不同等級環(huán)境中肉兔骨骼肌性狀與MyoG基因表達量及其DNA甲基化分析.pdf

1、隨著養(yǎng)兔業(yè)生產(chǎn)水平的不斷提高和市場消費需求的改變,兔的肌肉性狀逐漸成為將來育種工作中的熱點。肌肉性狀的形成受到遺傳、營養(yǎng)水平和生存環(huán)境等因素的共同影響，在表觀遺傳水平上研究環(huán)境對肌肉生長性狀的分子調(diào)控機制，對改善動物肉品質(zhì)和滿足人們對肉質(zhì)安全性的需求具有積極的意義。在MyoD基因家族中，MyoG基因是唯一的在所有骨骼肌細胞系中均可表達的基因，在骨骼肌分化過程中MyoG基因是起關鍵作用的因子，此基因通過調(diào)節(jié)成肌細胞的融合和肌纖維的形成在肌

2、肉分化的過程中發(fā)揮關鍵作用。因此本實驗旨在利用MyoG基因作為本研究的表觀遺傳分子的候選基因，利用BSP和Q-PCR作為主要的分子實驗方法選取青島康大兔業(yè)發(fā)展有限公司連續(xù)培育六年的84日齡肉兔為試驗群體，其中普通環(huán)境新西蘭兔和SPF環(huán)境新西蘭兔6只，作為試驗材料來研究不同等級環(huán)境對肉兔生產(chǎn)性能的影響及其MyoG基因甲基化頻率和表達量與屠宰性狀的相關性分析。主要的實驗結果如下：
　　(1)對兩種不同等級環(huán)境新西蘭兔的屠宰生產(chǎn)性狀分析

3、，結果顯示SPF環(huán)境新西蘭兔宰前活重、全凈膛重、后腿重重量顯著高于普通環(huán)境中新西蘭兔（P＜0.05）；SPF級兔的主要器官系數(shù)與普通級兔的主要器官系數(shù)相比，雖然心和肺差異不明顯（P＞0.05），但其余的幾個器官SPF級均顯著低于普通級新西蘭兔（P＜0.05）。
　　(2)對兩種不同等級環(huán)境的新西蘭兔的背最長肌進行切片實驗，分析兩種環(huán)境中新西蘭兔的肌纖維性狀的差異，結果顯示SPF級新西蘭兔的肌纖維直徑顯著小于普通環(huán)境（P＜0.05）

4、，密度顯著大于普通環(huán)境（P＜0.05）。
　　(3)對兩種不同等級環(huán)境的新西蘭兔的后腿、背最長肌進行熒光定量分析，結果顯示SPF環(huán)境新西蘭肉兔的后腿MyoG基因表達量顯著高于普通環(huán)境的后腿的表達量（P＜0.05），SPF環(huán)境新西蘭肉兔背腰MyoG基因表達量顯著低于普通環(huán)境（P＜0.05），而且還發(fā)現(xiàn)在兩種環(huán)境中都有后腿表達量＞背腰的表達量的規(guī)律。
　　(4)對兩種環(huán)境中的新西蘭兔的后腿和背最長肌分別進行MyoG基因啟動子區(qū)域

5、即轉錄起始位點上游595bp至下游500bp左右的區(qū)域的甲基化分析，整體上發(fā)現(xiàn)轉錄起始位點上游-80bp至下游+506bp區(qū)域處于高甲基化狀態(tài)（＞60％）；啟動子區(qū)-331bp至-61bp區(qū)域處于低甲基化狀態(tài)（＜40%）;MyoG基因啟動子區(qū)域-593bp至-346bp區(qū)域處于中度甲基化狀態(tài)（40%-60%）。而且發(fā)現(xiàn)兩種環(huán)境中的新西蘭兔后腿在MyoG基因啟動子區(qū)域-80bp至+328bp的甲基化頻率存在明顯的差異，即在MyoG基因啟動

6、子-80bp至+328bp區(qū)域，SPF級環(huán)境肉兔后腿的甲基化率顯著小于普通級環(huán)境兔子后腿甲基化率（P＜0.05）；兩種環(huán)境中的新西蘭兔背腰在MyoG基因啟動子區(qū)域-80bp至+506bp的甲基化頻率存在明顯的差異，即在MyoG基因啟動子-80bp至+506bp區(qū)域，SPF級環(huán)境肉兔背腰的甲基化率顯著大于普通級環(huán)境兔子背腰甲基化率（P＜0.05）。
　?。?）通過對MyoG基因的啟動子區(qū)域的轉錄因子及其相關的結合位點預測分析再通過相