防治土傳辣椒青枯病微生物有機(jī)肥研制與生物效應(yīng)研究.pdf

1、本文就辣椒土傳青枯病拮抗菌的篩選及其生物防治效應(yīng)開展了一系列研究，具體研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：
　　 從辣椒根際土壤中通過雙層平板法初篩獲得抑菌圈直徑大于15 mm的16株菌株，然后通過考察生長(zhǎng)速度，對(duì)抗生素的抗性強(qiáng)弱以及是否產(chǎn)芽孢進(jìn)行復(fù)篩。最終獲得高效拮抗菌株a45和j76。根據(jù)生理生化特性和16S rDNA序列分析，將菌株a45鑒定為枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）。同時(shí)，研究了菌株a45生長(zhǎng)的最適發(fā)酵條件，實(shí)

2、驗(yàn)結(jié)果表明：拮抗菌a45的最佳搖瓶發(fā)酵條件為30℃～37℃、pH7.0、鹽濃度0.5％、裝液量50m1（250ml三角瓶），最佳碳氮源分別為蔗糖和NH4NO3。為拮抗菌株a45作為生防制劑進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)提供了依據(jù)。
　　 按照20％（V/W）的比例將拮抗菌發(fā)酵液接種到等比例混合的豬糞堆肥和氨基酸有機(jī)肥中發(fā)酵4天，制得微生物有機(jī)肥（BOF）。利用拮抗菌發(fā)酵液（LC）和BOF在溫室中進(jìn)行了兩次盆栽試驗(yàn)。
　　 第一次盆栽試驗(yàn)

3、結(jié)果表明，土壤中施用j76發(fā)酵液和微生物有機(jī)肥對(duì)辣椒青枯病的防治效率分別為27.78％和44.44％；施用a45發(fā)酵液和微生物有機(jī)肥的防治效率分別為38.88％和50％。同時(shí)，土壤中施用LC和BOF能顯著降低病原菌數(shù)量。
　　 第二次盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明，土壤中單獨(dú)施用有機(jī)肥對(duì)辣椒青枯病的防治效率為23.93％施用a45和微生物有機(jī)肥防治效率分別為69.58％和76.09％，并且對(duì)辣椒生長(zhǎng)具有顯著的促進(jìn)作用。土壤中施用LC和BOF能

4、顯著降低病原菌的數(shù)量，第30 d時(shí)，病原菌數(shù)量較對(duì)照分別減少20.6％和25％。拮抗菌a45的數(shù)量變化顯示，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，根際土壤中拮抗菌含量逐漸下降，但施用微生物有機(jī)肥能顯著延緩a45拮抗菌數(shù)量的下降。
　　 生防細(xì)菌a45對(duì)辣椒防御酶系影響的結(jié)果顯示，接種拮抗菌使辣椒葉片POD、CAT和SOD活性大幅度提高，說明生防菌可以作為誘導(dǎo)因子，迅速激活植株體內(nèi)多種防御酶的活性。但是可溶性蛋白含量與防病效果沒有相關(guān)性，因此不能作為衡

5、量抗性強(qiáng)弱的指標(biāo)。
　　 a45對(duì)辣椒根系微生態(tài)的影響結(jié)果表明：使用拮抗菌和微生物有機(jī)肥能夠明顯改變土壤微生物區(qū)系組成，使土壤中細(xì)菌、放線菌和真菌的數(shù)量均有所上升。
　　 通過RCR擴(kuò)增的方法從拮抗菌株a45基因組中克隆出7個(gè)抗生素生物合成基因，包括ituA、ituB、ituC、ituD，Qk，bam和SboA基因，它們分別是Iturin、Subtilisin QK、Bacillomycin和Subtilosin A的生