丁酸鈉對肉雞免疫反應(yīng)和抗氧化功能調(diào)控作用研究.pdf

1、家禽免疫應(yīng)激和氧化損傷往往會導(dǎo)致機(jī)體營養(yǎng)代謝消耗增加、生長發(fā)育受阻以及肉品質(zhì)下降，嚴(yán)重時(shí)還會引發(fā)各種疾病，給家禽業(yè)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失．通過營養(yǎng)調(diào)控手段，緩解各種應(yīng)激引發(fā)的負(fù)面影響，使家禽遺傳潛力得到更大程度的發(fā)揮，已受到各國學(xué)者的關(guān)注．
　　 研究證實(shí)伺料添加劑丁酸鈉可以促進(jìn)動(dòng)物胃腸道發(fā)育，改善其生產(chǎn)性能，但其機(jī)理尚不明確．本研究利用脂多糖(LPS)和皮質(zhì)酮（CORT）分別制作肉雞免疫應(yīng)激和氧化損傷模型，研究無包被或油脂包被丁酸

2、鈉對肉雞機(jī)體免疫應(yīng)答、抗氧化功能、營養(yǎng)物質(zhì)代謝、各種激素變化以及肉品質(zhì)的影響，分析丁酸鈉是否可以通過緩解炎癥反應(yīng)和提高抗氧化功能，進(jìn)而維持機(jī)體正常生長發(fā)育，并改善其肉品質(zhì)．另外，通過對肉雞腸道發(fā)育、腸黏膜免疫和細(xì)胞凋亡以及相關(guān)基因表達(dá)的研究，探討丁酸鈉對炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制，同時(shí)分析丁酸鈉是否可以通過調(diào)節(jié)腸黏膜免疫應(yīng)答和細(xì)胞凋亡維持腸道結(jié)構(gòu)和功能的完整性．這些問題的解決將為推動(dòng)丁酸鈉的合理應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，同時(shí)為研究綠色有效的抗

3、生素替代品、促進(jìn)家禽健康養(yǎng)殖模式的建立提供理論依據(jù)．
　　 1．初步研究日糧中添加不同水平的丁酸鈉對肉雞生產(chǎn)性能、免疫應(yīng)答和抗氧化功能的影響．選用1日齡Arbor Acres肉雞（簡稱AA肉雞）240只（公雛），隨機(jī)分為4個(gè)處理，每處理分別在基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)上添加0g/kg、0.25 g/kg、0.50g/kg和1.00 g/kg的丁酸鈉，試驗(yàn)期為42d．試驗(yàn)結(jié)果顯示：對照組和各試驗(yàn)組間肉雞的體增重(BWG)、采食量(FI)和料重比

4、( F/G)均無顯著差異（P>0.05）；1.00 g/kg丁酸鈉顯著提高了21d肉雞胸腺指數(shù)(P<0.05)、14d新城疫抗體效價(jià)(P<0.05)，降低了21d肉雞血清中IL-6、TNF-a和CORT(P<0.05)含量；42d時(shí)，所有丁酸鈉組肉雞IL-6水平均顯著低于對照組(P<0.01)，同時(shí)1.00 g/kg丁酸鈉極顯著降低了血清中CORT的含量(P<0.001)；另外，21d時(shí)，與對照組相比，0.50 g/kg和1.00 g/

5、kg日糧丁酸鈉均顯著提高了血清中超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)(P<0.05)的活性，同時(shí)顯著降低了丙二醛( MDA)水平（P<0.05）；42d時(shí)，與對照組相比，飼喂1.00g/kg丁酸鈉肉雞血清中CAT含量極顯著升高(P<0.001)，而MDA含量極顯著降低(P<0.01)．但是，丁酸鈉對機(jī)體外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率(LTR)和血清中IL-1B、前列腺素E2(PGE2)及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的含量沒有影響(

6、P>0.05)．
　　 2．在上一部分研究結(jié)果的基礎(chǔ)上，利用LPS腹腔注射AA肉雞，引起機(jī)體免疫應(yīng)激，研究免疫應(yīng)激和日糧中添加丁酸鈉對機(jī)體免疫反應(yīng)的影響，另外通過對肉雞腸道結(jié)構(gòu)和功能、腸黏膜促炎癥因子mRNA表達(dá)以及核因子-kB（NF-kB）的激活-核移位等指標(biāo)的測定，探討日糧丁酸鈉緩解炎癥反應(yīng)的作用機(jī)制．試驗(yàn)采用2x2因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，即選用120只1日齡健康A(chǔ)A肉雞，分為兩個(gè)處理，每個(gè)處理12個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5只雞，分別飼喂基礎(chǔ)

7、日糧和在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上添加1.00 g/kg的丁酸鈉日糧．分別在16、18和20日齡早晨，從每個(gè)日糧處理組中隨機(jī)選取半數(shù)肉雞，腹腔注射相同劑量的細(xì)菌LPS（0.5mg/Kg-BW），另一半注射等量的生理鹽水．飼養(yǎng)期為21d．試驗(yàn)結(jié)果顯示：
　　 (1) LPS刺激顯著降低了肉雞的生產(chǎn)性能，而丁酸鈉顯著緩解了由于LPS注射造成的肉雞生產(chǎn)性能下降（P<0.05）．另外，LPS顯著增加了肉雞16d和20d血清中IL-1B、IL-6、

8、TNF-a、CORT、a1-酸性糖蛋白(AGP)、胰高血糖素(PG)和總蛋白的含量(P<0.01)，同時(shí)顯著降低了胰島素（Ins）、葡萄糖和甘油三酯的含量(P<0.05)．日糧丁酸鈉有效抑制了由于LPS刺激引起的16d血清中IL-6、CORT和a1-酸性糖蛋白(AGP)水平升高（P<0.05），部分抑制了TNF-a和甘油三酯含量的增加：在20d時(shí)，丁酸鈉有效緩解了血清中TNF-a、AGP、Ins、PG、葡萄糖和總蛋白水平的改變（P<0.

9、05）．注射LPS和日糧丁酸鈉對16d血清中CORT和20dAGP、葡萄糖和總蛋白的含量存在互作效應(yīng)(P<0.05)．
　　 (2) LPS顯著降低了肉雞十二指腸絨毛長度，增加了其隱窩深度(P<0.05)，同時(shí)降低了絨毛高度與隱窩深度的比值(V/C)(P<0.001)．丁酸鈉顯著增加了肉雞十二指腸和空腸絨毛長度以及十二指腸隱窩深度(P<0.05)，同時(shí)還增加了十二指腸和空腸的V/C值(P<0.05)．另外，給肉雞注射LPS極顯著

10、增加了十二指腸和空腸黏膜中髓過氧化物酶( MPO)、細(xì)胞間粘附分子-1（ICAM-I）及活化的NF-kB含量(P

11、)，同時(shí)，有效緩解了由于LPS注射引起的十二指腸ICAM-I含量和IL-6 mRNA表達(dá)量以及空腸MPO含量的增加(P<0.05)．另外，日糧丁酸鈉和LPS刺激對十二指腸MPO和ICAM-I存在互作效應(yīng)(P<0.05)．
　　 3．利用30 mg/kg CORT飼喂AA肉雞，研究包被丁酸鈉對腸道抗氧化功能和細(xì)胞凋亡的影響，并探討其機(jī)理，選用120只1日齡健康A(chǔ)A內(nèi)雞，從肉雞ld開始分為兩個(gè)處理，每個(gè)處理12個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5只雞

12、，分別飼喂基礎(chǔ)日糧和在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上添加0.4g/kg的包被丁酸鈉日糧．第7d時(shí)選取每個(gè)處理中半數(shù)肉雞改為飼喂添加CORT日糧，飼養(yǎng)期為21d。結(jié)果表明CORT可以極顯著降低肉雞FI和BWG，增加F/G(P<0.001)，日糧包被丁酸鈉可以極顯著降低F/G（P<0.01），并且有效緩解了由于飼喂CORT引起的BWG下降（P<0.05）；另外，包被丁酸鈉和CORT對F/G存在互作效應(yīng)(P<0.05)．此外，CORT極顯著降低了十二指腸黏

13、膜中SOD、GSH-Px和CAT(P<0.01)活性以及空腸黏膜中SOD和CAT(P<0.01)活性，顯著增加了十二指腸和空腸黏膜中的MDA含量(P<0.01)；包被丁酸鈉極顯著增加十二指腸和空腸黏膜中CAT活性，降低十二指腸中MDA的含量（P<0.01）．另外，CORT顯著增加肉雞十二指腸細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)，降低了Bcl-2的mRNA表達(dá)量（P<0.05），同時(shí)包被丁酸鈉顯著降低了十二指腸AI，提高了Bcl-2的mRNA表達(dá)量（P<

14、0.05）．
　　 4．給AA肉雞宰前皮下注射CORT，模擬宰前急性應(yīng)激，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生氧化損傷，進(jìn)而研究CORT和日糧包被丁酸鈉對內(nèi)雞體重、屠宰性能及肉品質(zhì)的影響．試驗(yàn)選用120只1日齡健康A(chǔ)A肉雞，同樣采用2x2因子設(shè)計(jì)，即日糧處理（基礎(chǔ)日糧或基礎(chǔ)日糧中添加0.4 g/kg包被丁酸鈉）和應(yīng)激處理（注射4 mg/kg BW CORT或等量玉米油），飼養(yǎng)期為42d，試驗(yàn)期為辛前3h．研究結(jié)果顯示CORT顯著增加了肉雞的失重(P<0

15、.05)，同時(shí)包被丁酸鈉有效緩解了由于CORT注射引起的失重增加(P<0.05)．包被丁酸鈉和CORT對內(nèi)雞失重存在互作效應(yīng)（戶<0.05）；CORT注射顯著降低了胸肌中CAT的活性，增加了MDA的含量(P<0.05)，同時(shí)包被丁酸鈉顯著增加了胸肌中CAT的活性(P<0.05)，極顯著降低了MDA的含量（P<0.001）：另外，CORT極顯著降低了胸肌pH-5min和pHu值（P<0.01），顯著增加了L*值和b*值(P<0.05)；包

16、被丁酸鈉可以顯著降低飽和脂肪酸(SFA)和硬脂酸(C18:0)在總脂肪酸中的比例(P<0.0l)，顯著增加了花生酸(C20:0)和花生四烯酸(C20:4)在總脂肪酸中的百分含量(P<0.01)．同時(shí)顯著增加了多不飽和脂肪酸(PUFA)和SFA以及不飽和脂肪酸和SFA的比值（P<0.05），但是CORT對胸肌中脂肪酸的組成沒有顯著影響（P>0.05）．綜上所述，得出如下結(jié)論：
　　 (1)日糧中添加0.25～l.00 g/kg丁酸

17、鈉對正常生理狀況下肉雞的生產(chǎn)性能影響不顯著，但從其可以調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答和提高抗氧化功能方面可知日糧中添加丁酸鈉可以促進(jìn)肉雞機(jī)體健康，并且l.00g/kg丁酸鈉添加組試驗(yàn)效果較好．
　　 (2) LPS注射誘導(dǎo)的免疫應(yīng)激導(dǎo)致了肉雞機(jī)體營養(yǎng)物質(zhì)消耗和生產(chǎn)性能下降，同時(shí)增加了腸黏膜中NF-kB核移位，提高了促炎癥因子mRNA表達(dá)量，促進(jìn)了腸黏膜炎癥應(yīng)答，對腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生了不良的影響．日糧中添加1.00g/kg丁酸鈉有效緩解了由于LP

18、S注射誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答，改善了肉雞腸道的結(jié)構(gòu)和功能，維持了肉雞的生產(chǎn)性能，其機(jī)制可能與丁酸鈉抑制NF-kB信號通路的激活有關(guān)．
　　 (3)日糧中添加CORT導(dǎo)致了腸黏膜抗氧化功能下降，促進(jìn)了腸上皮細(xì)胞凋亡，降低了凋亡相關(guān)基因Bcl-2 mRNA表達(dá)量．日糧中添加包被丁酸鈉提高了腸黏膜的抗氧化水平，抑制了細(xì)胞的凋亡，同時(shí)提高了Bcl-2基因的表達(dá)，有利于維持腸道結(jié)構(gòu)和功能的完整性．
　　 (4)宰前皮下注射CORT顯著增加