鵝細(xì)小病毒98E鴨胚致弱株的培育及生物學(xué)特性研究.pdf

1、東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文鵝細(xì)小病毒98E鴨胚致弱株的培育及生物學(xué)特性研究姓名：王春媛申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：獸醫(yī)學(xué)；預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：王君偉2012-06-20A b s t r a c tR e s e a r c h A n d B i o l o g i c a lC h a r a c t e r i z a t i o nO fA D u c k E m b r y o A t t e n u a t e d S t r a

2、 i nO f G o o s eP a r v o v i r u s9 8 EA b s t r a c tG o o s ep a r v o v l r u si n f e c t i o na l s ok n o w n a sG o s l i n g p l a g u e o rD e r z s y ’Sd i s e a s e ，m a i n l yi n f e c t s4 - d a y —o l dt

3、 o2 0 ·d a y —o l dd o m e s t i c g o s l i n g sa n dM u s c o v y d u c k i n g s ．T h es h o r tc o u r s eo f t h ed i s e a s e ，r a p i dt r a n s m i s s i o n ，a n d ah i g h m o r t a l i t y r a t e ，c a

4、u s i n gs e r i o u s e c o n o m i c l o s s e s ，i t ’S o n eo ft h ei m p o r t a n ti n f e c t i o u s d i s e a s e s o fg o o s ec u l t u r a l i n d u s t r y ．G g o s l i n gp l a g u eW a s p r e v e n t e dm

5、 a i n l yt h r o u g hi m m u n i z i n gg o o s ew i t ht h eG P Vg o o s ee m b r y o ／d u c ke m b r y oa t t e n u a t e d v a c c i n ea n di n a c t i v a t e dv a c c i n ea n dt h e nt h eg o s l i n g a c q u i

6、 r ea n t i b o d ya g a i n s tt h e G o s l i n g p l a g u e ．T h i s s t u d y u s e d t h e c u l t i v a t e g o o s ep a r v o v i r u s d u c ke m b r y oa t t e n u a t e d s t r a i n G P V - 9 8 D 1 5w i t hc

7、o n t i n u o u s l yp a s s a g i n gi n9 d a y —o l dS P F d u c ke m b r y o ，i d e n t i f i e dt h e v i r a ln u c l e i ca c i do f t h ed i f f e r e n tg e n e r a t i o n sb yP C R a n d d e t e r m i n ep a r

8、t so f b i o l o g i c a lc h a r a c t e r i s t i c sd u r i n g t h eg e n e r a t i o np r o c e s s ．T h er e s u l t s o ft h e b i o l o g i c a l c h a r a c t e r i s t i c s o fg o s l i n gp l a g u ed u c ke

9、m b r y oa t t e n u a t e d s t r a i n sG P V - 9 8 D 1 5 s h o w e d t h a td u c ke m b r y o c o u l d n o td i ef r o m F I t oF 1 0 ，s t a r tg r a d u a l l yd i e df r o mF 1 1t oF 13 ．B e g i n n i n gw i t hF

10、14 ，l e t h a l i t yr a t eo fd u c ke m b r y ok e e ps t a b l ea t 10 0 ％．T h el e t h a lt i m eo fd u c ke m b r y or e p r e s e n ts h o r t r e g u l a r l y ．T h e d e a d b o d i e so fd u c ke m b r y ow e r

11、ec o n g e s t e d ，a n dt h el o c u so fh e m o r r h a g em a i n l yc o n c e n t r a t e d i nt h eh e a d ，n e c k ，c h e s ta n d l e g s ，w h i c ha r ec o n s i s t e n tw ．i t h t h ef e a t u r eo fG P V p a t

12、 h o l o g i c a l c h a n g e s ．I tW a ss u c c e s s f u l l y c l o n e dt h eG P V - 9 8 D 1 5 s t r a i nN S l g e n ea n dV P l g e n eb yP C R ；T h eV P l g e n eo fG P V - 9 8 D 1 5s t r a i na n dG P V - 9 8 E

13、s t r a i n h a dp a r t i a ln u c l e o t i d e s e q u e n c em u t a t i o n ．T h eG P V - 9 8 D 1 5s t r a i na t t e n u a t e ds t a b i l i t ya n ds a f e t yb yd u c ke m b r y ol e t h a ld o s e ，t h e p a t

14、h o g e n i c i t yt e s to f g o o s e e m b r y oa n ds a f e t yt e s t ．G P V - 9 8 D 1 5v i r u sc o u l di n f e c td u c ke m b r y o f i b r o b l a s t s ．I tc a n b eu s e dd u c k e m b r y of i b r o b l a s

15、t si n f e c t e da n d h a l f t h ea m o u n to f i n d i r e c ti m m u n o f l u o r e s c e n c e ( I F A ) t od e t e r m i n a t i o n ．W ec o m p a r e dt h ei m m u n o g e n i c i s o no fa R e n u a t e ds t r

16、 a i n sw i t ht h ec o m m e r c i a l v a c c i n e sS Y G ( 4 1 - 5 0 ) ．I m m u n i n g 2 0d a y - o l d g o s l i n g sw i t hG P V - 9 8 D j 5s t r a i no rS Y G ( 4 1 - 5 0 ) ，a n t i b o d yl e v e lr i s e sc e

17、a s e l e s s l y ，r e a c h e da p e a ka t f i f t hw e e k s ．a(chǎn) n dt h e nd e c l i n es l o w l yb yE L I S A ，a g a rd i f f u s i o nt e s t a n dn e u t r a l i z a t i o nt e s t ．A n t i b o d yl e v e lo fG P V

18、 - 9 8 D 1 5 i m m u n eg r o u pi s s l i g h t l yl o w c o m p a r e dw i t hc o m m e r c i a lv a c c i n eS Y G ( 4 1 ～5 0 ) ，b u tt h e r e i s n os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e f P > D ．0 5 ) ．D e t

19、e c t i o no fi m m u n eG P V ．9 8 D 15 s t r a i nt o m a k es m a l l g o o s ep r o d u c e s G P Vs p e c i f c n e u t r a l i z i n g a n t i b o d y b yN e u t r a l i z a t i o n t e s t ．T h e g o s l i n g sa

20、c q u i r e d p r o t e c t i v e i m m u n i t y ．T h e r e f o r e ，t h e r e s e a r c h p r o v i d e d a s a f e ，e f f e c t i v e ，n o s e a s o nl i m i t a t i o n o f c a n d i d a t e s t r a i n s ，I t a l w

21、a y s t h e m a t e r i a l f o u n d a t i o n F o r g o s l i n g p l a g u e v i r u sa f i e n u a t i o nm e c h a n i s m r e s e a r c h ．．K e y w o r d s ：g o s l i n gp l a g u e ；a t t e n u a t e ds t r a i n