不同授粉的度尾文旦柚裂果相關差異蛋白的研究.pdf

1、度尾文旦柚是福建省仙游縣特有的名貴果品，果實品質優(yōu)良，但裂果問題嚴重。其具有自交不親和性和很強的單性結實能力，經(jīng)琯溪蜜柚異花授粉處理后，種子數(shù)明顯增多，但能夠有效地減少其裂果率。因此，探究琯溪蜜柚異花授粉能克服裂果的分子機理，對于提高度尾文旦柚的果實品質和經(jīng)濟效益，具有重要的理論和實踐意義。 本研究以度尾文旦柚為試驗材料，運用蛋白質組學方法對琯溪蜜柚授粉不裂果和自交裂果的子房和果皮蛋白質進行比較研究。主要研究結果概括如下：

2、 1.樣品制備是影響檢測蛋白質種類多少和雙向電泳圖譜質量的一個重要因素，本文比較了三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA)和裂解液直接提取兩種方法對文旦柚果皮蛋白質的提取效果，結果表明：TCA法不能有效地提取果皮蛋白質，裂解液直接提取法得到的圖譜背景干凈，蛋白質點清晰，說明裂解液直接提取法適用于文旦柚果皮蛋白質的提取。 2.通過比較分析琯溪蜜柚授粉不裂果和自花授粉裂果果皮的蛋白質圖譜，共找出13個差異蛋白。其中有4個蛋白質呈上調表達，9

3、個蛋白質呈下調表達。差異蛋白經(jīng)膠內酶解和MALDI-TOF-TOF/MS分析，獲得的PMF通過數(shù)據(jù)庫檢索，鑒定了10個蛋白質。 在鑒定出的10個差異蛋白質中，其中兩個為未知蛋白質。其他蛋白質分別為胞液谷氨酰胺合成酶，在氮同化過程中起著十分重要的作用；2，3-二磷酸甘油酸的磷酸甘油變位酶，與能量代謝有關；S-腺苷同型半胱氨酸水解酶，與細胞內的甲基化反應有關；蘋果酸酶，是蘋果酸代謝中的關鍵酶；果糖二磷酸醛縮酶，屬于光合作用相關蛋白質

4、；超氧化物歧化酶和過氧化氫酶，與抗氧化作用有關。 3.通過分析比較琯溪蜜柚授粉和自花授粉發(fā)育早期子房的蛋白質圖譜，共找出28個差異蛋白。其中有7個蛋白質呈上調表達，21個蛋白質呈下調表達。差異蛋白質經(jīng)膠內酶解和MALDI-TOF-TOF/MS分析，獲得的PMF通過數(shù)據(jù)庫檢索，鑒定成功20個蛋白。 在鑒定成功的20個差異蛋白質中，其中五個為未知蛋白質。根據(jù)蛋白質的功能，找出可能與裂果有關的蛋白質：鈣調素和鈣網(wǎng)質蛋白前體與細