小麥抗條銹基因Yr15分子標記的鑒定.pdf

1、我國小麥條銹病危害普遍而嚴重，由于條銹病菌的高度變異性，導致很難對小麥條銹病進行持續(xù)有效的控制。在抗病育種中應用分子標記輔助選擇有利于實現抗條銹病多基因積累，從而加速持久抗病品種的培育進程?！　≡?910年Yr15基因發(fā)現于以色列北部野生小麥Triticumdicoccoides中，大量研究證明該基因對當前流行小種抗性良好。因而，以小麥抗條銹病Yr15基因為研究對象，對于抗條銹基因的分子標記輔助選擇、圖譜克隆和基于抗病基因同源序列克隆

2、抗條銹病基因有重要價值?！　GA標記技術是利用抗病基因具有保守結構域的特性，通過人工合成引物對基因組DNA進行定點擴增，在全基因組水平上檢測DNA變異。在本實驗中，首先以小麥抗條銹病基因Yr15的近等基因系Yr15/6×AvocetS和感病親本AvocetS為材料進行RGA分析。擴增產物用4％變性聚丙烯酰氨分離，銀染顯色?？梢詸z測到30～70條帶，是瓊脂糖凝膠電泳檢測的5倍以上。本研究根據已克隆R基因普遍具有的NBS結構域的P-lo

3、op、Kinase-2a、Kinase-3a和LRR區(qū)設計49條RGA引物，組成442對引物組合，發(fā)現2條穩(wěn)定的多態(tài)性DNA片段。而且，由于PAGE能夠穩(wěn)定檢出低拷貝的擴增片段，大大地改善了RGA分析的重復性。其次，對2條多態(tài)性DNA片段與Yr15基因的遺傳連鎖性進行初步檢測，確定了由引物XaILR-F和PtoFen-S擴增的Yr15-R1，以及由引物XaILR-R和Pto-kin2IN擴增的Yr15-R2兩條多態(tài)性片段都與Yr15基因