水稻基因組DNA簡易制備方法研究以及分子標(biāo)記輔助選擇改良稻米品質(zhì).pdf

1、進(jìn)入21世紀(jì)以來，隨著我國經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展和人民生活水平的不斷提高，人們對水稻的產(chǎn)量和質(zhì)量有了更高的要求，雜種優(yōu)勢和矮化育種的利用使我國的水稻產(chǎn)量有了質(zhì)的飛躍，但是我國的稻米品質(zhì)卻普遍偏低，嚴(yán)重影響了人們的生活質(zhì)量和我國稻米的國際競爭力。隨著分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的快速發(fā)展，現(xiàn)在的育種模式已經(jīng)進(jìn)入分子標(biāo)記輔助選擇育種模式，利用與重要功能基因緊密連鎖的分子標(biāo)記，開展有利基因聚合，培育出優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、多抗的新品種。
　　 9311又名揚(yáng)

2、稻6號，其莖稈粗壯、葉挺色深、株葉型態(tài)好、米質(zhì)優(yōu)良、穩(wěn)產(chǎn)性好、抗倒性強(qiáng)、熟相好，是揚(yáng)州里下河地區(qū)農(nóng)科所培育出的優(yōu)質(zhì)常規(guī)水稻品種。日本晴是來自日本的粳稻品種，其株型矮小，米質(zhì)同樣優(yōu)良，抗倒性差。9311在直鏈淀粉含量上和日本晴差異較大，在膠稠度和糊化溫度上沒有明顯的差異。根據(jù)Blast的序列分析結(jié)果，鑒定出了已經(jīng)完成測序的9311和日本晴基因組序列上存在差異的18個淀粉合成相關(guān)基因，并發(fā)展了以PCR技術(shù)為基礎(chǔ)的檢測標(biāo)記，利用雜交、回交、自

3、交等技術(shù)將9311和日本晴間存在差異的稻米品質(zhì)相關(guān)基因?qū)?311，以達(dá)到改良9311稻米品質(zhì)的目的。經(jīng)過6次以9311為輪回親本的連續(xù)回交和分子標(biāo)記輔助選擇，形成了以9311為背景的淀粉合成相關(guān)基因的近等基因系，達(dá)到了多基因聚合的目的。通過對導(dǎo)入淀粉分支酶(SBE)相關(guān)基因的株系研究發(fā)現(xiàn)，近等基因系的各個株系在大部分的農(nóng)藝性狀上與9311沒有顯著差異，近等基因系的背景與9311十分接近，導(dǎo)入日本晴的淀粉合成相關(guān)基因能有效降低9311的

4、直鏈淀粉含量，因日本晴和9311的膠稠度和糊化溫度本身沒有太大差異，故其膠稠度和糊化溫度沒有明顯變化，整體上達(dá)到了改良稻米品質(zhì)的目的。
　　 在水稻遺傳分析和分子標(biāo)記輔助選擇中，樣品DNA的提取往往是最耗時、費(fèi)力的過程。本文介紹了一種高效、快速、簡便的用于PCR擴(kuò)增的植物基因組DNA快速制備方法，該方法只需將少量(1～50 mg)樣品、適量提取液(500μl)和一粒鋼珠放入2ml離心管，在細(xì)胞破碎儀中粉碎2分鐘，經(jīng)離心后可直接取