荷斯坦牛精液品質(zhì)相關(guān)基因分子標(biāo)記研究.pdf

1、根據(jù)精子發(fā)生的生殖內(nèi)分泌調(diào)節(jié)機(jī)制，本研究選擇參與精子發(fā)生的生殖激素基因及其受體以及與生殖有關(guān)的基因，促卵泡素受體基因（Follicle Stimulating Hormone Receptor，F(xiàn)SHR）、抑制素α亞基基因（Inhibin-α Subunit，INHA）、抑制素βA亞基基因（Inhibin-βA Subunit，INHβA）、促性腺激素釋放激素受體基因（Gonadotropin-releasing Hormone Rec

2、eptor，GnRHR）、雄激素受體基因（Androgen Receptor，AR）、芳香化酶CYP19基因（Aromatase CYP19，CYP19）和熱休克蛋白70基因（Heat Shock Protein70，HSP70）作為候選基因，采用PCR-RFLP和PCR-SSCP方法，分析它們?cè)诤伤固狗N公牛共122個(gè)樣本中的多態(tài)性，探討基因型與荷斯坦種公牛精液平均采精量、精子密度、精子活力、頂體完整率和畸形率等性狀的關(guān)系，結(jié)果如下：<

3、br>　　 1．促卵泡素受體基因（FSHR）采用PCR-RFLP方法在群體中發(fā)現(xiàn)了TaqⅠ-RFLP多態(tài)性，檢測(cè)到AA、AB和BB三種基因型，其中BB基因型頻率最高，AB基因型次之，AA基因型最低。各基因型頻率在兩個(gè)來源的群體中差異不顯著（P>0.05）。B等位基因頻率在抽樣群體中占優(yōu)勢(shì)地位。性狀關(guān)聯(lián)分析結(jié)果表明，AB型個(gè)體的原精活力（P<0.05）和頂體完整率（P<0.01）顯著高于AA型個(gè)體，BB型介于二者之間。推測(cè)FSHR基因A

4、B雜合型為優(yōu)勢(shì)基因型，B等位基因可能與原精活力和頂體完整率性狀呈正相關(guān)。
　　 2．抑制素α亞基基因（INHA）采用PCR-RFLP方法在群體中發(fā)現(xiàn)了MspⅠ-RFLP多態(tài)性，檢測(cè)到AA、AB和BB三種基因型，其中AA基因型頻率最高，AB基因型次之，BB基因型最低。各基因型頻率在兩個(gè)來源的群體中差異不顯著（P>0.05）。A等位基因頻率在抽樣群體中占優(yōu)勢(shì)地位。性狀關(guān)聯(lián)分析結(jié)果表明，AA型個(gè)體的平均采精量、原精活力和畸形率高于AB

5、型，更高于BB型；AA型個(gè)體精子密度最高；AB型個(gè)體頂體完整率最高；但均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），表明INHA基因的A-G突變位點(diǎn)可能與荷斯坦種公牛的精液品質(zhì)無關(guān)。
　　 3．抑制素βA亞基基因（INHβA）采用PCR-RFLP方法在群體中均發(fā)現(xiàn)StyⅠ-RFLP多態(tài)性，檢測(cè)到AA、AB和BB三種基因型，其中AB基因型頻率最高，AA基因型次之，BB基因型最低。各基因型頻率在兩個(gè)來源的群體中差異極顯著（P<0.01）。A等位基

6、因頻率在抽樣群體中占優(yōu)勢(shì)地位。性狀關(guān)聯(lián)分析結(jié)果表明，對(duì)AB型個(gè)體原精活力最高，BB型個(gè)體和AA型個(gè)體相當(dāng)；就頂體完整率和畸形率而言，AA基因型個(gè)體優(yōu)于BB基因型個(gè)體，基因型效應(yīng)表現(xiàn)為AA>AB>BB；對(duì)于平均采精量和精子密度BB型個(gè)體均高于AB型個(gè)體；但精液品質(zhì)性狀各基因型個(gè)體間差異不顯著（P>0.05）。表明INHβA基因的C-T突變位點(diǎn)可能與荷斯坦種公牛的精液品質(zhì)無關(guān)。
　　 4．用PCR-SSCP方法在群體中熱休克蛋白70