番茄抗TYLCV相關(guān)分子標(biāo)記篩選及其分子標(biāo)記輔助選擇抗性聚合研究.pdf

1、番茄黃化曲葉病(Tomatoyellow leaf curl disease)已經(jīng)成為世界番茄生產(chǎn)上的主要病害之一，近幾年，在我國(guó)迅速傳播，嚴(yán)重威脅到我國(guó)的番茄生產(chǎn)。該病由雙生病毒科菜豆金色花葉病毒屬番茄黃化曲葉病毒(Tomatoyellow leaf curl virus，TYLCV)引起，主要通過煙粉虱(Bemisia tabaci)。培育抗病品種是阻止該病蔓延的最根本有效的途徑，據(jù)報(bào)道，番茄栽培種種質(zhì)資源中缺乏抗TYLCV的基因，

2、僅有一些表現(xiàn)為耐病的種質(zhì)。高抗TYLCV的基因都存在于近緣野生種質(zhì)中，目前已報(bào)道的抗番茄黃化曲葉病的近緣野生種主要有醋栗番茄(S.pimpinellifolium)、秘魯番茄(S.peruvianum)、多毛番茄(S.habrochaites)、智利番茄(S.chilense)和契斯曼尼番茄(S.cheesmanii)。因此，TYLCV的抗性育種很大程度上基于從野生種向栽培種中轉(zhuǎn)入抗性基因。
　　 本研究以抗病親本CLN2777

3、A和感病親本TMXA48-4-0及其F2分離群體為材料，應(yīng)用AFLP和SSR兩種標(biāo)記技術(shù)以及BSA法進(jìn)行與抗TYLCV基因連鎖標(biāo)記的篩選.同時(shí)利用國(guó)外開發(fā)的分別與抗TYLCV基因Ty-1，Ty-2，Ty-3連鎖的標(biāo)記進(jìn)行分子標(biāo)記輔助選擇聚合研究，研究結(jié)果如下：⑴通過對(duì)親本及F2分離群體進(jìn)行TYLCV接種，發(fā)現(xiàn)F2代抗感病分離比率接近3:1，表明抗性受單個(gè)顯性基因控制。用512對(duì)MseⅠ/PstⅠ引物組合對(duì)親本及F2代抗感基因池進(jìn)行AFL

4、P分析，最終引物組合P15/M28與P16/M10在親本及抗感組間表現(xiàn)多態(tài)性，回收并克隆測(cè)序，兩片段大小分別為106bp，180bp，分別命名為P15M28-106，P16M10-180。重新設(shè)計(jì)引物，將P15M28-106成功轉(zhuǎn)化為CAPS標(biāo)記，命名為P15M28。應(yīng)用一個(gè)F2群體對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證，遺傳連鎖分析結(jié)果表明標(biāo)記P15M28與抗性基因Ty-2之間的遺傳距離為8.8cM，可以應(yīng)用于標(biāo)記輔助選擇育種。除此之外，根據(jù)Kenta Shi

5、rasawa(2010)構(gòu)建的番茄遺傳圖譜，選取11號(hào)染色體末端，TG36到TG393區(qū)間上的7個(gè)SSR標(biāo)記，應(yīng)用同樣的親本和F2群體進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)一個(gè)與抗TYLCV連鎖的EST-SSR標(biāo)記TES0344，與抗性基因遺傳距離為7.8 cM。⑵應(yīng)用分別含有Ty-1，Ty-2，Ty-3三個(gè)抗TYLCV基因的育種材料TY52，CLN2777A，99S-C-39-20-1-1-24-17-0-0，以及三個(gè)園藝性狀優(yōu)良的感病材料Tmm9060-0