蘇魯部分地區(qū)禽致病性大腸桿菌的分離及2個(gè)O78分離株致病性的研究.pdf

1、禽致病性大腸桿菌引起禽類的大腸桿菌病，包括心包炎、肝周炎、氣囊炎、呼吸道疾病和敗血癥等，給全世界各國(guó)的養(yǎng)禽業(yè)都帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為了對(duì)禽致病性大腸桿菌的流行情況及發(fā)病情況進(jìn)行監(jiān)控以便給養(yǎng)禽業(yè)降低經(jīng)濟(jì)損失，我們從2013年1月份到2014年12月份在江蘇省的南通市、鹽城市、常州市、淮安市及山東省青島市的規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)及小型養(yǎng)殖戶中有大腸桿菌病癥狀的肉雞中進(jìn)了禽致病性大腸桿菌的分離。本次分離禽致病性大腸桿菌的肉雞，日齡在1日齡到32日齡之

2、間。通過相關(guān)生化鑒定，共分離及鑒定出禽致病性大腸桿菌203株，其中以江蘇省的南通地區(qū)和山東省的青島地區(qū)為主，分別為96株和97株，其他市區(qū)共10株。
　　通過玻板凝集和試管凝集試驗(yàn)測(cè)定禽致病性大腸桿菌的O血清型，共測(cè)出159個(gè)分離株的O血清型，未定型的菌株44株。其中O血清型主要以O(shè)78、O45、O1、O142、O65、O24、O161等O血清型為主，約占定型菌株的63.5％，除此之外還涉及很多其他的O血清型。本次分離結(jié)果顯示不同

3、地區(qū)的O血清型的分布存在著差異，其中南通地區(qū)以O(shè)78、O45、O142、O161、O65、O24為主，共60株，共占南通地區(qū)定型菌株的75％，山東省青島地區(qū)O78、O1、O18、O161為主，共34株，占定型菌株的46.6％，其他地區(qū)以O(shè)78為主。結(jié)果表明:不同地區(qū)禽致病性大腸桿菌的O血清型的流行存在著差異，但是不同地區(qū)都是以O(shè)78為主要流行株，表明O78是引起禽類大腸桿菌病的一個(gè)主要的原因。
　　除了O血清型，同時(shí)對(duì)100株大腸

4、桿菌的種系發(fā)生型進(jìn)行了檢測(cè)，其中A型菌株占30％、B1型菌株占31％、B2型菌株占2％、D型菌株占37％。對(duì)與禽致病性大腸桿菌的毒力密切相關(guān)的六個(gè)毒力基因進(jìn)行了檢測(cè)，包括Iss、iroN、tsh、cvaC、iutA、irp-2，檢出率分別為93.5％、73.1％、30.4％、37.2％、88.5％、34.6％，與國(guó)內(nèi)外結(jié)果基本一致。為了確定分離到的禽致病性大腸桿菌是否具有毒力以及毒力的強(qiáng)弱，我們選擇其中的以O(shè)78及O45等血清為主的46

5、個(gè)分離株進(jìn)行了1日齡雛雞的致死性試驗(yàn)，對(duì)1日齡雛雞采取左胸氣囊注射，107CFU的菌液進(jìn)行攻毒，結(jié)果表明大部分(63％)菌株具有高致病性。
　　通過對(duì)O血清型的鑒定可知，O78為本次主要的流行菌株，該血清型也是國(guó)內(nèi)外的流行血清型，為了了解O78分離株的毒力之間差異及可能的原因，我們選取了不同地區(qū)的2個(gè)O78分離株APEC/QD/04分離株和APEC/HA/01分離株進(jìn)行了種系發(fā)生分型、脈沖場(chǎng)凝膠電泳、LD50測(cè)定、35日齡的SPF

6、雞及肉雞的體內(nèi)動(dòng)態(tài)分布試驗(yàn)并制作了相應(yīng)的病理切片，以觀察病理變化。種系發(fā)生分型表明兩個(gè)菌株分別屬于B1型和A型，脈沖場(chǎng)凝膠電泳結(jié)果表明兩株菌株之間存在著遺傳差異，APEC/QD/04分離株和APEC/HA/01分離株的LD50分別為108.5CFU、1047CFU，通過35日齡SPF雞和肉雞采用左胸氣囊接種108CFU菌液，結(jié)果表明兩菌株均可以對(duì)35日齡SPF雞和肉雞造成感染，并且分析顯示兩株菌株之間存在著毒力的差異，通過對(duì)這兩株菌的毒

7、力基因進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)APEC/QD/04分離株和APEC/HA/01分離株毒力基因存在差異，APEC/QD/04分離株比APEC/HA/01分離株毒力弱，APEC/QD/04分離株比APEC/HA/01分離株缺少tsh、cvaC、irp-2基因，這也許是兩個(gè)菌株之間致病性存在差異的一個(gè)原因。但是禽致病性大腸桿菌的致病機(jī)理比較復(fù)雜，影響菌株毒力的原因有很多，也有很多未知的毒力基因還有待進(jìn)一步的發(fā)現(xiàn)。通過兩個(gè)菌株的致病性試驗(yàn)，表明APEC/Q