西芹腐根物質(zhì)浸提液處理后黃瓜枯萎病菌弱毒菌株篩選及其致弱機(jī)理的研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用蒸餾水、丙酮、乙醇等作為浸提劑浸提西芹腐根及根際區(qū)物，在培養(yǎng)基條件下運(yùn)用不同浸提液處理黃瓜枯萎病菌1次，后繼代培養(yǎng)至第六代，分別測(cè)定每一代不同處理病菌的菌落直徑、田間致病力大小，同時(shí)，測(cè)定每一代病菌產(chǎn)生鐮刀菌酸的含量、病菌細(xì)胞壁降解酶活性以及菌體內(nèi)防御酶活性的變化，以探求篩選黃瓜枯萎病弱毒菌株。主要結(jié)果如下:
　　1、分別用西芹腐根及根際區(qū)物蒸餾水、丙酮、乙醇浸提劑處理黃瓜枯萎病菌，在第一代各菌落化感效果最為明顯，隨著繼

2、代培養(yǎng)代數(shù)的增加，不同處理與對(duì)照、空白對(duì)照之間差距逐漸減小。至第六代，西芹腐根經(jīng)處理后病情指數(shù)表現(xiàn)為下降的趨勢(shì)（分別為:38.67％、37.83％、32.00％）;根際經(jīng)處理后病情指數(shù)總體呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。（分別為:39.50％、44.50％、36.17％）。同時(shí)經(jīng)西芹腐根及根際區(qū)物不同浸提液處理一次后，繼代培養(yǎng)至第六代，未得到黃瓜枯萎病弱毒菌株。而各處理在六代培養(yǎng)過(guò)程中總體的病情指數(shù)表現(xiàn)為先下降后上升的趨勢(shì)。
　　2、用西

3、芹腐根及根際區(qū)物蒸餾水、丙酮、乙醇浸提劑處理FOC1代，在對(duì)菌落培養(yǎng)6代過(guò)程中，分別測(cè)定了每代菌落分泌鐮刀菌酸的含量，鐮刀菌酸含量在菌落培養(yǎng)過(guò)程中總體表現(xiàn)為先逐漸減小，后緩慢增大的趨勢(shì)，在培養(yǎng)過(guò)程中，西芹腐根蒸餾水、丙酮、乙醇浸提液處理后鐮刀菌酸產(chǎn)量與空白對(duì)照相較，減少范圍分別為:4.44％-20.62％、8.37％-28.28％、6.92％-26.82％;根際蒸餾水、丙酮、乙醇浸提液處理后鐮刀菌酸產(chǎn)量與空白對(duì)照相較，減少范圍分別為:3

4、.31％-23.16％、2.89％-21.26％、7.23％-27.33％。在繼代培養(yǎng)的過(guò)程中，黃瓜枯萎病菌分泌細(xì)胞壁降解酶活性均表現(xiàn)為先下降，后稍上升，西芹腐根蒸餾水、丙酮、乙醇浸提液處理后菌體內(nèi)果膠酶、纖維素酶、β-葡萄糖苷酶的活性分別較空白對(duì)照下降:4.86％、3.81％、2.54％;54.98％、40.12％、24.69％;15.15％、11.61％、6.78％。根際蒸餾水、丙酮、乙醇不同浸提液在處理后菌體內(nèi)果膠酶、纖維素酶、β

5、-葡萄糖苷酶的活性分別較空白對(duì)照下降:3.03％、5.71％、3.88％;64.04％、62.50％、37.42％;9.78％、17.77％、15.03％。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，將低鐮刀菌酸的含量與細(xì)胞壁降解酶活性的變化作為輔助篩選條件。
　　3、用西芹腐根、腐根際區(qū)物蒸餾水、丙酮、乙醇浸提液，在培養(yǎng)基條件對(duì)黃瓜枯萎病菌進(jìn)行1代處理，然后連續(xù)多代（6代）培養(yǎng)，并對(duì)每代黃瓜枯萎病菌體內(nèi)POD、SOD、CAT三種酶活性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，西芹

6、腐根蒸餾水、丙酮、乙醇不同浸提液在處理后POD、SOD、CAT三種酶活性與CK空白相比分別從1代的28.27％、25.13％、31.73％;52.93％、47.83％、56.67％;6.47％、6.50％、6.32％下降至6代的10.20％、6.73％、8.47％;9.04％、12.64％、8.72％;4.44％、3.52％、5.50％。根際蒸餾水、丙酮、乙醇不同浸提液在處理后POD、SOD、CAT三種酶活性與CK空白相比分別從1代的3