天恢復，表明手術(shù)應激削弱了外周血T淋巴細胞的增殖功能。在口服半胱胺山羊觀察到手術(shù)對T淋巴細胞增殖的影響較小，與未施加手術(shù)相比，兩次手術(shù)后的T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率均無顯著改變，且有逐漸上升的趨勢。組間相比，試驗組T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率在瘤胃手術(shù)后2、3、4、8天分別比對照組高61.16％、67.03％、80.07％和111.94％(p＜

4、0.05)，十二指腸手術(shù)前、術(shù)后1、8天顯著高于對照組118.03％、75.53％、60.07％(p＜0.05)，表明半胱胺提高手術(shù)后急性期外周血T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率，緩解手術(shù)造成的細胞免疫抑制。
　　 試驗二半胱胺和IGF-1對山羊體外培養(yǎng)的外周血T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率的影響
　　 采用6只成年山羊新鮮肝素抗凝血，分離得到淋巴細胞，培養(yǎng)后檢測其轉(zhuǎn)化率。試驗分為對照組（培養(yǎng)液）、半胱胺組（培養(yǎng)液中加入半胱胺，終濃度為38.58μg

5、/ml）和IGF-1組（培養(yǎng)液中加入IGF-1，終濃度為25ng/ml）。結(jié)果顯示，半胱胺組和IGF-1組T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率分別顯著高于對照組158.07％和46.42％(p＜0.05)，表明半胱胺直接刺激外周血T淋巴細胞轉(zhuǎn)化，并提示半胱胺可能通過IGF-1促進T淋巴細胞轉(zhuǎn)化。
　　 試驗三口服半胱胺對山羊手術(shù)后急性期外周血淋巴細胞數(shù)量及幾種炎癥反應指標影響的初探
　　 選用6只山羊（波爾山羊×本地白山羊），按體重相近的原

6、則分成試驗組(n=3)與對照組(n=3)，分圈飼養(yǎng)，每只羊分別先后施行瘤胃、十二指腸瘺管安裝手術(shù)。術(shù)前每只山羊每天飼喂精料300g，自由采食花生稈，瘤胃手術(shù)當天試驗組在精料中添加半胱胺鹽酸鹽微膠囊45mg/kg·BW.d（CT2000，含30％半胱胺鹽酸鹽）并持續(xù)到術(shù)后8天；第一次手術(shù)后14天安裝十二指腸瘺管，飼喂方案同瘤胃手術(shù)。于瘤胃手術(shù)前1天、術(shù)后1、4、8天，十二指腸手術(shù)前1天、術(shù)后1、2、3、4、8天頸靜脈采血，檢測外周血淋巴細

7、胞、白細胞、中性粒細胞數(shù)量和呼吸爆發(fā)功能及炎癥因子IL-1p、IL-8、TNF-α含量。結(jié)果顯示，對照組瘤胃手.術(shù)后1天淋巴細胞數(shù)量急劇減少83.53％(p＜0.05)，于第8天恢復至術(shù)前水平。試驗組細胞數(shù)量雖減少，但減少的幅度(47.87％)比對照組小，于術(shù)后4天恢復，并在術(shù)后8天時顯著高于手術(shù)前。十二指腸術(shù)后1天至8天，對照組和試驗組的淋巴細胞數(shù)量都基本維持在術(shù)前水平。組間相比，試驗組淋巴細胞數(shù)量于瘤胃手術(shù)后1天(188.23％)、

8、8天(s0％)，十二指腸手術(shù)后1天(56.51％)顯著高于對照組(p＜0.05)，表明半胱胺提高了外周血淋巴細胞數(shù)量，緩解手術(shù)對淋巴細胞數(shù)量的抑制。綜合淋巴細胞數(shù)量及T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率結(jié)果來看，半胱胺都有促進作用，提示半胱胺可能通過提高手術(shù)后急性期外周血T淋巴細胞的增殖能力來增加淋巴細胞數(shù)量的，本研究的體外試驗也證明了半胱胺通過直接刺激作用或通過IGF-1途徑，促進淋巴細胞的轉(zhuǎn)化，從而增加外周血淋巴細胞的數(shù)量。
　　 對照組十二指

9、腸手術(shù)后1天，白細胞總數(shù)及中性粒細胞數(shù)量分別增加113.9％和264.70％(p＜0.05)。同時外周血炎癥因子IL-iβ、IL-8含量也增加，分別在術(shù)后2天恢復正常。本試驗條件下半胱胺對細胞因子IL-1β、IL-8、TNF-α含量和呼吸爆發(fā)基本無影響，它的作用主要表現(xiàn)在分別增加了十二指腸手術(shù)后2天的白細胞數(shù)量及術(shù)后4、8天的中性粒細胞數(shù)量。
　　 結(jié)論：手術(shù)抑制了外周血淋巴細胞數(shù)量及T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率，半胱胺直接刺激提高T淋巴細

10、胞增殖，增加外周淋巴細胞數(shù)量，并可能通過IGF-1系統(tǒng)促進淋巴細胞轉(zhuǎn)化，緩解手術(shù)對細胞免疫的抑制。半胱胺對急性期炎癥因子的含量沒有影響，只是對白細胞和中性粒細胞數(shù)量的增加有一定作用。
　　 為了研究山羊前胃黏膜免疫細胞的分布及瘺管安裝對瘤胃形態(tài)的影響，本研究進行如下試驗：
　　 系列二免疫細胞在前胃黏膜的分布
　　 試驗一瘤胃、瓣胃黏膜內(nèi)免疫細胞的觀察
　　 8只青年山羊（波爾山羊×本地白山羊），屠宰后迅

11、速取出瘤胃、瓣胃，i0％福爾馬林固定、切片、HE染色后光鏡下觀察。結(jié)果顯示，瘤胃和瓣胃黏膜內(nèi)都存在淋巴細胞及中性粒細胞，它們大多分布在固有層，有小部分遷移至上皮內(nèi)。
　　 試驗二安裝瘤胃瘺管后瘤胃黏膜形態(tài)的觀察
　　 將安裝有瘤胃瘺管2個月的10只青年山羊屠宰后，迅速取出瘤胃瘺管周圍6-8cm組織剪切成小塊固定、切片、HE染色后光鏡下觀察。結(jié)果顯示，瘤胃瘺管周圍組織黏膜形態(tài)發(fā)生變化，表現(xiàn)為乳頭變稀變小，上皮細胞異常增生，