刺糖多孢菌對剪切力抗性的初步研究.pdf

1、通過對刺糖多孢菌(Saccharopolyspora Spinosa)G9菌株進(jìn)行單孢分離、復(fù)壯,獲得一株較高產(chǎn)的菌株G9-21,以G9-21為出發(fā)菌株進(jìn)行紫外誘變,獲得比G9-21效價(jià)(154μg/mL)提高了15.7％的菌株UV67；再對UV67進(jìn)行鏈霉素抗性育種篩選,獲得具有鏈霉素抗性菌株S26,其效價(jià)(189μg/mL)比UV67效價(jià)(155μg/mL)提高了21.9％；以G9-21(Spc+Str-)和S26(Spc-Str+

2、)兩個菌株為兩親本,進(jìn)行基因組重排育種,經(jīng)過6輪融合,初篩和復(fù)篩,得到比S26效價(jià)(189μg/mL)提高了94.7％的菌株R61(368μg/mL)；最后以菌株R61為出發(fā)菌株,進(jìn)行桿菌肽抗性育種篩選,得到一株具有桿菌肽抗性、發(fā)酵效價(jià)提高了7.3％的菌株B13(395μg/mL)。通過以上多種育種方法,出發(fā)菌株發(fā)酵效價(jià)提高了156.5％。
　　 以G9-21(Spc+Str-)和S26(Spc-Str+)兩個菌株為兩親本,進(jìn)行

3、基因組重排育種,經(jīng)過8輪連續(xù)融合,計(jì)算融合率,發(fā)現(xiàn)融合到第6輪后,融合率不再發(fā)生變化,即刺糖多孢菌有效融合輪數(shù)為6輪。
　　 以刺糖多孢菌G9-21(Spc+Str-)和阿維鏈霉菌Z1-106(Spc-Str+)為兩親本,進(jìn)行了屬間融合的嘗試,以期能改善刺糖多孢菌對剪切力敏感的問題。
　　 將直徑約為3mm、、大小均勻、千粒重為267g的玻璃珠添加在搖瓶中,以此模擬工業(yè)發(fā)酵的剪切力,從加入玻璃珠數(shù)量、不同時間加入玻璃珠和