茶樹(shù)菇(As-1)多糖的結(jié)構(gòu)分析及其對(duì)小鼠免疫功能的研究.pdf

1、茶樹(shù)菇(Agrocybe aegirita)是一種集高蛋白,低脂肪,低糖分,集保健食療于一身的純天然無(wú)公害保健食用菌。由于其味道鮮美,風(fēng)味獨(dú)特,含有豐富的氨基酸、各種礦質(zhì)元素以及豐富的多糖成分,故具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值,近年來(lái)倍受老百姓喜愛(ài),有著廣闊的市場(chǎng)前景。目前關(guān)于茶樹(shù)菇多糖的研究報(bào)道不多,尤其是多糖的結(jié)構(gòu)分析和免疫功能的研究。本文主要從茶樹(shù)菇菌絲體和子實(shí)體多糖兩方面同時(shí)進(jìn)行探索,研究它們的結(jié)構(gòu)和其免疫功能,以及兩者之間的異同

2、點(diǎn)。為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)與利用茶樹(shù)菇多糖奠定理論基礎(chǔ)。
　　 本文采用組合浸提法分別提取茶樹(shù)菇菌絲體和子實(shí)體多糖,用DEAE-纖維柱層析、Sephadex G-200過(guò)濾法純化茶樹(shù)菇多糖,得到多糖純品。結(jié)果顯示,粗多糖經(jīng)DEAE-纖維柱層析分離后,菌絲體多糖分離得到三個(gè)主峰,子實(shí)體多糖分離為四個(gè)峰。選擇含量最多的菌絲體多糖(APJ1)和子實(shí)體多糖(APz1)作為研究對(duì)象,經(jīng)Sephadex G-200再進(jìn)一步進(jìn)行純化得到,APJ1和AP

3、z1均為一對(duì)稱峰值。紫外可見(jiàn)掃描顯示APJ1和APz1均不含蛋白和核酸。硫酸蒽酮法測(cè)得多糖純度達(dá)WJ1=99.74％,Wz1=99.59％,表明APJ1和APz1純度達(dá)到99.5％以上,能滿足結(jié)構(gòu)分析對(duì)多糖純度的要求。應(yīng)用紅外光譜掃描和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析多糖的結(jié)構(gòu)組分。經(jīng)紅外光譜掃描分析,得知APz1主要是吡喃型葡聚糖,而APJ1同時(shí)含有吡喃型葡聚糖和呋喃型糖葡聚糖。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用結(jié)果分析表明,APJ1的單糖組成主要為吡喃型的D

4、-甘露糖、D-葡萄糖,并且還含有吡喃型的D-半乳糖、D-阿拉伯糖、D-核糖、D-木糖以及呋喃型的半乳糖。而APz1的主要單糖組分為吡喃型的葡萄糖、D-甘露醇和纖維二糖。
　　 設(shè)對(duì)照組作為平行對(duì)比實(shí)驗(yàn),用高脂飼料喂養(yǎng)小鼠,快速形成高脂模型。飼養(yǎng)小鼠至第12d,小鼠無(wú)論是血清的TG、TCH還是體重,模型組都明顯高于對(duì)照組,且兩組間存在顯著差異(P＜0.05);肝組織切片顯示,小鼠在建模前后肝細(xì)胞組織的發(fā)生了顯著變化,肝細(xì)胞排列紊亂

5、,結(jié)構(gòu)疏松,體積增大。由此,小鼠高脂動(dòng)物模型建立成功。
　　 通過(guò)腹腔注射法分別注射茶樹(shù)菇菌絲體多糖和子實(shí)體多糖,應(yīng)用茶樹(shù)菇多糖的免疫功能評(píng)價(jià)小鼠高脂模型。研究表明,菌絲體多糖和子實(shí)體多糖都有顯著的降低血脂功能,其中菌絲體多糖呈現(xiàn)極顯著差異(P＜0.01),子實(shí)體多糖為差異顯著(P<0.05),且菌絲體多糖的降脂效果強(qiáng)于子實(shí)體。同時(shí)發(fā)現(xiàn),茶樹(shù)菇多糖的免疫功能在小鼠高脂模型組中體現(xiàn)的降脂功能比對(duì)照組的體現(xiàn)尤為突出,這為今后系統(tǒng)探究

6、茶樹(shù)菇多糖的免疫功能提供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。
　　 本文應(yīng)用建立的高脂模型小鼠研究茶樹(shù)菇多糖對(duì)動(dòng)物的免疫功能。解剖并觀察小鼠免疫器官的變化,還分別測(cè)定小鼠肝臟的SOD、GSH-XP、T-AOC的活力和MDA的含量,結(jié)果顯示,茶樹(shù)菇多糖能明顯提高小鼠脾指數(shù)、降低胸腺指數(shù),均可顯著提高小鼠肝組織中的GSH-PX、SOD和T-AOC的活力,降低MAD的水平,模型組和對(duì)照組相比,呈現(xiàn)顯著差異(P＜0.05)或極其顯著差異(P＜0.01)。且菌