重慶市松材線蟲病的發(fā)生及其松褐天牛傳播病原線蟲的能力研究.pdf

1、松材線蟲病(pine wilt disease)是一種重要的檢疫性病害，松褐天牛(Monochamus alternatus)是傳播松材線蟲(Bursaphelenchus xylophilus)的主要媒介。松褐天牛成蟲羽化后除體表附著有松材線蟲外，大部分松材線蟲分布在松褐天牛體內(nèi)，其中以頭、胸部最多，主要分布在氣管系統(tǒng)內(nèi)。當(dāng)松褐天牛取食補(bǔ)充營養(yǎng)時(shí)，線蟲幼蟲從天牛取食造成的傷口進(jìn)入樹脂道。被松材線蟲侵染的松樹往往又是松褐天牛的產(chǎn)卵對(duì)象。

2、翌年，在罹病松樹內(nèi)寄生的松褐天牛羽化時(shí)又會(huì)攜帶大量線蟲，并“接種”到健康的樹上，導(dǎo)致病害的擴(kuò)散蔓延。松材線蟲病已經(jīng)成為重慶市最具危險(xiǎn)性的檢疫性林業(yè)有害生物。對(duì)重慶市松材線蟲病的分布危害和發(fā)生規(guī)律進(jìn)行研究，是科學(xué)控制該地區(qū)松材線蟲病的理論基礎(chǔ)。掌握媒介昆蟲松褐天牛在重慶地區(qū)的生物生態(tài)學(xué)特性以及傳播病原線蟲的能力，對(duì)預(yù)防松材線蟲病疫情擴(kuò)散和防治松褐天牛有著極其重要的意義。經(jīng)過近兩年的研究工作及其查閱資料，獲得了以下主要研究結(jié)果： 1

3、.松材線蟲病在重慶市的發(fā)生動(dòng)態(tài)研究重慶市的涪陵、長壽和萬州區(qū)最早發(fā)生松材線蟲病，江北、巴南和渝北區(qū)于2003年發(fā)生松材線蟲病。其中渝北區(qū)通過鏟除，從2005年起連續(xù)3年未發(fā)現(xiàn)病死樹，巴南區(qū)也已經(jīng)連續(xù)2年未發(fā)現(xiàn)病死樹。2004年沙坪壩區(qū)和忠縣被確認(rèn)為松材線蟲病疫區(qū)。2006年云陽縣被確認(rèn)為松材線蟲病疫區(qū)。截至2007年底，除渝北區(qū)和巴南區(qū)外，尚有7個(gè)區(qū)縣不同程度地發(fā)生松材線蟲病。 3.重慶市松材線蟲的分子檢測(cè)通過分離來自重慶市涪陵

4、、萬州、云陽和北碚地區(qū)的病死馬尾松樣品，采用形態(tài)和分子標(biāo)記特征相結(jié)合的方法對(duì)其進(jìn)行鑒定。形態(tài)觀察發(fā)現(xiàn)涪陵地區(qū)的分離線蟲符合松材線蟲的特征，而萬州，云陽和北碚地區(qū)的分離線蟲更符合擬松材線蟲的特征。通過選擇rDNA的部分核苷酸序列作為目的序列，用松材線蟲和擬松材線蟲的特異性引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并對(duì)PCR產(chǎn)物直接回收測(cè)序，擴(kuò)增片段ITS1基因序列信息顯示，擴(kuò)增所得的329bp片段與松材線蟲相應(yīng)的片段序列同源性近乎一致，因此確定該線蟲為松材線

5、蟲。擴(kuò)增所得的206bp片段與擬松材線蟲相應(yīng)的片段序列同源性一致。說明引物1和引物2分別是松材線蟲和擬松材線蟲的特異性引物。由此進(jìn)一步確定從重慶涪陵馬尾松萎蔫病樹分離到的線蟲為松材線蟲，而從萬州、云陽和北碚分離到的線蟲為擬松材線蟲。 3.松褐天牛雌性識(shí)別信息素及天敵的初步研究松褐天牛雌性成蟲可能存在接觸性信息素，雄蟲依靠觸角、下唇須和下顎須等化感器來接受這些信號(hào)的刺激。本實(shí)驗(yàn)用正己烷提取性信息素后進(jìn)行生物測(cè)定，結(jié)果沒有觀察到引起雄蟲的交

6、配行為，其原因可能在于該試劑并未真正抽提到松褐天牛的性信息素所致。松褐天牛性成熟后雌雄成蟲依靠衰弱寄主釋放的強(qiáng)揮發(fā)性氣味聚集于寄主樹干上。根據(jù)初步調(diào)查，松褐天牛的天敵主要有微生物天敵，捕食天敵和寄生天敵等。天牛斑叩甲是松褐天牛的重要捕食性天敵。在林間比較多的寄生性天敵是管氏腫腿蜂，寄生于松褐天牛的幼蟲和蛹。此外松褐天牛羽化后成蟲體上常見有一種淡黃色的真菌，但未能確定其分類地位，有待進(jìn)一步的研究。 4.松褐天牛攜帶線蟲數(shù)量的檢測(cè)實(shí)

7、驗(yàn)共檢測(cè)了101頭經(jīng)室內(nèi)羽化的松褐天牛成蟲，其中93.1％的成蟲攜帶有松材線蟲，平均每頭成蟲攜帶約2181條松材線蟲，單頭天牛最多攜帶32096條松材線蟲。多數(shù)松褐天牛攜帶的松材線蟲在1000-9999條之間，雌雄成蟲攜帶的線蟲數(shù)量差異不大。但是攜帶量超過10000條的5頭成蟲均為雄蟲。松褐天牛在室內(nèi)的羽化期可分為羽化初期，羽化高峰期，羽化末期三個(gè)階段。松褐天牛在羽化初期攜帶的線蟲數(shù)量最大，平均為4311條，且雄蟲攜帶松材線蟲的數(shù)量遠(yuǎn)大

8、于雌蟲。其次為羽化末期，松褐天牛的平均攜帶量為1675條。在松褐天牛的羽化高峰期，天牛攜帶松材線蟲的數(shù)量最少，平均每頭天牛僅攜帶有線蟲778條，但此時(shí)雌蟲攜帶松材線蟲的數(shù)量多于雄蟲。 5.松褐天牛傳遞松材線蟲的時(shí)間動(dòng)態(tài)及其溫度對(duì)其傳播能力的影響松褐天牛補(bǔ)充營養(yǎng)取食過程中，將攜帶的松材線蟲通過松枝傷口傳遞到健康松樹，通過室內(nèi)飼養(yǎng)和統(tǒng)計(jì)分析研究松褐天牛成蟲傳遞松材線蟲的數(shù)量特征。結(jié)果表明，從成蟲傳遞線蟲數(shù)量的時(shí)間動(dòng)態(tài)看，松褐天牛羽化

9、后起初5天內(nèi)，松枝上檢測(cè)到的松材線蟲很少，說明成蟲傳遞線蟲數(shù)量并不明顯，隨著松褐天牛不斷地取食，松枝上的線蟲數(shù)量迅速增多，到20 d時(shí)傳遞數(shù)量最多，每頭天牛約有700條松材線蟲傳遞到健康松樹上，之后數(shù)量明顯下降。此外，研究了溫度對(duì)松褐天牛傳遞松材線蟲數(shù)量的影響。試驗(yàn)共設(shè)置22℃、28℃和34℃ 3個(gè)溫度梯度。結(jié)果表明松褐天牛成蟲的壽命隨溫度升高而縮短，其中雌蟲壽命短于雄蟲，且羽化進(jìn)度不太一致．多數(shù)松褐天牛攜帶的松材線蟲量在1000～99