聯(lián)合應(yīng)用IVM和TCBZ在蠕蟲(chóng)感染綿羊體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)相互作用研究.pdf

1、為了研究伊維菌素和三氯苯達(dá)唑藥物相互作用對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)的影響，本試驗(yàn)選取了自然條件下感染消化道蠕蟲(chóng)的15只鄂爾多斯細(xì)毛羊，感染強(qiáng)度為每克糞便蟲(chóng)卵數(shù)量在1500以上，隨機(jī)分成3組，第1組綿羊以0.2 mg·kg-1的劑量皮下注射伊維菌素，第2組綿羊以12 mg·kg-1的劑量單獨(dú)灌服三氯苯達(dá)唑混懸液，第3組綿羊以與第1組相同劑量、相同給藥方式給藥伊維菌素，同時(shí)以與第2組相同劑量、相同給藥方式給藥三氯苯達(dá)唑。于給藥后第0.75、2、4、8、1

2、6、24、36、48、72、120、192、336h，頸靜脈采集血樣并分離血漿，置-39℃冰箱保存待測(cè)。
　　試驗(yàn)首先建立了綿羊血漿中伊維菌素（IVM）的高效液相色譜（HPLC）熒光檢測(cè)方法，以阿維菌素（AVM）作為內(nèi)標(biāo)物，用甲醇沉淀血漿蛋白，然后經(jīng)C18固相萃取柱凈化，并經(jīng)衍生反應(yīng)后，用熒光HPLC進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)條件如下：流動(dòng)相為甲醇（V）：乙腈（V）=1：1，含5%的水；激發(fā)波長(zhǎng)364nm，發(fā)射波長(zhǎng)470nm；流速：1.0 m

3、L·min-1；柱溫：室溫；進(jìn)樣量：20μL。IVM和AVM的保留時(shí)間為8.73min和6.16min，色譜峰分離良好，無(wú)其他雜質(zhì)峰干擾。
　　其次，建立了血漿中三氯苯達(dá)唑（TCBZ）及其代謝產(chǎn)物三氯苯達(dá)唑亞砜（TCBZSO）和三氯苯達(dá)唑砜（TCBZSO2）的HPLC同步檢測(cè)方法，以甲苯咪唑（MBZ）作為內(nèi)標(biāo)物，以甲醇作為血漿蛋白的沉淀劑，血漿樣品通過(guò)前處理后經(jīng)HPLC紫外檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)條件如下：流動(dòng)相為乙腈/醋酸銨（0.0

4、25M，pH6.6）（A/B）梯度洗脫，即0.01min－5.00min，A/B=52/48～60/40；5.00min－13.00min，A/B=60/40～70/30；13.00min－20.00min，A/B=70/30～52/48；流速1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：295nm；柱溫：室溫；進(jìn)樣量：50μL。TCBZ、TCBZSO、TCBZSO2、MBZ的保留時(shí)間分別為10.044min、5.535min、4.708min、3.4

5、20min，各目標(biāo)物色譜峰分離良好。
　　利用以上方法測(cè)定給藥后各時(shí)間點(diǎn)IVM、TCBZ、TCBZSO以及TCBZSO2在血漿樣品中的濃度，并運(yùn)用Phoenix WinNonlin藥動(dòng)學(xué)軟件按非房室模型方法處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算出藥動(dòng)學(xué)各參數(shù)。結(jié)果表明：聯(lián)合應(yīng)用IVM和TCBZ后，IVM的血漿藥物峰濃度(Cmax)、藥時(shí)曲線下面積（AUC）均極顯著低于單獨(dú)用藥組，表觀分布容積（Vd）、消除半衰期（T1/2ke）、體清除率（CLb）則極