重要小麥農(nóng)家品種抗條銹性遺傳分析及RAPD分子標(biāo)記.pdf

1、小麥條銹病是一種世界性病害，嚴(yán)重威脅著小麥生產(chǎn)。在抗病育種中應(yīng)用分子標(biāo)記輔助選擇有利于實現(xiàn)抗條銹病多基因積累，加速持久抗病品種的培育進(jìn)程。目前條銹菌生理小種變異快、小麥品種易喪失抗銹性，由于抗源單一化而導(dǎo)致的品種抗病性喪失是長期困擾植物病理學(xué)家和育種學(xué)家的難題。這就需要尋找新的抗源，我國的小麥農(nóng)家品種可能含有豐富而寶貴的抗病基因，如果能充分挖掘利用農(nóng)家品種中的抗條銹病資源，將大大提高我國小麥生產(chǎn)品種抗病基因的豐富度。 本試驗包括

2、兩部分內(nèi)容第一部分兩個農(nóng)家品種抗條銹性的遺傳分析，第二部分圓籽糙中抗條銹病基因的RAPD分析。 1.本文對農(nóng)家品種紅疙瘩(S327)、紅麥(蘇1661)進(jìn)行了抗條銹遺傳分析。以感病材料銘賢169作母本，分別以紅疙瘩、紅麥作父本，獲得雜種F1代種子，F(xiàn)，代與銘賢169回交獲得BC1代種子，F(xiàn)1代自交獲得F2代種子。對親本、F1代、F2代、BC1代接種鑒定，根據(jù)F1代的抗性表現(xiàn)和F2代、BC1代的抗感分離情況，初步明確了紅疙瘩對CY

3、19的抗性是由隱性上位的1對顯性基因和2對隱性基因共同控制的，對CY26的抗性是由隱性上位的1對顯性基因和2對隱性基因共同控制的，對CY32的抗性是由互補的三對隱性基因共同控制的。紅麥對CY19的抗性是由重疊的2對顯性基因共同控制的，對CY26的抗性是由1對不完全顯性基因控制的，對CY29的抗性是由互補的2對顯性基因共同控制的，對CY31的抗性是由互補的2對顯性基因和1對隱性基因共同控制的，對CY32的抗性是由顯性上位的1對顯性基因和2

4、對隱性基因共同控制的。 2.選用前人試驗中抗性表現(xiàn)較好的圓籽糙(豫327)與銘賢169配制雜交組合，通過用CY30、Hy-Ⅲ條銹菌生理小種進(jìn)行接種鑒定與遺傳分析，建立起了圓籽糙中抗病基因的F2代單基因分離群體。以小麥抗條銹病基因的供體親本圓籽糙和感病親本銘賢169作為對照，對抗感DNA池進(jìn)行RAPD分析。擴(kuò)增產(chǎn)物用4％變性PAGE分離'銀染顯色。RAPD-PCR產(chǎn)物用變性PAGE分離可以檢測到50～100條帶，是瓊脂糖凝膠電泳的

5、5倍以上。篩選了200個隨機(jī)引物，發(fā)現(xiàn)9條穩(wěn)定的多態(tài)性DNA片段。對9條多態(tài)性DNA片段與圓籽糙中抗病基因的遺傳連鎖性進(jìn)行初步檢測，確定了由1條引物擴(kuò)增的多態(tài)性片段OPR9872與抗病基因有連鎖性。將該標(biāo)記克隆、測序并根據(jù)序列兩端設(shè)計特異性引物。用圓籽糙與銘賢169雜交制備的220株F2代分離群體進(jìn)一步進(jìn)行遺傳連鎖性檢測，結(jié)果表明在220株抗病單株中，有71株發(fā)生標(biāo)記住本研究建立的農(nóng)家品種中抗病基因的分子標(biāo)記，在我國尚屬首次報道