麻杏石甘粉防治人工感染雞傳染性支氣管炎的試驗(yàn)研究.pdf

1、本試驗(yàn)主要研究麻杏石甘粉對(duì)人工感染傳染性支氣管炎病毒(IBV)雛雞的保護(hù)作用,并初步探討其可能的作用機(jī)制,為研究和開發(fā)中藥防治動(dòng)物疾病提供新的思路和方法。
　　 方法:IBV-M41標(biāo)準(zhǔn)毒株經(jīng)SPF雞胚復(fù)壯傳代5次后測(cè)定其半數(shù)感染量,以100EID50為參照值,通過(guò)滴鼻、點(diǎn)眼的方法對(duì)15日齡雛雞進(jìn)行人工感染試驗(yàn)。接毒24h后,觀察雞的臨床表現(xiàn)并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。然后將240只15日齡雛雞隨機(jī)分為8組:正常組、模型組、麻杏石甘粉高、

2、中、低劑量組及麻杏石甘散高、中、低劑量組。除健康組外其余7組接種IBV尿囊液。兩種藥物治療組于攻毒48h后分別以0.5％、1％、1.5％的麻杏石甘粉和0.12％、0.24％、0.36％的麻杏石甘散藥物濃度進(jìn)行干預(yù),連續(xù)給藥3d,于雛雞18、21、24、27、30日齡時(shí),每組隨機(jī)取6只雞,無(wú)菌心臟采血,分離血清。ELISA方法測(cè)定血清中IBV抗體滴度,然后將雛雞處死,取肺、支氣管等組織做病理切片,免疫組織化學(xué)方法測(cè)支氣管單位面積IgA分泌

3、細(xì)胞的變化；計(jì)算脾臟、法氏囊的器官指數(shù)。為評(píng)價(jià)麻杏石甘粉的毒性,以半數(shù)致死量(LD50)作為評(píng)價(jià)急性毒性強(qiáng)度的指標(biāo)將40只小白鼠隨機(jī)分為4組,每組10只,并且保證雌雄各半,給藥途徑為口服,試驗(yàn)期為7d,觀察動(dòng)物臨床表現(xiàn)和死亡情況。
　　 結(jié)果:(1)給每只供試雛雞滴鼻0.2mL100 EID50供試毒液,同時(shí)對(duì)雛雞進(jìn)行冷刺激(頻繁室內(nèi)灑水,關(guān)閉雞舍內(nèi)的取暖設(shè)施),從攻毒后的雞只臨床癥狀、死亡雞只的剖檢病變癥狀說(shuō)明,本試驗(yàn)成功建立

4、了雞傳染性支氣管炎模型；(2)麻杏石甘可溶性粉治療IB總有效率達(dá)90％-93.3％,治愈率為86.7％-90％,證實(shí)雛雞群應(yīng)用麻杏石甘粉治療此病效果顯著高于麻杏石甘散,飲服本藥的最適治療濃度為0.1％-0.15％；(3)與模型組相比,麻杏石甘粉組通過(guò)促進(jìn)機(jī)體細(xì)胞活化,導(dǎo)致組織迅速再生,改善IBV模型肺與支氣管組織的病理學(xué)變化并且效果優(yōu)于麻杏石甘散組；(4)抗體測(cè)定結(jié)果顯示給IBV感染雛雞藥物干預(yù)后,血清IBV抗體的滴度升高明顯,麻杏石甘

5、粉高、中劑量組均為抗體陽(yáng)性表現(xiàn),顯著高于麻杏石甘散組；(5)攻毒后3d,在IBV的刺激下,各組IgA分泌細(xì)胞的數(shù)量較正常組都有不同程度的增多,但到攻毒后9d,模型組及麻杏石甘散組IgA分泌細(xì)胞的增加幅度已不是很明顯,而麻杏石甘粉組仍然保持著較好的上升趨勢(shì),尤其在機(jī)體的康復(fù)期仍能高水平的分泌抗體,提高了雛雞抵御強(qiáng)毒攻擊的能力；(6)急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明,LD50>60000mg／kg,說(shuō)明麻杏石甘可溶性粉無(wú)毒,可安全服用。