重慶地區(qū)煙草黑脛病菌交配型及生理小種的研究.pdf

1、煙草黑脛病(tobacco black shank)在我國(guó)分布范圍很廣，除黑龍江省尚未發(fā)現(xiàn)之外，其余各植煙省區(qū)，包括臺(tái)灣在內(nèi)均有發(fā)生。煙草黑脛病菌(Phytophthoranicotianae)可以危害烤煙、晾煙、曬煙、白肋煙、香料煙等所有的栽培煙草，破壞力極強(qiáng)。 1．菌株來源 本研究從重慶主產(chǎn)煙區(qū)采集典型煙草黑脛病樣品，分離、純化得到12株煙草黑脛病菌菌株，加上由西南大學(xué)植物生態(tài)病理研究所提供的50株煙草黑脛病菌菌株，

2、共62株。菌株來源覆蓋重慶市酉陽、黔江、彭水、武隆、涪陵、萬州、巫溪、巫山8大主產(chǎn)煙區(qū)。 2．菌株鑒定 分離到的煙草黑脛病菌菌株主要培養(yǎng)性狀為：菌落無色，菌絲無隔，孢子囊多近球形，乳突明顯，具脫落性，且孢子囊柄短，不對(duì)稱孢子囊不常見；對(duì)煙草具有致病性。并通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)對(duì)各地代表菌株的核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(rDNA ITS)的特異性擴(kuò)增，得到了長(zhǎng)度為892bp的特異性片段，經(jīng)BLAST比對(duì)后，與煙草黑脛病

3、菌的親緣關(guān)系達(dá)到99％，明確供試菌株為煙草疫霉。 3．交配型測(cè)定 采用培養(yǎng)皿配對(duì)培養(yǎng)的方法對(duì)重慶市煙草黑脛病菌的交配型的研究結(jié)果表明：來自重慶市主產(chǎn)煙區(qū)的62株煙草黑脛病菌菌株，36株屬A2交配型，占58.1％，其余26株屬于A0交配型，占41.9％，未檢測(cè)到其它交配型。研究結(jié)果未檢測(cè)到A1交配型的存在，因此可以初步認(rèn)定，重慶市不是煙草黑脛病菌的起源中心，A1交配型在重慶市沒有分布或群體比例很小。研究結(jié)果進(jìn)一步表明重慶市

4、煙草黑脛病菌(Phytophthora nicotianae var．nicotianae)的交配型符合煙草疫霉菌(Phytophthora nicotianae=Phytophthora parasitica)菌株的交配型在我國(guó)的分布規(guī)律。 4．生理小種的鑒定 供試的62個(gè)煙草黑脛病菌菌株和0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)菌株在TTZ液體和固體培養(yǎng)基中皆變?yōu)榧t色，尤其在固體培養(yǎng)基中，顏色更為明顯，從而排除了3號(hào)小種的可能。通過游動(dòng)孢子懸浮液灌