利用生防木霉基因提高水稻抗病性研究.pdf

1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文利用生防木霉基因提高水稻抗病性研究姓名：劉梅申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：植物病理學(xué)指導(dǎo)教師：徐同孫宗修2003.5.1蘊(yùn)小種完全免疫，但是浚株系對紋桔病的抗性無明顯提高。這盛縮果表明內(nèi)切幾丁質(zhì)酶基因ThEn。42已經(jīng)在受體植物中準(zhǔn)確表達(dá)，并且在提高水稻抗病性方麗起了重要作用。但并末獲得對2種瘸原都具有高度抗性的植株。3為邀一步提高本稻辯紋糖瘸和稻瘟瘸盼撓蛙，利用來滾予啥茨木霉(Trichodermahazianum)P1

2、菌株的3個(gè)麓壁降解酶基霾ech42、na970與gluc78構(gòu)麓了包括不同基因及其所有組合的7個(gè)檎物表達(dá)載體，每個(gè)揍因受獨(dú)立的Actl啟動子調(diào)控。構(gòu)建的7個(gè)載體不僅包含所有組合的3個(gè)外源基因，而且具街雙元載體本身攜帶的棚甲基因與Gus蒸因，從而為研究不閼T—DNA長度、不蘑基霾縫合與不嬲基因接確方淘對穗躲遺摶轉(zhuǎn)純效率以及鈐潺基霆在轉(zhuǎn)耩閡植株中表達(dá)的影響提供了一套比較完熬的材料。4利用本實(shí)驗(yàn)室的農(nóng)桿菌離效轉(zhuǎn)化體系，將3種胞壁降解酶基因ec

3、h42、na970與gluc78所有組合的7個(gè)載體分別轉(zhuǎn)入粳稻黯種石狩白毛(OryzasativaLsspJaponicacvIshikarishiroge)中，共獲褥霉生_壹橡l800余株。對部分再生檀椿滋行了PCR檢測和Southern雜交檢測，誕明96％的檀株攜帶有辨源基函中的懋少一個(gè)基因，80％以上的植株整合有完整的外源基因片斷，而且多數(shù)基闌在受體植株中有單個(gè)整合位點(diǎn)。對不同裁體的分化率和綠茵率進(jìn)行分析，發(fā)魄隧藿TDNA區(qū)長度的

4、增大，分化率和綠茁率都有降低的趨勢。攜帶glue78纂霞懿載矮導(dǎo)數(shù)分億率、綠螢率戳及分化速度夔顯著蹲甄。5轉(zhuǎn)旗因再生植株移栽到土壤中以后，不同載體的轉(zhuǎn)化植株成活率和正常植株比例明顯不同。轉(zhuǎn)化單個(gè)gluc78基因的植株成活率和正常植株比例最低，在所有攜帶gtuc78基因的載體的轉(zhuǎn)化植株中都有部分植株出現(xiàn)不同程度的矮化璦象，這穆檀櫬款時(shí)冀巍寒接秘任謗病豢憝。凌援下窶褒揭色斑點(diǎn)，不￡撞穗、結(jié)實(shí)，所檢測豹矮化德株中都具有較離水平的81，3一葡聚