卡尼鄂拉蜂鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白--7相似蛋白基因的克隆及差異表達(dá)分析.pdf

1、卡尼鄂拉蜂鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7相似蛋白基因的克隆及差異表達(dá)分析Genecloninganddifferentialexpressionanalysisofzinctransporter7like(ZnT7like)inApismelliferacarnica(Hymenoptera：Apidae)研究生：沈杰導(dǎo)師：吉挺副研究員專業(yè)：特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物飼養(yǎng)國(guó)家蜂產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(NYCYTX一43入國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31172272)資助Support

2、edbythethenationalbeeindustrytechnologysystem(NYCYTX一43)，theNationalNaturalScienceFoundationofChina(31172272)揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文蜂5個(gè)日齡工蜂咽下腺中的蛋白表達(dá)與轉(zhuǎn)錄水平基本一致。4本研究構(gòu)建了真核表達(dá)載體pEGFPZnT71ike，通過(guò)脂質(zhì)體(LTX)介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染DF1細(xì)胞，觀察基因表達(dá)產(chǎn)物的分布，并檢測(cè)mRNA和融合蛋白在體

3、外水平的表達(dá)。結(jié)果表明ZnT71ike蛋白不含信號(hào)肽序列，融合蛋白在細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)，轉(zhuǎn)染pEGFPC1后熒光蛋白均勻分布于整個(gè)細(xì)胞。5通過(guò)制備卡蜂咽下腺石蠟切片以及免疫組化分析，檢測(cè)卡尼鄂拉蜂3、6、9、12、16日齡ZnT71ike蛋白陽(yáng)性面積率，結(jié)果表明切片中細(xì)胞核被染上藍(lán)色，咽下腺ZnT71ike蛋白呈現(xiàn)棕黃色，背景清晰?？岫趵?個(gè)日齡咽下腺組織切片均呈ZnT71ike蛋白免疫陽(yáng)性，3日齡中的表達(dá)量極顯著高于其他日齡(氏001)