云南地區(qū)部分豬場豬呼吸道疾病綜合征主要病毒性病原流行病學(xué)調(diào)查及防控技術(shù)的研究.pdf

1、豬呼吸道疾病綜合征(PRDC)是一種復(fù)雜的疾病綜合征，不同生產(chǎn)模式的豬場以及不同生長和生產(chǎn)階段的豬群都有發(fā)生，發(fā)病率和死亡率很高，目前仍沒有理想的防控措施。本研究在調(diào)查分析云南地區(qū)部分豬場不同季節(jié)PRDC主要病毒性病原感染的基礎(chǔ)上，進一步從分子水平分析可能是PRDC的主要致死病毒病PRRSV的變異進化，提出種豬場CSF和PR的凈化方法，為探索云南地區(qū)PRDC的有效綜合防控提供依據(jù)。
　　 ⑴云南地區(qū)部分豬場PRDC的主要病毒性病

2、原流行病學(xué)調(diào)查。在云南地區(qū)不同豬場共采集患有PRDC病豬血清和全血樣品1164份，用ELISA和RT-PCR方法檢測了春、夏、秋和冬四個季節(jié)豬群PRRSV、PCV-2、CSFV和PRV的感染情況。結(jié)果表明：①CSFV抗原檢測，春季和冬季陽性率最高，分別為16.29％和10.51％，夏季和秋季較低。PCV-2抗體檢測，春季陽性率最高，為62.22％，其次分別為秋季、夏季和冬季。PRVgE蛋白抗體檢測，夏季和春季陽性率最高，分別為64.59

3、％和57.98％，冬季和秋季較低。PRRSV抗原檢測，冬季和秋季陽性率最高，分別為75.37％和64.86％，夏季和春季較低。PCV-2、CSFV和PRV種母豬和種公豬陽性率較高，仔豬和育肥豬陽性率較低；PRRSV仔豬和育肥豬陽性率較高，母豬和公豬陽性率較低。②各季節(jié)不同生長階段豬群存在一種及兩種以上病毒的混合感染。從全年看單獨感染率39.10％，PCV-2最高，其次是PRV、PRRSV和CSFV；二重感染率26.13％，PCV-2+P

4、RV最高，其次是PCV-2+PRRSV和PRV+PRRSV；三重感染率8.05％，PCV-2+PRRSV+PRV最高；四重僅為1.57％。從季節(jié)來看，春季和夏季混合感染最高，分別為76.53％和60.74％，冬季和秋季的混合感染率分別為59.50％和53.55％。從年齡和性別看，育肥豬的混合感染率高于仔豬，分別為68.66％和61.11％，種公豬的感染率高于母豬，分別為70.00％和55.51％。③對受檢豬場跟蹤調(diào)查顯示，PRDC發(fā)病率

5、在24％～74.85％，死亡率在6.74％～32.1％，仔豬占死亡總數(shù)的13.58％，育肥豬占65.43％，種母豬占1.23％，種公豬沒出現(xiàn)死亡，多數(shù)母豬臨床上出現(xiàn)繁殖障礙。對死亡豬只病料進行PCR檢測表明，四種病毒有單獨感染和混合感染出現(xiàn)。單獨感染占41.98％，PRRSV最高，PRV和CSFV次之，PCV-2最低；雙重感染27.16％，CSFV+PRRSV和PRV+PRRSV較高；三重感染11.11％，PCV-2+PRV+PRRSV

6、最高；死亡病例中沒有四重感染出現(xiàn)。死亡病例PCV-2占20.99％，CSFV占24.69％，PRV占38.27％，PRRSV占46.91％。
　　 ⑵PRRSV分子流行病學(xué)研究。將獲得的51條PRRSV的ORF5和Nsp2基因序列，與國內(nèi)外已發(fā)表的具有代表性的基因序列進行同源性比較，分析其進化規(guī)律。結(jié)果表明：①獲得了51條PRRSV的ORF5基因。同源性分析表明，2007年10個ORF5基因序列之間同源性大于86.9％，氨基酸同

7、源性大于86.6％；2008年25個ORF5基因序列之間同源性大于85.9％，氧基酸同源性大于85.6％；2009年16個ORF5基因序列之間同源性大于86.4％，氨基酸同源性大于87.1％。不同時期分離株的ORF5基因組序列存在差異，氨基酸主要集中ORF5基因的高變區(qū)。系統(tǒng)發(fā)生樹分析表明，PRRSV與美洲型代表毒株VR-2332的ORF5基因序列同源性大于86.9％，氨基酸序列同源性大于87.0％；與中國標準毒株CH-1a的ORF5基

8、因序列同源性大于91.2％，氨基酸序列同源性大于90.5％；與2006年P(guān)RRSV變異毒株JX0612的ORF5基因序列同源性大于88.1％，氧基酸序列同源性大于86.1％。②獲得了51條PRRSV的Nsp2基因序列，長度為231個堿基，編碼77個氨基酸，與VR-2332毒株的470～576位氨基酸相對應(yīng)，涵蓋了目前備受關(guān)注的Nsp2基因482位和534～562位氨基酸缺失部分。有6個序列有29個氨基酸的連續(xù)缺失，與VR-2332 Ns

9、p2的534～562位氨基酸相對應(yīng)；其余Nsp2基因除29個氨基酸的連續(xù)缺失外，還存在482位的氨基酸缺失，與VR-2332 Nsp2的482位氨基酸相對應(yīng)。此外，還有6個序列多處存在氨基酸替換。51條Nsp2基因序列同源性為80.1%～100％，氨基酸同源性68.8%～100％；與美洲型標準毒株Nsp2基因的同源性為64.1%～74.6％，氨基酸同源性48.1%～54.5％；與CH-1aNsp2基因的同源性為79.7%～90.7％，氨

10、基酸同源性66.7%～80.5％；與JX0612 Nsp2基因的同源性為89.1%～98.0％，氨基酸同源性76.6%～100％；
　　 ⑶規(guī)?；N豬場CSFV和PRV凈化方法研究及示范：①云南地區(qū)部分豬場種豬CSFV和PRV常呈隱性感染或帶毒。因地制宜制定種豬場CSF和PR凈化方法，最終凈化了模式豬場的CSF和PR。凈化防控技術(shù)措施合理，凈現(xiàn)值增加為正數(shù)，效益成本比均大于1，檢疫淘汰凈化方法效益成本比和凈現(xiàn)值高于檢測免疫防控凈