榿木根瘤內(nèi)生菌研究及結(jié)瘤對(duì)宿主生長(zhǎng)量的影響.pdf

1、放線菌根瘤植物是自然界中一類重要的固氮資源,作為先鋒樹(shù)種和伴生樹(shù)種在造林中有重要的應(yīng)用價(jià)值。本研究以取自中國(guó)湖南長(zhǎng)沙和淚羅的榿木(Alnuscremastogyne Burkill)根瘤為材料,分離得到榿木內(nèi)生根瘤菌,研究了其生物學(xué)特性,并通過(guò)回接結(jié)瘤研究了內(nèi)生根瘤菌對(duì)榿木生長(zhǎng)的影響。主要結(jié)論如下:
　　 (1)根瘤內(nèi)生菌的分離培養(yǎng)以及生理類型和生物學(xué)特性測(cè)定:采用根瘤切片法和根瘤均漿法分離得到2株榿木根瘤內(nèi)生放線菌(AC081

2、2T017,AC0812S009),具有相似的菌落形態(tài),在固體培養(yǎng)基上菌落質(zhì)地堅(jiān)硬、緊密、乳白色、呈放射狀和凸起狀。在液體培養(yǎng)基上為白色絮狀菌落或分散在底部生長(zhǎng)。菌株均具有典型的弗蘭克氏菌菌絲體形態(tài),初步斷定應(yīng)屬于弗蘭克氏菌的成員。生理類型檢測(cè)和生物學(xué)特性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,AC0812T017和.AC0812S009的生理類型均為生理B型。最優(yōu)培養(yǎng)條件為:以吐溫-80為碳源,pH值為7.0,溫度30℃。
　　 (2)菌株的固氮酶活性

3、和生長(zhǎng)周期:培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)溫度均會(huì)對(duì)菌株的固氮活性產(chǎn)生影響。實(shí)驗(yàn)測(cè)得 AC0812T017培養(yǎng)36h,培養(yǎng)溫度為25℃時(shí),固氮活性最高。而AC0812S009培養(yǎng)24h,培養(yǎng)溫度為30℃時(shí)固氮活性最高。從菌株生長(zhǎng)曲線可以看出,在28℃不加氮源的培養(yǎng)條件下,前3d菌株AC0812S009和AC0812T017沒(méi)有生長(zhǎng)的跡象,從第4d起開(kāi)始緩慢生長(zhǎng),7-8d后均進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,并持續(xù)到20-21d,為穩(wěn)定期,22d后進(jìn)入衰亡期。
　　

4、 (3)內(nèi)生菌的回接驗(yàn)證與影響接種效果的因子:回接試驗(yàn)的結(jié)果證實(shí)了AC0812S009和 AC0812T017菌株的確屬于榿木根瘤內(nèi)生菌,而且菌株相應(yīng)宿主有很強(qiáng)的侵染能力。接種方法,以切根接種法接種效果最好,不僅根瘤數(shù)量多而且苗木生長(zhǎng)狀況好；接種量以30-60mg/株為宜；四川榿木選苗高為20cm左右的幼苗作為接種對(duì)象為宜。
　　 (4)結(jié)瘤對(duì)苗木生長(zhǎng)的影響:回接試驗(yàn)結(jié)果顯示,經(jīng)接種處理的苗木顯出較強(qiáng)的生長(zhǎng)態(tài)勢(shì),各項(xiàng)生長(zhǎng)指標(biāo)均