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文檔簡介
1、稻瘟菌(Magnaporthe grisea)侵染水稻引起的稻瘟病是水稻重要的病害之一。構(gòu)建稻瘟菌ATMT轉(zhuǎn)化體庫、鑒定相關(guān)突變體,將為研究稻瘟菌致病的分子機(jī)理奠定堅實基礎(chǔ)。稻瘟菌致病分子機(jī)理的深入解析將有助于研發(fā)新的技術(shù),用于該病害的控制。
作者利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化技術(shù)(Agrobacterium tumefaciens-Mediated Transformation,ATMT)轉(zhuǎn)化了稻瘟菌P131和Guy11兩個菌
2、株,分別獲得了5610和3243個轉(zhuǎn)化體。
通過篩選上述P131的轉(zhuǎn)化體庫,共獲得了17個菌落生長緩慢的突變體。遺傳分析表明:其中10個突變體的突變表型與插入標(biāo)記是共分離。這10個突變體分別是CD9250、CD9253、CD9857、CD9859、CD9860、CD9847、CD9848、CD9255、XXY9056和HM6,它們的生長速度分別是P131的53%、68%、66%、68%、74%、65%、74%、68%、65
3、%、72%。其中突變體CD9848、CD9860和HM6對親和性水稻品種麗江新團(tuán)黑谷的致病力比P131有明顯減弱;突變體XXY9056、CD9255、CD9860和CD9847的產(chǎn)孢量較P13l明顯減少,分別為P131的10.6%、21.7%、63.2%和76.4%。
進(jìn)一步,作者通過TAIL-PCR的方法獲得了突變體CD9253、CD9860、CD9859、CD9250和CD9857插入位點的側(cè)翼序列。與稻瘟菌全基因組序
4、列進(jìn)行比對發(fā)現(xiàn),CD9253的T-DNA插入在基因MGG08861.5的編碼區(qū),與ATG相距630bp;CD9860的T-DNA插入在基因MGG10150.5的啟動子區(qū),與ATG相距115bp;CD9859的T-DNA插入在基因MGG_04575.5的啟動子區(qū),與ATG相距327bp;CD9857的T-DNA插入在基因MGG_02769.5的啟動子區(qū),與ATG相距252bp; CD9250的T-DNA插入在基因MGG_04150.5內(nèi),
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