雞褪黑激素受體基因的多態(tài)性及其在不同組織中表達量的研究.pdf

1、褪黑激素（Melatonin，MEL）是松果體和視網(wǎng)膜分泌的一種重要內(nèi)分泌激素，它在多個物種的多個組織中廣泛存在，是光照信息同生殖系統(tǒng)協(xié)調(diào)關(guān)系中的重要信號，光照對繁殖機能的調(diào)節(jié)依靠褪黑激素介導(dǎo)，與褪黑激素受體（Melatonin receptor，MTNR）結(jié)合來調(diào)節(jié)動物的晝夜節(jié)律和繁殖變化。本研究旨在從分子水平上了解雞MTNR基因的遺傳變異以及開產(chǎn)前后不同組織的表達差異，以便為地方雞種的遺傳改良提供依據(jù)。研究結(jié)果如下：
　　

2、本研究以文昌雞為研究對象，設(shè)計了多對引物，運用克隆測序及直接測序方法，分別擴增MTNR1A、MTNR1B和MTNR1C三個受體基因的5′UTR和外顯子區(qū)域，并與文昌雞的產(chǎn)蛋性狀做關(guān)聯(lián)分析。結(jié)果表明：MTNR1B受體基因的5′UTR存在14個SNPs以及1個插入缺失位點。其中-778位點突變基因(A→G)對文昌雞中期(22-31周齡)產(chǎn)蛋數(shù)和46周齡總產(chǎn)蛋數(shù)的顯性效應(yīng)分別為達到了2.3枚和6.2枚。對后期(32-46周齡)產(chǎn)蛋數(shù)和46周齡

3、總產(chǎn)蛋數(shù)而言，-216位點C對A為優(yōu)勢等位基因，加性效應(yīng)值分別為2.5枚和3.2枚；顯性效應(yīng)分別為3.5枚和6.8枚，且表現(xiàn)為超顯性。兩個位點的單倍型分析表明，AA單倍型對46周齡的總產(chǎn)蛋數(shù)效應(yīng)值在4種單倍型中最低；AA/AA合并基因型母雞的開產(chǎn)日齡顯著晚于AC/AA和GC/GC基因型個體(P＜0.05)。MTNR1A、MTNR1B受體基因的外顯子高度保守，而在MTNR1C受體基因exon3上存在C378T和G381A兩個SNPs位點，

4、但是這兩個位點并沒有導(dǎo)致氨基酸的改變。以β-actin基因為內(nèi)標(biāo)，運用qRT-PCR方法，比較了MTNR1A、MTNR1B和MTNR1C基因在心臟、肝臟、輸卵管、卵巢、腦和視交叉組織及在雞開產(chǎn)前后表達量的差別。結(jié)果表明：MTNR1A基因在不同組織開產(chǎn)后均表現(xiàn)為表達上調(diào)（除腦中表達下調(diào)外），在開產(chǎn)前后和開產(chǎn)前各組織中的表達量差異并不顯著，但在開產(chǎn)后各組織中的表達量差異顯著，且以卵巢表達量最高。與開產(chǎn)前相比，開產(chǎn)后各組織中MTNR1B和MT