黃瓜漸滲系抗南方根結(jié)線蟲病遺傳規(guī)律及分子標(biāo)記研究.pdf

1、根結(jié)線蟲病是一種世界性病害，廣泛分布于世界各地，對農(nóng)作物的生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。調(diào)查表明：全世界40種主要農(nóng)作物每年因線蟲危害所造成的經(jīng)濟(jì)損失約在1000億美元以上，對蔬菜、花生、煙草和果樹造成的產(chǎn)量損失超過20％，自1855年英國科學(xué)家Berkeley最先在黃瓜根際發(fā)現(xiàn)根結(jié)線蟲以來，現(xiàn)已報道世界上有90多種根結(jié)線蟲。根結(jié)線蟲每年造成24種主要蔬菜作物減產(chǎn)約達(dá)11％，其中黃瓜是最易受害的蔬菜作物之一，而危害我國保護(hù)地黃瓜的以南方根結(jié)線

2、蟲為主。到目前為止還沒有預(yù)防和控制黃瓜南方根結(jié)線蟲病的有效辦法，抗病育種是解決黃瓜根結(jié)線蟲病最根本、最經(jīng)濟(jì)有效的途徑，而抗病資源和抗性遺傳分析是抗病育種的前提和基礎(chǔ)，國內(nèi)外研究工作者主要集中在抗病資源的收集和篩選，本文以抗南方根結(jié)線蟲病材料10-1與感病材料‘北京截頭’雜交配制F1，再自交獲F2群體，根據(jù)F1、F2代群體的表現(xiàn)型分離比例分析遺傳規(guī)律，采用BSA法利用SSR技術(shù)，篩選與南方根結(jié)線蟲基因緊密連鎖的SSR分子標(biāo)記。主要試驗結(jié)果

3、如下：
　　 ⑴本實驗對14份黃瓜種間雜交漸滲系進(jìn)行了抗南方根結(jié)線蟲苗期人工接種鑒定研究，結(jié)果篩選到2份中抗?jié)u滲系，同時對實驗室前期已篩選得到的抗病漸滲系10-1進(jìn)行進(jìn)一步自交純化，得到了抗病株10299F-4和10299F-5，病情指數(shù)均為2.0。
　　 ⑵通過對139株F2代單株進(jìn)行苗期人工接種鑒定，對其抗性分離情況進(jìn)行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，139株F2單株中有30株表現(xiàn)感病，109株表現(xiàn)抗病，經(jīng)X2測驗X20.05，1=0

4、.69　　 ⑶本實驗采用BSA法利用560對SSR引物在親本及抗感基因池間進(jìn)行多態(tài)性引物初選，其中560對SSR引物中有116對在親本間有多態(tài)性，將這116對引物在親本及抗感基因池間進(jìn)行篩選，最后發(fā)現(xiàn)有9對引物表現(xiàn)有多態(tài)性，將這9對引物在F2群體上進(jìn)行驗證，結(jié)果證明只有2對引物(S

5、SR13237和SSR23265)與抗病基因連鎖，利用作圖軟件JoinMaP3.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行連鎖分析，發(fā)現(xiàn)兩對引物位于抗病基因同側(cè)，連鎖距離分別為23.2cM和28.8cM。
　　 ⑷將篩選到的與抗南方根結(jié)線蟲基因連鎖的2對引物(SSR13237和SSR23265)在抗病親本、感病親本及野生種酸黃瓜中擴(kuò)增，結(jié)果在抗病親本和野生種酸黃瓜中都擴(kuò)增出了同一條代(150bp左右)，而在感病親本中卻未出現(xiàn)此條帶，對抗病親本及酸黃瓜中的條帶