松材線蟲(chóng)病原真菌Esteya vermicola生物活性測(cè)定及其培養(yǎng)條件的研究.pdf

1、松材線蟲(chóng)（Bursaphelenchus xylophilus）是目前對(duì)中國(guó)林業(yè)威脅最大的有害生物，對(duì)松樹(shù)具有毀滅性的危害。自發(fā)現(xiàn)松材線蟲(chóng)病以來(lái)，國(guó)內(nèi)外投入了巨大的人力、物力和財(cái)力來(lái)防治該病，迄今為止尚缺乏經(jīng)濟(jì)且行之有效的防控方法，仍有繼續(xù)蔓延的趨勢(shì)。目前對(duì)于松材線蟲(chóng)病的防治，主要以化學(xué)防治為主，直接針對(duì)松材線蟲(chóng)的防治難度較大，國(guó)內(nèi)外研究較少。本實(shí)驗(yàn)室從韓國(guó)引進(jìn)一種具有生防潛力的松材線蟲(chóng)內(nèi)寄生真菌Esteyavermicola，前人研究

2、結(jié)果表明該真菌對(duì)松材線蟲(chóng)具有很高的侵染活力。本文擬從侵染活力，營(yíng)養(yǎng)特性和保存條件三個(gè)方面對(duì)該真菌進(jìn)行試驗(yàn)，旨在為今后利用該真菌進(jìn)行松材線蟲(chóng)生物防治提供理論依據(jù)。
　　 通過(guò)試驗(yàn)證明了內(nèi)寄生真菌E.vermicola從產(chǎn)孢細(xì)胞上脫落的分生孢子對(duì)松材線蟲(chóng)具有侵染活力，且營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基固體培養(yǎng)所得的真菌孢子對(duì)線蟲(chóng)的侵染能力較強(qiáng);不同菌株孢子對(duì)線蟲(chóng)的侵染活力存在差異，菌株CBS115803的侵染活力最高，CBS100821菌株次之，C

3、NU120806菌株最低;在WA平板上采用浸漬法進(jìn)行生測(cè)時(shí)，結(jié)果表明孢子更容易粘附到線蟲(chóng)體表;孢子對(duì)松材線蟲(chóng)的侵染活力隨著孢子濃度的降低而降低，所試濃度中，1×109個(gè)·ml-1的處理孢子對(duì)線蟲(chóng)的粘附及致死效力最高。
　　 在液體和固體培養(yǎng)條件下，依次研究了碳、氮源種類(lèi)和碳濃度及碳氮比對(duì)E.vermicola生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明葡萄糖和酵母粉分別是最適宜液體和固體培養(yǎng)的碳、氮源。另外，液體培養(yǎng)條件下，當(dāng)碳濃度為12g·L-1，碳

4、氮比為5∶1和40∶1時(shí)，分別是菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的最優(yōu)組合;而固體培養(yǎng)條件下，當(dāng)碳濃度為8g·L-1，碳氮比為20∶1和10∶1時(shí)，分別是菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的最優(yōu)組合。以菌絲生物量和產(chǎn)孢量為指標(biāo)采用優(yōu)化培養(yǎng)基液體培養(yǎng)該真菌13d后得到生長(zhǎng)曲線，5d后菌絲生物量達(dá)最大值，11d后產(chǎn)孢量達(dá)最大值，可為以后液體發(fā)酵進(jìn)行批量生產(chǎn)時(shí)提供理論參考。
　　 通過(guò)從溫度（高溫干燥和低溫保存）、添加劑、空氣條件三方面初步研究了不同環(huán)境條件對(duì)E.verm