中華鱉急性出血性綜合癥的病原學(xué)研究.pdf

1、中華鱉急性出血性綜合癥是2003年來發(fā)生在浙江省中華鱉生態(tài)養(yǎng)殖場的一種突發(fā)性疾病，具有發(fā)病急、傳染性強(qiáng)、死亡率高等特點，病鱉的主要癥狀為腹甲和前肢出現(xiàn)紅色斑塊或斑點，四肢、脖子腫大，解剖觀察發(fā)現(xiàn):病鱉體內(nèi)血液流失嚴(yán)重，肺黑色，肝腫大呈花斑狀，胃腸道充血出血嚴(yán)重，咽喉鰓狀組織充血糜爛，有的雌性個體卵巢充血糜爛。
　　本研究針對2006年-2012年間浙江省池塘養(yǎng)鱉場中采集的典型急性出血性綜合癥病鱉，從細(xì)菌、病毒、支原體等方面開展該病

2、的病原學(xué)研究。對病鱉的優(yōu)勢分離菌進(jìn)行16srRNA鑒定表明:12例病鱉肝、腎等器官分離到氣單胞菌5例、愛德華菌1例、變形桿菌1例、球菌1例和沙門菌1例,分離率分別為41.7％和8.3％;人工感染及LD50測定表明:氣單胞菌及沙門菌有較強(qiáng)毒力，氣單胞菌LD50范圍為1.47-5.18×107CFU/ml;變形桿菌、愛德華菌和腸球菌毒力較低，以0.5×108CFU/ml注射感染不能使中華鱉發(fā)病死亡。中華鱉注射氣單胞菌后可出現(xiàn)底板發(fā)白或發(fā)紅、

3、肝臟紫紅、脾和腎腫大、胃腸道充血出血等癥狀，
　　取中華鱉急性出血性綜合癥樣品制備除菌病毒濾液用于攻毒中華鱉，12個病例中有3個可使健康中華鱉復(fù)制出脖子腫大、胃腸粘膜嚴(yán)重充血、肝腫大呈花斑狀、咽喉鰓狀組織充血糜爛等典型的急性出血性綜合癥癥狀，病毒經(jīng)健康中華鱉連續(xù)傳代5代后毒力可逐漸趨于穩(wěn)定;用虹彩病毒和皰疹病毒特異性引物PCR檢測，發(fā)現(xiàn)3份樣品為虹彩病毒陽性，分別為YH06-1、HZ11-1、TX12-1，所有樣品未檢測到皰疹病毒

4、;毒力和病毒的PCR結(jié)果未發(fā)現(xiàn)對應(yīng)關(guān)系;將5代連續(xù)感染中華鱉的除菌病毒懸液接種EPC、CIK和CO細(xì)胞，連續(xù)傳代5代，未發(fā)現(xiàn)細(xì)胞病變。用支原體通用引物對全部樣品進(jìn)行了支原體檢測，從YH06-1和SX12-1中可檢測到PCR陽性產(chǎn)物，擴(kuò)增片段大小符合預(yù)期，但委托測序未獲得核酸序列;采用含醋酸鉈的支原體選擇性培養(yǎng)基，不能有效抑制雜菌，無法得到支原體純化培養(yǎng)物。
　　從不同病原研究的結(jié)果，可以認(rèn)為中華鱉急性出血性綜合癥的致病病原可能不是

5、單一病原引起的，而是由多種病原與飼養(yǎng)環(huán)境共同作用引起的，類似于龜類的鼻胃綜合征。
　　對2012年紹興發(fā)病中華鱉體內(nèi)分離到細(xì)菌SX12-1進(jìn)行生化和分子鑒定、毒力分析，表明為沙門菌，該菌株以1×107CFU/ml、1×108CFU/ml、1×109CFU/ml的濃度進(jìn)行人工感染試驗，4-6天內(nèi)陸續(xù)發(fā)病，感染死亡鱉四肢腫脹、胃腸粘膜高度出血、肝臟出血，胃腸道內(nèi)淤積大量血塊。測定SX12-1菌株的半數(shù)致死量為3.16×106CFU/m