半胱胺對山羊瘺管安裝手術后急性期細胞免疫的影響.pdf

1、為了研究半胱胺對手術后急性期外周血淋巴細胞數(shù)量、轉化的影響及相關機制，同時初步探索半胱胺對手術后炎癥反應的影響，本文進行了如下試驗：
　　 系列一口服半胱胺對山羊手術后急性期外周血細胞免疫和幾種炎癥反應指標影響的初探
　　 試驗一：半胱胺對山羊手術后急性期外周血T淋巴細胞增殖的影響
　　 8只本地山羊分為試驗組和對照組，分圈飼養(yǎng)，每只羊分別先后施行瘤胃、十二指腸瘺管安裝手術。術前每只山羊每天飼喂精料300g，自由

2、采食花生稈，瘤胃瘺管安裝手術前3天試驗組在精料中添加半胱胺鹽酸鹽微膠囊45mg/kg·BW·d（CT2000，含30％半胱胺鹽酸鹽），并持續(xù)添加直至試驗結束；瘤胃手術后恢復14天，安裝十二指腸瘺管，恢復期與手術后飼喂方案同瘤胃手術。分別于瘤胃手術前4天、術后1、2、3、4、8天，十二指腸手術前1天、術后1、3、8天頸靜脈采血，檢測外周血T淋巴細胞轉化率。結果顯示，對照組瘤胃手術后1天T淋巴細胞轉化率下降39.7％(p＜0.05)，此后逐

3、漸恢復，但術后8天仍低于術前水平；十二指腸手術后1天T淋巴細胞轉化率也顯著下降(31.15％,p＜0.05)，于第8天恢復，表明手術應激削弱了外周血T淋巴細胞的增殖功能。在口服半胱胺山羊觀察到手術對T淋巴細胞增殖的影響較小，與未施加手術相比，兩次手術后的T淋巴細胞轉化率均無顯著改變，且有逐漸上升的趨勢。組間相比，試驗組T淋巴細胞轉化率在瘤胃手術后2、3、4、8天分別比對照組高61.16％、67.03％、80.07％和111.94％(p＜

4、0.05)，十二指腸手術前、術后1、8天顯著高于對照組118.03％、75.53％、60.07％(p＜0.05)，表明半胱胺提高手術后急性期外周血T淋巴細胞轉化率，緩解手術造成的細胞免疫抑制。
　　 試驗二半胱胺和IGF-1對山羊體外培養(yǎng)的外周血T淋巴細胞轉化率的影響
　　 采用6只成年山羊新鮮肝素抗凝血，分離得到淋巴細胞，培養(yǎng)后檢測其轉化率。試驗分為對照組（培養(yǎng)液）、半胱胺組（培養(yǎng)液中加入半胱胺，終濃度為38.58μg

5、/ml）和IGF-1組（培養(yǎng)液中加入IGF-1，終濃度為25ng/ml）。結果顯示，半胱胺組和IGF-1組T淋巴細胞轉化率分別顯著高于對照組158.07％和46.42％(p＜0.05)，表明半胱胺直接刺激外周血T淋巴細胞轉化，并提示半胱胺可能通過IGF-1促進T淋巴細胞轉化。
　　 試驗三口服半胱胺對山羊手術后急性期外周血淋巴細胞數(shù)量及幾種炎癥反應指標影響的初探
　　 選用6只山羊（波爾山羊×本地白山羊），按體重相近的原

6、則分成試驗組(n=3)與對照組(n=3)，分圈飼養(yǎng)，每只羊分別先后施行瘤胃、十二指腸瘺管安裝手術。術前每只山羊每天飼喂精料300g，自由采食花生稈，瘤胃手術當天試驗組在精料中添加半胱胺鹽酸鹽微膠囊45mg/kg·BW.d（CT2000，含30％半胱胺鹽酸鹽）并持續(xù)到術后8天；第一次手術后14天安裝十二指腸瘺管，飼喂方案同瘤胃手術。于瘤胃手術前1天、術后1、4、8天，十二指腸手術前1天、術后1、2、3、4、8天頸靜脈采血，檢測外周血淋巴細

7、胞、白細胞、中性粒細胞數(shù)量和呼吸爆發(fā)功能及炎癥因子IL-1p、IL-8、TNF-α含量。結果顯示，對照組瘤胃手.術后1天淋巴細胞數(shù)量急劇減少83.53％(p＜0.05)，于第8天恢復至術前水平。試驗組細胞數(shù)量雖減少，但減少的幅度(47.87％)比對照組小，于術后4天恢復，并在術后8天時顯著高于手術前。十二指腸術后1天至8天，對照組和試驗組的淋巴細胞數(shù)量都基本維持在術前水平。組間相比，試驗組淋巴細胞數(shù)量于瘤胃手術后1天(188.23％)、

8、8天(s0％)，十二指腸手術后1天(56.51％)顯著高于對照組(p＜0.05)，表明半胱胺提高了外周血淋巴細胞數(shù)量，緩解手術對淋巴細胞數(shù)量的抑制。綜合淋巴細胞數(shù)量及T淋巴細胞轉化率結果來看，半胱胺都有促進作用，提示半胱胺可能通過提高手術后急性期外周血T淋巴細胞的增殖能力來增加淋巴細胞數(shù)量的，本研究的體外試驗也證明了半胱胺通過直接刺激作用或通過IGF-1途徑，促進淋巴細胞的轉化，從而增加外周血淋巴細胞的數(shù)量。
　　 對照組十二指

9、腸手術后1天，白細胞總數(shù)及中性粒細胞數(shù)量分別增加113.9％和264.70％(p＜0.05)。同時外周血炎癥因子IL-iβ、IL-8含量也增加，分別在術后2天恢復正常。本試驗條件下半胱胺對細胞因子IL-1β、IL-8、TNF-α含量和呼吸爆發(fā)基本無影響，它的作用主要表現(xiàn)在分別增加了十二指腸手術后2天的白細胞數(shù)量及術后4、8天的中性粒細胞數(shù)量。
　　 結論：手術抑制了外周血淋巴細胞數(shù)量及T淋巴細胞轉化率，半胱胺直接刺激提高T淋巴細

10、胞增殖，增加外周淋巴細胞數(shù)量，并可能通過IGF-1系統(tǒng)促進淋巴細胞轉化，緩解手術對細胞免疫的抑制。半胱胺對急性期炎癥因子的含量沒有影響，只是對白細胞和中性粒細胞數(shù)量的增加有一定作用。
　　 為了研究山羊前胃黏膜免疫細胞的分布及瘺管安裝對瘤胃形態(tài)的影響，本研究進行如下試驗：
　　 系列二免疫細胞在前胃黏膜的分布
　　 試驗一瘤胃、瓣胃黏膜內(nèi)免疫細胞的觀察
　　 8只青年山羊（波爾山羊×本地白山羊），屠宰后迅

11、速取出瘤胃、瓣胃，i0％福爾馬林固定、切片、HE染色后光鏡下觀察。結果顯示，瘤胃和瓣胃黏膜內(nèi)都存在淋巴細胞及中性粒細胞，它們大多分布在固有層，有小部分遷移至上皮內(nèi)。
　　 試驗二安裝瘤胃瘺管后瘤胃黏膜形態(tài)的觀察
　　 將安裝有瘤胃瘺管2個月的10只青年山羊屠宰后，迅速取出瘤胃瘺管周圍6-8cm組織剪切成小塊固定、切片、HE染色后光鏡下觀察。結果顯示，瘤胃瘺管周圍組織黏膜形態(tài)發(fā)生變化，表現(xiàn)為乳頭變稀變小，上皮細胞異常增生，