氨海水和5-羥色胺對海灣扇貝(Argopecten irradians Lamarck)解剖卵的體外促熟研究.pdf

1、本文以海灣扇貝(Argopecten irradians Lamarck)為研究對象,使用氨海水和5-羥色胺對其解剖卵進(jìn)行體外處理,使卵母細(xì)胞成熟受精和發(fā)育。研究中探索了氨海水與5-羥色胺的最佳促熟條件,對體外促熟的受精卵進(jìn)行了培育和觀察,并通過熒光顯微技術(shù)觀察了受精卵發(fā)育的整個(gè)過程的,希望可以為貝類的遺傳育種,多倍體誘導(dǎo)等研究提供技術(shù)支持。
　　以成熟的海灣扇貝解剖卵為原材料,在不同濃度的氨海水和5-羥色胺溶液浸泡情況下,采取二

2、者單獨(dú)或聯(lián)合處理扇貝解剖卵不同時(shí)間,研究其體外促熟作用。統(tǒng)計(jì)了卵母細(xì)胞生發(fā)泡破裂率及其體外受精率,以獲得最優(yōu)的體外促熟方法。結(jié)果表明:0.005％～0.30％的氨海水均能誘導(dǎo)卵母細(xì)胞牛發(fā)泡破裂(85％左右),經(jīng)氨海水處理的卵母細(xì)胞可以完成受精,但受精率較低,0.005％濃度的氨海水處理45min的受精率最高,僅為(17.28±0.43)％;經(jīng)5-羥色胺(5-HT)處理的卵母細(xì)胞生發(fā)泡破裂率相對較低,但受精率得到顯著提高,5-HT濃度為8

3、×10-5M、處理30-60min時(shí),受精率達(dá)到(26.73±0.95)％;聯(lián)合處理時(shí)先用氨海水處理卵母細(xì)胞,然后用5-羥色胺處理成熟卵可以獲得最佳效果,受精率達(dá)(36.47±0.87)％。
　　對促熟卵的細(xì)胞學(xué)研究表明:體外促熟處理的受精卵受精率(37.3±1.46)％低于自然排放受精卵的受精率(87.2±1.12)％;同時(shí)促熟卵受精后的發(fā)育速度明顯滯后于自然排卵受精的發(fā)育速度。
　　對促熟卵的熒光顯微鏡研究表明:自然排放