雞傳染性支氣管炎病毒HH06株全基因序列測定分析及M蛋白多克隆抗體制備.pdf

1、C l a s s i f i e d I n d e x ： C o n f i d e n t i a l ( y e s ／n o ) ：n o C o d e ：1 0 2 2 4 N O ．1 1 0 6 3 5 7 D i s s e r t a t i o n f o r t h e M a s t e r D e g r e e S e q A n a l 。、 ．' “ o f t h e G c I B V

2、S e q u e n c e A n a l y s i s o l t h e G e n o m e o l 1 l i V t h e S t r a i n H H 0 6 a n d I t s M P r o t e i n P o l y c l o n a l A n t i b o d y P r e p a r a t i o n C a n d i d a t e ：D U 阢i w e i S u p e r

3、v i s o r ：P r o f ．L i G u a n g x i n g D e g r e e C a t e g o r y ：M a s t e r o f A g r i c u l t u r e C o l l e g e ：N o r t h e a s t A g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y F i r s t l e v e l d i s c i p l

4、i n e ：V e t e r i n a r y S c i e n c e S e c o n d l e v e l d i s c i p l i n e ：B a s i c V e t e r i n a r y S c i e n c e H a r b i n C h i n a J u n e 2 0 1 4東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位論文 2 ．2 ．7 I B V M 部分基因的亞克隆及重組表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建??????

5、???????2 5 2 ．2 ．8 重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)及鑒定??????????????????????2 6 2 ．2 ．9 重組M 1 蛋白的多克隆抗體的制備???????????????????2 7 2 ．2 ．1 0 M 1 蛋白多克隆抗體的生物學(xué)功能檢測?????????????????2 7 2 ．2 ．1 1 數(shù)據(jù)統(tǒng)計?????????????????????????????2 9 3 結(jié)果與分析???????????

6、?????????????????????3 0 3 ．1 全基因組R T - P C R 分段擴(kuò)增結(jié)果?????????????????????．．3 0 3 ．2 重組質(zhì)粒的鑒定???????????????????????????????3 0 3 ．2 ．1 重組質(zhì)粒的P C R 鑒定???????????????????????????3 0 3 ．2 ．2 重組質(zhì)粒的酶切鑒定????????????????????????．

7、．3 1 3 ．3 序列測定及拼接????????????????????????????3 1 3 ．4 全基因組序列的生物信息學(xué)分析?????????????????????．3 3 3 ．4 ．1 基因組結(jié)構(gòu)分析??????????????????????????．．3 3 3 ．4 ．2 序列同源性分析???????????????????????????3 5 3 ．4 ．3 系統(tǒng)進(jìn)化樹分析??????????????????

8、????????．．3 5 3 ．4 ．4 I B V S 基因裂解位點分析比較?????????????????????3 7 3 ．4 ．5 重組分析???????????????????????????????．3 7 3 ．4 ．6 壓力選折分析???????????????????????????．．3 8 3 ．5 重組表達(dá)質(zhì)粒P E T 3 0 A ．M 1 和P V A X ．M 1 的構(gòu)建???????????????

9、．．5 6 3 ．6 P E T - M 1 蛋白的表達(dá)及W E S T E R N B L O T 分析?????????????????5 6 3 ．7 M 1 蛋白多克隆抗體制備及其鑒定?????????????????????5 8 3 ．7 ．1 M 1 蛋白多克隆抗體效價檢測和W e s t e r n b l o t 分析?????????????5 8 3 ．7 ．2 M 1 蛋白多克隆抗體I F A 檢測???????

10、??????????????5 8 3 ．7 ．3 病毒感染抑制實驗?????????????????????????．．5 9 z I 討論?????????????????????????????????????????????．．6 l 4 ．1 全基因組分段擴(kuò)增???????????????????????????6 1 4 ．2 生物信息學(xué)分析???????????????????????????????6 l 4 ．3 M

11、蛋白表達(dá)分析????????????????????????????6 2 4 ．4 M 蛋白生物學(xué)功能分析?????????????????????????6 3 5 結(jié)論?????????????????????????????????????????????．．6 5 駕C 謝???????????????????????????????????????????????6 6 參考文獻(xiàn)???????????????????????