多酶型枯草芽胞桿菌的發(fā)酵工藝優(yōu)化與應用研究.pdf

1、本研究旨在對枯草芽胞桿菌的發(fā)酵工藝進行優(yōu)化，從而提高其發(fā)酵液的酶活。而后通過固態(tài)發(fā)酵的方法，將其應用到處理豆粕的步驟中，獲得了良好的效果。該研究對降低我國飼料行業(yè)成本，彌補飼料原料短缺，促進相關畜牧行業(yè)發(fā)展有著重大的現(xiàn)實意義。
　　 本研究以篩選細菌的多酶活性為出發(fā)點，從實驗室分離和保藏的一批芽胞桿菌中，通過功能篩選的方法分別鑒定了這些芽胞桿菌的不同酶活，選出了一株綜合活性最高的枯草芽胞桿菌BME-92，在實驗室水平對該芽胞桿菌

2、進行研究，發(fā)現(xiàn)其能夠分泌五種功能性酶，并且活性很高，這些酶包括蛋白酶，木聚糖酶，甘露聚糖酶，淀粉酶和纖維素酶。根據(jù)微生物發(fā)酵和培養(yǎng)的特點，設計出一個能夠發(fā)酵枯草芽胞桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基配方(豆粕20g/L，麩皮20g/L，(NH4)2SO41g/L，CaCl26g/L,K2HPO40.3g/L,MnSO4·H2O0.2g/L,MgSO4·7H2O0.2g/L)。應用Plackett-Burman設計和響應面分析法設計相結合的優(yōu)化方法，對該培

3、養(yǎng)基配方進行了優(yōu)化，確定了該培養(yǎng)基中影響枯草芽胞桿菌BME-92發(fā)酵產(chǎn)酶的主要因子及其最佳配方:豆粕17.3g/L，CaCl24.4g/L，K2HPO40.228g/L。其他影響不大的配方維持原比例。
　　 發(fā)酵配方確定之后，采用單因素優(yōu)化的方法對發(fā)酵條件進行了優(yōu)化，確定了最佳發(fā)酵條件如下:發(fā)酵溫度37℃，接種種齡12h，接種量2％，發(fā)酵時間48h。發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化和發(fā)酵條件優(yōu)化后發(fā)酵液的酶活普遍得到了提高，其中蛋白酶的活性從11