牡丹離體培養(yǎng)與再生體系的建立.pdf

1、本研究以牡丹成熟胚、花藥、鱗芽、未成熟胚為外植體，建立了牡丹成熟胚經(jīng)愈傷組織途徑分化不定芽的完整再生體系；通過(guò)對(duì)牡丹花藥進(jìn)行預(yù)處理，成功誘導(dǎo)出了花藥愈傷組織；經(jīng)過(guò)改進(jìn)消毒方法，解決了牡丹鱗芽污染嚴(yán)重的問(wèn)題：研究了環(huán)境因子、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在牡丹鱗芽生根過(guò)程中的作用，建立了鱗芽生根體系；探討了培養(yǎng)因子在牡丹‘洛陽(yáng)紅’未成熟胚成苗過(guò)程中的作用，篩選出適宜于牡丹組培苗移栽馴化的基質(zhì)類型和配比。主要研究結(jié)果如下： 1．牡丹‘鳳丹白’成熟胚

2、不定芽誘導(dǎo)和生根的研究結(jié)果表明：在打破種子休眠方面，以500mg·L-1 GA3浸泡48h效果最好：1/2MS+Ca2+為‘鳳丹白’胚培養(yǎng)的最適基本培養(yǎng)基；植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑組合為2,4—D4.0 mg·L-1+6—BA0.1 mg·L-1時(shí)，愈傷組織的誘導(dǎo)效果最好；6—BA誘導(dǎo)愈傷組織分化不定芽的最佳濃度為1.0 mg·L-1；誘導(dǎo)不定芽生根的最佳培養(yǎng)基為：1/2MS+IBA1.5 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1。 2．

3、牡丹‘烏龍捧盛’花藥培養(yǎng)的研究結(jié)果表明：未做任何預(yù)處理的花藥，其愈傷組織平均誘導(dǎo)率明顯高于經(jīng)過(guò)低溫或高溫預(yù)處理的花藥(P＜0.05)；最佳的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS+2,4—D2.0mg·L-1+6—BA1.0 mg·L-1，愈傷組織的平均誘導(dǎo)率最高，達(dá)到36.87％。 3．牡丹‘烏龍捧盛’鱗芽組織培養(yǎng)的研究結(jié)果表明：采用0.2％(w/v)HgCl2進(jìn)行牡丹鱗芽消毒處理的適宜時(shí)間為6～8min；鱗芽初代培養(yǎng)過(guò)程中，先暗培養(yǎng)7d，而后轉(zhuǎn)

4、入正常光照培養(yǎng)，可明顯減輕鱗芽褐化；誘導(dǎo)根原基形成的最適培養(yǎng)基為：1/2MS+NAA2.0 mg·L-1+IAA2.0 mg·L-1+6—BA0.1mg·L-1或1/2MS+NAA1.0 mg·L-1+IBA1.0 mg·L-1+AC0.2 g·L-1。 4．牡丹‘洛陽(yáng)紅’未成熟胚培養(yǎng)和植株再生的研究結(jié)果表明：誘導(dǎo)牡丹‘洛陽(yáng)紅’未成熟胚成苗的最佳培養(yǎng)基為：1/2MS+6—BA0.1 mg·L-1+IBA0.8mg·L-1+LH1