水稻OsMED18基因的克隆與功能分析.pdf

1、水稻水稻OsMED18基因的克隆與功能分析基因的克隆與功能分析陳立陳立二○一四年二○一四年五月碩士學位碩士學位論文I水稻OsMED18基因的克隆與功能分析摘要水稻是世界上最重要的糧食作物之一，其產量的高低與其花的發(fā)育過程密切相關因此研究水稻穎花發(fā)育的分子機理已成為現代生命科學研究的重點和熱點之一。近年來，隨著對雙子葉植物擬南芥花發(fā)育研究的深入，其成花誘導、花器官形成以及分化的分子遺傳學機制有了較好的認識。但是，對單子葉植物水稻的花發(fā)育過

2、程的分子機制認識還相對滯后。轉錄中介體復合物（Mediatcomplex，MED）是一種大分子蛋白復合物，在真核生物的轉錄調控中，其基因的時空表達控制著植物的生長發(fā)育。在模式植物擬南芥中AtMED18在分生組織中表達，抑制FT表達。其突變體med18植株開花推遲，花器官發(fā)育異常，結實率低下。若能明確水稻中的OsMED18基因的表達情況，將具有重要的現實意義。本研究利用同源克隆從水稻農墾58中擴增了OsMED18基因全長片段，利用過表達與

3、RNAi干擾方法，研究OsMED18在水稻中的功能，通過半定量RTPCR與原位雜交，分析了OsMED18的時空表達模式。主要結果是：1.通過克隆OsMED18全長片段，構建了OsMED18過表達與干擾載體。2.通過農桿菌轉化，將過表達與干擾載體轉入到水稻農墾58中。3.經PCR檢測，共獲得18株陽性轉基因苗，其中有10株陽性RNAi干擾植株，8株陽性過表達轉基因苗。4.通過對轉基因植株后代進行表型分析和掃描電鏡實驗，發(fā)現其與對照相比，轉