太谷核不育小麥Ms2近等基因系的差異蛋白組學研究.pdf

1、為了獲得Ms2調控雄性不育的相關蛋白，從蛋白組學方面闡明Ms2雄性不育的形成機理，本實驗以‘魯麥15’為背景材料的太谷核不育小麥Ms2近等基因系:魯麥15，Ms2魯麥15和Rht10+ Ms2魯麥15為材料，根據(jù)鏡檢和形態(tài)確定幼穗發(fā)育時期，在減數(shù)分裂期、單核期和二核期取幼穗，提取幼穗全蛋白，雙向電泳分離，掃描后獲得蛋白表達圖譜，分析獲得的可育系（“魯麥15”）和不育系（“Ms2魯麥15”和“Rht10+ Ms2魯麥15”）在三個時期的差

2、異蛋白點;通過MOLDI-TOF進行蛋白點質譜鑒定，質譜結果進行數(shù)據(jù)庫搜索分析，明確差異蛋白點類型。獲得結果如下:
　　1、不育系蛋白點數(shù)少于可育系。2-DE圖譜結果表明，魯麥15的表達蛋白最多，在減數(shù)時期、單核時期和二核時期時期得到的蛋白點均為900多個;Ms2魯麥15各個時期的蛋白點均少于魯麥15，其中單核期最多，為890個左右，其次是減數(shù)時期有860個左右，二核期的蛋白點最少為820個左右，這些蛋白點大多分布在pH4.5-6

3、.5，分子量20-90KD之間。
　　2、三個幼穗發(fā)育期，可育系和不育系之間具有明顯不同的差異蛋白數(shù)目和差異蛋白點，二核期得到的差異點最多。在減數(shù)時期差異蛋白點有27個，其中魯麥15有14個，不育系有13個;單核時期差異蛋白點有39個，魯麥15有24個，不育系有15個;二核時期得到差異點為53個，魯麥15有28個，不育系有25個。除蛋白點DX1在魯麥15單核時期和二核時期都出現(xiàn)外，各個時期差異蛋白點不同。
　　3、對得到11

4、9個蛋白差異點以進行質譜鑒定和數(shù)據(jù)庫比對分析，80％的蛋白點得到了鑒定且可信度較高，對這些鑒定的蛋白進行功能分類，主要可以分為以下幾類:蛋白質合成相關蛋白，花粉合成相關蛋白，物質轉運和信號轉導相關蛋白，能量代謝相關蛋白，細胞程序性死亡相關蛋白，熱激蛋白以及一些功能未知的預測蛋白。
　　4、花粉敗育是由于在花粉發(fā)育過程中缺少某些特定的蛋白或者酶引起的。對這些鑒定后的蛋白進行功能分析，轉錄翻譯相關蛋白的缺失，細胞程序性死亡，能量代謝紊