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1、本論文以蝦夷扇貝為實(shí)驗(yàn)材料,采用實(shí)驗(yàn)生理學(xué)、生態(tài)學(xué)、組織學(xué)及分子生物學(xué)方法,分別對(duì)不同規(guī)格、不同殼色及不同家系的蝦夷扇貝進(jìn)行高溫刺激實(shí)驗(yàn),并檢測(cè)其存活、耗氧、排氨及各項(xiàng)免疫指標(biāo),探明高溫刺激下蝦夷扇貝各組織中 HSP70表達(dá)量的時(shí)空變化規(guī)律,了解高溫刺激下蝦夷扇貝鰓組織結(jié)構(gòu)變化規(guī)律。主要研究結(jié)果如下:
(1)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢測(cè)了蝦夷扇貝對(duì)高溫突變的耐受能力及在不同高溫水平下的存活、耗氧率、排氨率、相關(guān)免疫酶活力、HSP70表達(dá)量及
2、鰓組織結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果顯示,經(jīng)96h脅迫,15-24℃處理組間蝦夷扇貝的存活無顯著差異(P>0.05),且均大于82.29%。但26℃處理組蝦夷扇貝在經(jīng)12h脅迫后,其存活降為0。蝦夷扇貝在8-、12-、24-、48-和96h半致死溫度(LT50)分別為27.52、24.41、24.37、24.24和23.81℃。另外,在高溫脅迫后,蝦夷扇貝體腔液中 CAT和 T-AOC含量變化顯著(P<0.05),其中,22、24和26℃處理組在脅迫8
3、h時(shí)達(dá)到最高值,之后恢復(fù)到對(duì)照組水平,而MDA含量和SOD活力隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)與對(duì)照組差異不明顯。高溫下蝦夷扇貝不同組織 HSP70表達(dá)量的變化顯示:鰓組織 HSP70表達(dá)量顯著高于外套膜和閉殼肌兩組織 HSP70表達(dá)量(P<0.05),隨溫度升高,各組織的 HSP70表達(dá)量呈上升趨勢(shì)。高溫變化下蝦夷扇貝鰓組織的結(jié)構(gòu)變化表明:隨溫度升高,鰓小瓣厚度、鰓絲寬度和絲間隔均顯著減小(P<0.05);鰓小腔和瓣間隔在溫度15-20℃之間時(shí),變
4、化不顯著(P>0.05),但當(dāng)溫度達(dá)到24℃時(shí),鰓小腔和瓣間隔擴(kuò)張明顯(P<0.05)。
(2)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢測(cè)了2種規(guī)格蝦夷扇貝在不同高溫水平下的存活、耗氧、排氨和免疫指標(biāo)。結(jié)果顯示,緩慢升溫實(shí)驗(yàn)中,15-22℃處理組之間蝦夷扇貝存活均大于90%,且組間無顯著差異(P>0.05),但在28-30℃時(shí)大貝存活顯著高于小貝(P<0.05)。小貝在15-24℃之間隨溫度升高代謝水平增強(qiáng),24℃時(shí)開始下降;大貝在15-26℃時(shí)代謝水平隨
5、溫度升高代謝水平增強(qiáng),26℃時(shí)降低。大、小貝各項(xiàng)免疫指標(biāo)均隨溫度升高呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),小貝在24℃達(dá)到最高值,大貝在26℃達(dá)到最高值。
(3)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢測(cè)了“楓葉貝”、“紅貝”和“白貝”3種殼色蝦夷扇貝在不同高溫水平下的存活、耗氧、排氨和免疫指標(biāo)。結(jié)果顯示:15-22℃處理組之間蝦夷扇貝存活均大于90%,且組間無顯著差異(P>0.05),但26℃時(shí)“楓葉貝”存活較其它殼色蝦夷扇貝低,且差異顯著(P<0.05)。15-24
6、℃期間,隨著溫度升高,三種殼色蝦夷扇貝的耗氧和排氨均顯著升高,但當(dāng)溫度達(dá)到26℃時(shí),蝦夷扇貝的耗氧和排氨均顯著下降。另外,蝦夷扇貝T-AOC水平、CAT、SOD和 POD的活力隨溫度上升呈先上升后下降的趨勢(shì),在24℃時(shí)達(dá)到最高值,并在26℃時(shí)顯著下降。
(4)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢測(cè)了5個(gè)家系(r2、w5、wr2、w1和rron)蝦夷扇貝在高溫變化下的存活及相關(guān)免疫指標(biāo)的變化規(guī)律。結(jié)果表明,當(dāng)溫度升到29℃時(shí),三個(gè)家系死亡率超過50%,
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